Page 12 - 南京医科大学学报自然科学版
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第42卷第5期
               ·608 ·                            南 京    医 科 大 学 学         报                        2022年5月


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                                           对照组
                                           共培养组
                                       1 mRNA相对表达量  3 2           **
                                       4





                                       0
                                      SREBP1c  ACC  FAS  SCD1  GPAT1  CD36  FATP2  PPARα ACOX1  MTTP


                                               与对照组比较，P < 0.01， P < 0.001（n=3）。
                                                                 ***
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                                     图4 Transwell共培养48 h后Hepa1⁃6脂代谢通路关键基因变化
                         Figure 4 Changes of key genes of lipid metabolism in Hepa1⁃6 by co⁃cultured 48 h in Transwell

              胞发生迁移，但分泌因子以及营养物质能透过小孔                            Srebp1c、ACC 等介导的脂肪酸从头合成；PPARα、
              在两种细胞间自由扩散            ［25］ 。相较于自分泌旁分泌             ACOX1等介导的脂肪酸氧化减少；极低密度脂蛋白
              模式下的两细胞直接共培养              ［26-27］ ，Transwell 共培养  （very low⁃density lipoprotein，VLDL）等介导的甘油三
              更好地模拟了脂肪细胞与肝细胞间的实际分泌循                             酯分泌减少     ［28］ 。通过对Hepa1⁃6细胞CD36、FATP2、
              环，对于研究脂肪⁃肝脏交流具有重要的意义。本研                           ACC、FAS、SREBP1c、SCD1、GPAT1、PPARα、
              究中，采用无血清培养基支持共培养体系，不仅不                            ACOX1、MTTP 等 基 因 表 达 水 平 进 行 检 测 ，发 现
              干扰分泌因子的正常分泌，且能够较好的排除血清                            GPAT1、CD36的表达量明显增加。外源性脂肪酸由
              物质对分泌因子作用的干扰。同时，该体系避免外                            CD36摄取入肝后，会分解形成乙酰辅酶A。而新生
              源性脂质参与，从而为两种细胞间交流创造影响因                            成的乙酰辅酶 A 可被 GPAT1 等酯化形成溶血磷脂
              素相对单一的环境。                                         酸（lysophosphatidic acid，LPA），随后继续参与合成
                  SVF 包含有较多成纤维干细胞，具有分化的潜                        甘油三酯     ［29］ 。这表明，成熟SVF 很有可能是通过影
              能，在体外能较好地模拟脂肪细胞从前体细胞发育                            响 CD36 的表达，从而提高了肝细胞对 SVF 细胞分
              成为成熟脂肪细胞的过程。SVF细胞每次使用均需                           泌的游离脂肪酸的摄取。而随着肝细胞内外源性
              经原代提取，相较于连续传代的脂肪细胞系，能更                            游离脂肪酸的增多，使得肝内乙酰辅酶 A 水平提
              好地代替小鼠体内真实脂肪细胞前体。经诱导分                             高。为适应过高的乙酰辅酶 A，GPAT1 发生代偿性
              化 的 SVF 出 现 明 显 较 大 脂 滴 ，且 分 化 标 志 物              上调，并使甘油三酯合成增多，最终诱发肝脏脂质
              PPARγ、PGC⁃1α、Plin1、FSP27、FAS、Adiponectin 等        堆积。由脂肪酸摄取的增加诱发肝细胞代偿性机
              显著上调，表明成熟SVF 能够高效分化为成熟脂肪                          制的变化，这可能是脂肪细胞导致肝细胞脂质堆积
              细胞。为配合 SVF 的鼠源性，本研究选用 Hepa1⁃6                     的关键所在。这也提示，CD36在脂肪-肝脏交流中
              作为肝细胞来源。                                          发挥着十分重要的作用。
                  生理条件下，脂肪动员后对肝脏的影响主要表                               综上所述，通过 Transwell 小室建立成熟 SVF 与
              现在脂肪酸和甘油三酯的代谢。经 Transwell 共培                      Hepa1⁃6细胞共培养模型，能成功诱导Hepa1⁃6脂质
              养后，Hepa1⁃6 细胞甘油三酯水平较对照组显著增                        堆积增多，且该模型成模机制与机体宏观器官交流
              加（P < 0.001），而总胆固醇水平无明显变化，表明肝                     的媒介形式基本吻合，具有较高的可行性。同时，
              细胞通过与脂肪细胞进行物质、信号的交流，使得                            本实验发现，成熟 SVF 细胞可能通过影响 CD36、
              自身脂质堆积明显提高，能够抵御饥饿带来的营养                            GPAT1 的表达来促进肝细胞脂质堆积。以上研究
              不良，两种细胞共培养非常成功。但所测总胆固醇                            为探索脂肪⁃肝脏交流提供了简明有效的体外模型。
              水平无明显变化，其有关机制值得继续研究。同时                            ［参考文献］
              也提示，成熟 SVF 细胞可能通过影响 Hepa1⁃6 细胞
                                                                ［1］ CHOOI Y C，DING C，MAGKOS F. The epidemiology of
              的甘油三酯代谢通路来引起脂质堆积增多。                                    obesity［J］. Metabolism，2019，92：6-10
                  造成肝细胞脂质堆积的原因，主要由以下几个                          ［2］ BRAY G A，HEISEL W E，AFSHIN A，et al. The science
              方面：由 CD36、FATP2 等介导的脂肪酸摄取增多；                           of obesity management：an endocrine society scientific
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