Page 66 - 南京医科大学学报自然科学版

第41卷第9期
·1332 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2021年9月

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cp⁃Ti cp⁃Ti⁃col 峰。在 1 651 cm 附近的吸收峰为胶原蛋白酰胺Ⅰ
带。1 546 cm 附近的吸收峰为胶原蛋白酰胺Ⅱ带，
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反映了C⁃N伸缩和N⁃H弯曲。由于胶原蛋白的甘氨
酸和特征氨基酸含量高且形成独特序列（Gly⁃Pro⁃
Hyp） n，使得胶原蛋白在1 200 cm ~1 400 cm 处具有
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其他蛋白质所没有的红外光谱特征。1 200 cm ~
1 360 cm 谱带是由 C⁃N 伸缩和 N⁃H 弯曲引发的酰
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胺Ⅲ带，出现归属于Gly 骨架和Pro 侧链的CH2摇摆
振动峰，其中，在 1 238 cm 附近的吸收峰为胶原蛋
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白 N⁃H弯曲引发的酰胺Ⅲ带特征峰（图2B）。因此，
000 PS分析和FT⁃IR检测结果相一致，证实cp⁃Ti⁃col试件
×5
表面存在胶原蛋白凝胶涂层。

10 μm 10 μm 2.3 钛表面接触角
两组试件表面接触角测量结果如图 3 所示，相
对于cp⁃Ti试件，cp⁃Ti⁃col试件表面的接触角明显减
×10 000 小。接触角大小与亲水性呈反比，因而 cp⁃Ti⁃col 试
件表面具有更好的亲水性。
2.4 钛表面成骨细胞的黏附铺展
5 μm 5 μm
两组试件表面接种MC3T3⁃E1细胞2 h、4 h后的
图1 cp⁃Ti、cp⁃Ti⁃col试件表面形貌和扫描电镜图像
Figure 1 Surface morphology and SEM images of cp⁃Ti 黏附形态见图 4。低倍镜观察显示：两组试件表面
and cp⁃Ti⁃col specimens 的成骨细胞数量均随时间延长而增加，且 cp⁃Ti⁃col

A 1 s 1 s B
O C
1 s
O kll N cp⁃Ti⁃col

相对强度 cp⁃Ti⁃col 1 s O 2p Ti （ % ） 透射率 322.75

O kll
C 1 s 3 546.63 1 651.25 238.08
cp⁃Ti cp⁃Ti 1 1
1 200 1 000 800 600 400 200 0 4 000 3 000 2 000 1 000
结合能（eV） 波数（cm ）
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图2 cp⁃Ti、cp⁃Ti⁃col试件的XPS分析（A）和FT⁃IR检测（B）
Figure 2 XPS（A）and FT⁃IR（B）analysis of cp⁃Ti and cp⁃Ti⁃col specimens

试件表面的成骨细胞数量较 cp⁃Ti 试件更多。高倍 胞的增殖活性均显著增加，差异有统计学意义（P <
镜观察显示：两组试件表面成骨细胞铺展面积均随 0.05）。
时间延长而增大，相对于 cp⁃Ti 试件，cp⁃Ti⁃col 试件 2.6 钛表面成骨细胞的ALP活性
表面的成骨细胞骨架清晰，胞浆内可见丝状骨架， 微板法检测两组试件表面 MC3T3⁃E1 细胞的
细胞铺展更加充分。 ALP活性结果见图6A。随着时间增加，两组试件表

2.5 钛表面成骨细胞的增殖活性 面成骨细胞的 ALP 活性均有所增加。在两组试件
两组试件表面MC3T3⁃E1细胞增殖活性的CCK⁃8 表面培养成骨细胞 7 d、14 d 后，cp⁃Ti⁃col 组的 ALP
检测结果见图5。两组试件表面成骨细胞增殖水平 活性均显著高于 cp⁃Ti 组，差异有统计学意义（P <
随培养时间延长逐渐升高。培养第 1、3、6 d，相对 0.05）。染色法检测两组试件表面MC3T3⁃E1细胞的
于cp⁃Ti试件，相同时间点cp⁃Ti⁃col试件表面成骨细 ALP活性结果见图6B。随着时间增加，两组试件表