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第42卷第5期 王雨竹，张 许，李 仲. 成熟SVFs细胞与Hepa1⁃6细胞共培养模型的建立及对肝细胞脂
2022年5月 代谢的影响［J］. 南京医科大学学报（自然科学版），2022，42（05）：603-609 ·607 ·

A 0 d 6 d ed receptor alpha，PPARα）、乙酰辅酶A氧化酶1（ac⁃
yl⁃CoA oxidase 1，ACOX1）、微粒体甘油三酯转移蛋
白（microsomal triglyceride transfer protein，MTTP）的
变化。如图4所示，可见经共培养后的Hepa1⁃6细胞
GPAT1、CD36 表达水平明显上调，而 FATP2、ACC、
FAS、SREBP1c、SCD1、PPARα、ACOX1、MTTP 等无
B
8 000 * 明显变化，提示 GPAT1、CD36 表达水平的升高可能
0 d
6 000
6 d * 是引起共培养后Hepa1⁃6细胞甘油三酯水平增加的
mRNA相对表达量 200 * 原因。
4 000
2 000
150
讨 论
3
100
50
8 *** ** 近年随着肥胖症患病率明显升高，非酒精性脂
4 **
0 肪肝的发病率也显著增加 ［19-21］ 。肥胖诱导非酒精性
Adiponectin
PPARγ PGC⁃1α PLIN1 FSP27 FAS 脂肪肝发生的原因诸多，作用机制非常复杂。脂肪
和肝脏是肥胖症和非酒精性脂肪肝病发生密切相
A：SVF 经诱导分化 0 d 或 6 d 后的细胞形态；B：RT⁃PCR 检测
关的组织。目前认为，脂肪组织不仅能够储存能
SVF 诱导分化6 d后分化标志基因mRNA 水平的变化。与第0天比
较，P < 0.05，P < 0.01， P < 0.001（n=3）。 量，还能分泌瘦素、脂联素等脂肪因子 ［22-23］ 。因此，
***
*
**
图2 经诱导分化6 d SVF细胞已成功分化为成熟脂肪细胞 脂肪细胞脂质代谢异常以及病理性脂肪因子的分
Figure 2 SVF cells were successfully differentiated into 泌，必然会引起肝细胞相应信号的改变，从而引起
mature adipocytes 肝细胞表征的变化。虽然对脂肪细胞的能量代谢
tein 2，FATP2）、乙酰辅酶 a 羧化酶（acetyl⁃CoA car⁃ 以及分泌功能具有较深入了解，但对其影响肝细胞
boxylase，ACC）、脂 肪 酸 合 酶（fatty acid synthase， 的具体过程知之不多。寻找到方便可行且有效的
FAS）、固醇调节元件结合转录因子1（sterol regulato⁃ 体外模型，对于研究脂肪细胞和肝细胞的相互作用
ry element binding transcription factor 1，SREBP1c）、3 具有重要意义。
⁃磷酸甘油酰基转移酶 1（glycerol⁃3⁃phosphate acyl⁃ 生理条件下，脂肪组织分泌的细胞因子通过血
transferase 1，GPAT1）、硬脂酰辅酶 A 去饱和酶 1 液循环到达靶器官如肝脏等，与对应的受体结合或
（stearoyl⁃coenzyme A desaturase 1，SCD1）、过氧化物 进入细胞内部发挥作用 ［24］ 。Transwell 小室共培养
酶体增殖激活受体α（peroxisome proliferator activat⁃ 为间接接触共培养，0.4 μm的小室孔径能够阻拦细

A B

分化第6天SVF 贴壁24 h的Hepa1⁃6 无血清共培养48 h

C *** D 40
Transwell
无血清共培养48 h （ μmol/g） 80 （ μmol/g） 30
60
甘油三酯 20 10
贴壁24 h的Hepa1⁃6 40 胆固醇 20

0 0
对照组 共培养组 对照组 共培养组
A：SVF与Hepa1⁃6共培养实验组培养方法示意图；B：Hepa1⁃6对照培养示意图；C：进行Transwell 共培养48 h后Hepa1⁃6的甘油三酯和总
胆固醇水平。与对照组比较， P < 0.001（n=3）。
***
图3 SVF细胞和Hepa1⁃6共培养
Figure 3 SVF cells and Hepa1⁃6 co⁃culture model