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第42卷第4期             蒋日月，邓 倾，周       青. 间充质干细胞来源外泌体治疗心肌梗死的研究进展［J］.
                  2022年4月                     南京医科大学学报（自然科学版），2022，42（4）：588-594                        ·591 ·


                            ［51］
                轻心脏纤维化 。                                          改善心脏功能。
                                                                  3.2  外泌体载体
                3  新型外泌体及外泌体载体
                                                                      外泌体的理想载体材料应具有以下特点：①在
                    外泌体静脉注射进入体内后会迅速聚积在肝                           目标部位有效保留外泌体并保持其结构完整性；②
                脏、脾脏、肾脏等器官中并迅速被胆管系统、泌尿系                           将外泌体释放到基质中，发挥其生物学功能；③与
                统排除体外或被网状内皮细胞吞噬，在心脏组织中                            目标部位紧密贴合，促进外泌体被周围细胞吞噬。
                含量极低 ，因此延长外泌体在心肌组织的滞留时                            构建外泌体载体的常用方法如下。
                        ［52］
                                                          ［53］
                间、增加其靶向特异性是提高其疗效的必然要求 。                           3.2.1 磁性纳米颗粒
                目前的研究主要集中在构建工程化外泌体和研发                                 有研究团队共同构建纳米颗粒，该颗粒由Fe3O4
                新型外泌体载体。                                          核和二氧化硅外壳组成，外壳上修饰聚乙二醇，通

                3.1  靶向心脏的工程外泌体                                   过腙键与抗 CD63 和抗肌球蛋白轻链（myosin light
                3.1.1 用肽/蛋白质对外泌体膜进行化学修饰                           chain，MLC）结合，双抗体通过与外泌体表面的
                    科学家们通过噬菌体展示技术以及体内淘选技                          CD63抗原结合捕获外泌体，再与受损心肌细胞上的
                术研发出可以特异性结合到心血管系统的归巢肽。                            MLC表面标志物结合，在受损心肌组织酸性pH环境
                Kanki 等 ［54］ 通过该技术发现多肽序列 CSTSMLKAC                中，腙键发生断裂导致捕获的外泌体局部释放 。在
                                                                                                          ［59］
                可 以靶向缺血心肌组织。 Vandergriff 等             ［55］ 通过    兔和大鼠 MI 模型中，磁引导下捕捉到的表达 CD63
                DOPE⁃NHS 与 CHP 反应，使 DOPE⁃CHP 的亲脂性尾                的外泌体积聚在梗死组织中，使梗死面积减小，
                部 插 入 外 泌 体 膜 中 ，从 而 使 外 泌 体 膜 携 带                LVEF 和血管生成得到改善。该研究首次提出通过
                CSTSMLKAC 肽。体外研究表明，使用 CHP 肽外泌                     操纵内源性外泌体生物学分布，建立了外泌体治疗
                体可以增加外泌体摄取，提高细胞活力，减少细胞                            MI的新方法。
                凋亡。通过 I/R 大鼠模型，证实该技术可以有效改                         3.2.2 功能性多肽水凝胶
                善心脏功能，减少梗死面积，促进细胞增殖和血管                                有研究利用肽两亲物 PA 和 NapFF 自组装肽水
                生成。研究表明，给MI小鼠静脉注射携带缺血心肌                           凝胶，将心脏保护肽（GHRPS）和基质金属蛋白酶
                靶向肽的缺氧条件下衍生的BMSC⁃exo，能靶向心脏                       （matrix metalloproteinase，MMP）⁃2 可降解序列 Gly⁃
                缺血病变部位，通过抑制心肌细胞凋亡促进受损心                            Thr⁃Ala⁃Gly⁃Leu⁃Ile⁃Gly⁃Gln（GTAGLIGQ）加入水凝
                肌修复 。                                             胶中制备出PGN水凝胶，再用PGN水凝胶包封外泌
                      ［56］
                3.1.2  通过基因或化学修饰使外泌体分泌细胞表                         体 ［60］ 。其中GHRPS属于生长激素释放肽的成员，可
                达肽/蛋白质                                            以激活促存活途径并抑制炎症和纤维化，而MMP⁃2
                    Wang 等 ［57］ 采用分子克隆技术，将 CSTSMLKAC              可降解序列能够使水凝胶降解，确保包封的外泌体
                肽插入到外泌体表面普遍富集的跨膜蛋白 Lamp2b                         和 GHRPS 肽释放到周围组织中。研究结果证实外
                基因序列上，通过慢病毒包装技术，使BMSC高表达                          泌体⁃PGN 水凝胶能够有效包封外泌体并确保外泌
                CSTSMLKAC 肽和 Lamp2b。体外实验结果表明，该                    体的稳定性和持续释放，将外泌体⁃PGN水凝胶注入
                技术可以使缺氧损伤的H9C2细胞外泌体摄取明显                           大鼠心脏的梗死边界区，治疗后21 d仍能在缺血心
                增加。在小鼠 MI 模型中，与空白外泌体相比，缺血                         脏组织中检测到PKH⁃26标记的外泌体。
                区 CSTSMLKAC 肽外泌体明显增多。同时，该外泌                           有研究团队采用微创的方式，通过经皮心包膜
                体治疗可减轻缺血心肌的炎症和细胞凋亡，减少纤                            内导管在 MI 小鼠心包腔内喷涂含 MSC⁃exo 的血小
                维化，促进血管生成，改善心功能。                                  板纤维蛋白凝胶，明显改善了心脏功能并减少了
                    Wang 等 ［58］ 将靶向心肌肌钙蛋白 I 的 STSMLKA             纤维化，并促进了内源性血管生成                ［61⁃62］ 。该团队还
                肽融合到 Lamp2b 的 N 端并通过基因转染技术使其                      在猪 MI 模型中比较了外泌体凝胶开胸递送方法
                在BMSC中高表达，收集高表达STSMLKA肽的外泌                        与胸腔镜引导的微创外泌体凝胶注射方法，血常
                体，再通过电穿孔技术将下调细胞增殖抑制基因表                            规报告显示开胸手术组的中性粒细胞和白细胞计
                达的 hsa⁃miR⁃590⁃3p 加载到修饰后的外泌体，通过                   数高于微创组，炎症反应较重。该微创凝胶注射
                静脉注射的方式，该工程化外泌体能聚集在MI大鼠                           技术减少了创伤性手术的不利影响，更有利于临
                梗死区域，增强了梗死周围区域的心肌细胞增殖并                            床转化   ［62］ 。
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