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第42卷第4期
               ·512 ·                            南 京    医 科 大 学 学         报                        2022年4月


                  在过去的几十年里糖尿病在全球范围内发病                           gelatinase⁃associated lipocalin，NGAL）、24 h 尿蛋白、
              率大幅上升，糖尿病肾病（diabetic kidney disease，              甲状旁腺激素（parathyroid hormone，PTH）等。估算
              DKD）已经成为许多国家终末期肾病的主要原因                    ［1-2］ 。  的肾小球滤过率（estimated glomerular filtration rate，
              DKD的发病机制复杂多样，但肾脏纤维化包括肾小                           eGFR）根据慢性肾脏疾病流行病学协作（CKD⁃EPI）
              球硬化和肾小管间质纤维化是疾病进展到终末期                             公式计算。
              肾脏病的共同通路 。越来越多的证据表明，上皮                                 肾脏标本由两名经验丰富的病理学家通过光
                               ［3］
              间质转分化（epithelial⁃mesenchymal transition，EMT）      学显微镜、免疫荧光和电子显微镜进行常规检查，
              在肾纤维化中起着至关重要的作用。EMT 是一种                           每个患者肾脏穿刺标本肾小球个数≥5。依据HE染
              表型变化，它会使正常细胞失去上皮特征转变为成                            色、PAS 染色、银染以及 Masson 等光学显微镜下的
              纤维细胞    ［4-5］ 。                                   染色，再结合电镜结果进行DKD病理分期诊断。诊
                  人类抗原R（human antigen R，HuR）是最具特征               断标准如下 ：Ⅰ期，光镜下无或有轻微病变，电镜示
                                                                          ［7］
              性的 RNA 结合蛋白之一，是一种约 36 kDa 的蛋白                     基底膜增厚（年龄≥9岁患者，基底膜增厚标准为男性
              质。它可以通过与 3′⁃UTR 中富含 A 或 U 的序列元                    基底膜厚度 > 430 nm，女性基底膜厚度 > 395 nm）；
              件相互作用，参与调节 mRNA 的稳定性。HuR 与                        Ⅱa 期，出现轻微的系膜扩张（>25%所见系膜区）；
              EMT密切相关。TGF⁃β1/HuR反馈回路可以调节心                       Ⅱb期，严重的系膜扩张（>25%所见系膜区）；Ⅲ期，

              脏成纤维细胞中的纤维化反应。有文献报道，DKD                           出现 Kimmelstiel⁃Wilson 结节（K⁃W 结节）；Ⅳ期，严
              患者和大鼠肾组织中的HuR表达升高。此外，HuR                          重的肾小球硬化（>50%肾小球硬化）。
              与转录因子和细胞因子的 3′⁃UTR 结合，诱导 EMT。                     1.2.2  免疫组化
              而抑制HuR可能阻断高糖诱导的肾小管EMT，减轻                               石蜡包埋组织切片2 μm，脱蜡后切片在柠檬酸
                               ［6］
              DKD 中的肾纤维化 。这些均提示 HuR 参与 DKD                      盐缓冲液（pH6.0）中 20 min，并用磷酸盐缓冲液
              的进程，HuR 可能成为 DKD 肾脏纤维化程度的指                        （PBS）洗涤。在室温下用5%牛血清白蛋白封闭1 h，
              标。但是，目前有关不同分期的DKD患者HuR表达                          切片与 HuR 抗体（1∶8 000，Santa Cruz 公司，美国）
              差异的研究相对较少，因此，本研究选取 2014 年                         4 ℃孵育过夜。切片用 PBS 洗涤，然后与二抗在
              1 月—2019年5月在南京医科大学第一附属医院经                         37 ℃孵育1 h。然后切片用DAB染色2 min，再用苏
              肾活检明确诊断的DKD 患者165例，研究经肾脏病                         木精复染细胞核，最后脱水并固定。每个部分由
              理明确的 DKD 不同病理分期患者肾组织中 HuR 表                       显微镜随机拍摄 8~10 张照片，并由 Image⁃Pro Plus
              达差异。                                              计算。
                                                                1.3  统计学方法
              1 对象和方法
                                                                     应用 SPSS 20.0 统计软件进行统计学分析。计
              1.1 对象                                            量资料进行正态性检验，符合正态分布资料的数
                  选取 2014 年 1 月—2019 年 5 月在南京医科大                据，以均数±标准差（x ± s）表示，非正态分布计量资
              学 第 一 附 属 医 院 经 肾 活 检 明 确 诊 断 DKD 患 者             料采用中位数（四分位数）［M（P25，P75 ）］表示，采用
              165 例。排除标准：①年龄 < 18岁；②急性肾损伤患                      非参数检验。低于检测值下限的数值被估算为
              者；③穿刺肾小球 < 5个；④合并严重其他系统疾病                         各检测下限的的一半            ［8］ 。使用 Spearman 相关分
              和其他肾小球疾病患者。从肿瘤病灶0.5 cm处收集                         析临床指标与 HuR 表达的相关性。两组间比较
              相应的癌旁组织 16 例，并经病理证实为正常组织。                         采用独立样本 t 检验，多组之间比较采用单因素
              本研究经南京医科大学第一附属医院伦理委员会                             方差分析。所有检验均以双侧P < 0.05为差异有统
              批准（伦理审查号：2018⁃SR⁃250），所有研究对象均                     计学意义。
              知情同意。
                                                                2 结     果
              1.2  方法
              1.2.1  临床数据                                       2.1  患者基本资料
                  肾活检时收集患者的以下临床资料：年龄、性别、                             共有 165 例患者被纳入本研究，其中男 127 例
              血压、空腹血糖、糖化血红蛋白、血尿素氮、血清肌酐、                         （76.50%），女 38 例（23.50%），血 清 肌 酐 水 平 为

              中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（neutrophil                       ［111.50（84.05，175.95）］μmol/L，血红蛋白（111.44 ±
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