Page 10 - 南京医科大学学报自然科学版

第42卷第2期
·156 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2022年2月

研究结果一致。而神经酰胺三己糖苷（globotriaosyl⁃ 表1 对照组与NASH组小鼠神经节苷脂GM3及各亚型在
sphingosine，Gb3）也有上升趋势，GlcCer表达呈下降 肝脏中的含量
趋势，但差异没有统计学意义。此外，NASH组小鼠 Table 1 The expression of ganglioside GM3 and subtype
肝脏总 GM3（图 3）及长链 GM3 d18：1/20：0、超长链 species in liver samples of control and NASH
mice （×10 ，μmol/g）
-4
GM3 d18：1/22：0、GM3 d18：1/24：0和GM3 d18：1/26：0
GM3及其亚型 对照组（n=8） NASH组（n=8） P值
等 GM3 亚链在 NASH 小鼠肝脏内含量显著降低
总GM3 61.39 ± 8.73 49.26 ± 8.97 0.016
（表 1）。
GM3 d18:1/16:0 05.06 ± 1.75 04.93 ± 1.00 0.856
0.20 ** 0.20 ** 对照组 GM3 d18:0/16:0 02.57 ± 0.88 02.56 ± 0.50 0.988
CON
Concentration(umol/g) 0.008 （ μmol/g） 含量 0.008 * * GM3 d18:1/18:0 02.67 ± 0.32 02.35 ± 0.74 0.290
0.15
NASH
NASH组
01.79 ± 0.47
01.74 ± 0.52
GM3 d18:1/18:1
0.863
0.15
0.10
0.10
0.05
0.224
04.51 ± 0.68
GM3 d18:0/18:0
04.07 ± 0.69
0.05
GM3 d18:1/20:1
02.00 ± 0.43
0.104
02.40 ± 0.48
0.006
GM3 d18:1/20:0
0.005
03.96 ± 0.77
02.73 ± 0.70
0.006
0.004
0.002
0.002
03.60 ± 0.72
0.000 0.004 ** ** GM3 d18:0/20:0 02.77 ± 0.59 02.42 ± 0.37 0.174
0.123
GM3 d18:1/22:1
03.02 ± 0.68
GlcCer LacCer
Cer 0.000 GM3 Gb3 GM3 d18:1/22:0 07.38 ± 1.35 04.92 ± 1.50 0.004
Cer GlcCer LacCer GM3 Gb3
两组比较，P < 0.05，P < 0.01。 GM3 d18:0/22:0 03.39 ± 0.72 02.94 ± 1.04 0.337
**
*
图3 对照组小鼠和NASH组小鼠肝脏鞘糖脂表达谱 GM3 d18:1/24:1 08.11 ± 2.44 06.30 ± 1.54 0.098
Figure 3 Glycosphingolipid expression of control and GM3 d18:1/24:0 07.79 ± 2.09 04.78 ± 1.01 0.004
NASH mice GM3 d18:1/25:0 02.78 ± 0.54 02.44 ± 0.67 0.275
GM3 d18:1/26:0 02.63 ± 0.61 02.05 ± 0.40 0.042
2.3 NASH组小鼠中肝脏LacCer向GM3转化减少
NASH 组小鼠肝脏内总 LacCer 含量上升，而其 10
***
下游产物总GM3含量下降，为了进一步探究小鼠肝
8
脏内各类鞘脂间的转化关系，计算发现GM3/LacCer
比值在 NASH 组显著降低，提示鞘糖脂代谢通路由 6
LacCer向GM3的转化受抑制（图4）。进一步从编码 GM3/LacCer 4
GM3 合成酶的 ST3GAL5 基因入手，总结 GEO 数据
2
库中不同造模方式诱导的NASH小鼠模型肝脏RNA
⁃seq 数据中 ST3GAL5 基因表达水平的变化（表 2）， 0
发现 ST3GAL5 基因表达水平的变化在不同模型中 对照组 NASH组
两组比较， P < 0.001。（CON，n=8；NASH，n=8）。
***
存在差异，与本研究中造模方式相近的高脂高糖
图4 对照组小鼠和NASH组小鼠GM3/LacCer的比值
NASH 模型中 ST3GAL5 基因下调，而缺乏蛋氨酸胆 Figure 4 The ratio of GM3 verus LacCer in liver samples
碱饮食诱导模型可出现上调。 from control and NASH mice
3 讨 论
经 GM3 合成酶催化形成的下游产物⁃神经节苷脂
应用脂质组学技术寻找NASH生物学标志物及 GM3在NASH组小鼠肝脏内含量较对照组小鼠显著
治疗靶点已成为当前研究热点。本研究采用高脂 降低。这一变化引起了我们对肝脏内 GM3 代谢通
高糖饮食模式喂养小鼠7个月成功构建NASH模型 路与NASH病理变化关联性的关注。本实验结果显
小鼠，同时用普通饮食正常饮水喂养鼠做为对照 示，NASH 组小鼠肝脏中总GM3及长链GM3 d18：1/
组；取两组小鼠肝脏做肝脏切片、HE 染色后显微镜 20：0、超长链 GM3 d18：1/22：0、GM3 d18：1/24：0 和
下拍摄后进行 NAS 评分，对符合 NASH 标准的小鼠 GM3 d18：1/26：0亚型含量较对照组小鼠显著降低，
和对照组小鼠肝脏进行了鞘脂谱检测。结果显示， 且该下降是由于上游 LacCer 向 GM3 转化合成减少
NASH 组小鼠肝脏内总 Cer 及 LacCer 表达量较对照 所致。高脂高糖饮食下形成的 NASH 小鼠肝脏中
组显著升高，与既往研究一致；而以 LacCer 为底物 由β⁃鞘糖脂合成 GM3 通路受阻，推测编码 GM3 合