Page 80 - 南京医科大学学报自然科学版

第42卷第6期
·832 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2022年6月

lose，HPMC）作为粘合剂，34.2 mg 滑石粉作为粘合 吸收峰，在450 nm处有一个非激发依赖的蓝色荧光
剂，936.2 mg淀粉作为填充剂和崩解剂。按10片的 发射。CD 的红外光谱进一步说明了其结构。如图
量将细粉混合均匀后，准确称取适量，加入NaOH溶 1B 所示，3 418 cm 处的峰对应 O⁃H 键的伸缩振动
-1
液超声溶解，再用 0.22 μmol/L 滤膜过滤后稀释，作 特征吸收带，3 252 cm 处的峰对应N⁃H基团的伸缩
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-1
为供试液。分别将低、中、高 3 个浓度的上述 6⁃TG 振动，1 556 cm 处的峰对应 N⁃H 基团的弯曲振动，
供试溶液加入到检测体系中，按6⁃TG标准液制备的 1 655 cm 处的峰为 C=O 的伸缩振动峰，说明 CD 表
-1
标准曲线进行测定，共平行测定3批。 面有羧基和氨基。
2.2 基于CD检测6⁃TG的比率荧光探针构建原理
2 结 果
小分子物质 OPD 本身没有荧光，但是在游离
2+
2+
2.1 CD的表征 Cu 存在的情况下，OPD能够被Cu 氧化生成具有黄
所合成 CD 的 UV⁃vis 吸收和荧光光谱如图 1A 色荧光的DAP（图2A）。利用此反应，结合所合成的
所示。可以看出，CD 在 240 nm 和 353 nm 处有明显 CD，构建了一种比率型荧光探针，用于准确地定量

A B
b
（a）Abs
（b）350 nm
c
（c）360 nm
d
（d）370 nm
吸光率 e （e）380 nm 荧光强度 透光率 2 932
（f）390 nm
（g）400 nm
a
（h）410 nm 3 252
3 418
f 1 655 1 556
g
h
4 000 3 000 2 000 1 000
-1
200 300 400 500 600 700 波数（cm ）
波长（nm）
A：CD的紫外吸收光谱和在不同激发条件下的荧光发射光谱［内插图：CD在可见光（左）和紫外光（右）下的图像］；B：CD的红外光谱图。
图1 CD的表征图
Figure 1 Characterization of carbon dot
检测抗肿瘤药物 6⁃TG。从图 2B 可以看出，CD 不影 从图 3B 的谱线 a 和 b 可以看出，Cu 氧化 OPD
2+
响该体系中的 Cu 氧化 OPD 生成发黄色荧光的 生成的DAP和CD二者最大发射波长处的荧光互不
2 +
DAP，但其荧光被淬灭。当该体系中加入 6⁃TG 时， 干扰。当体系中加入CD后，生成的DAP使CD的荧
由于其结构中的硫原子可以和游离Cu 结合形成稳 光强度明显变弱。此体系中加入6⁃TG时，由于6⁃TG
2+
定的复合物，从而抑制 Cu 对 OPD 的氧化，减少了 与Cu 结合，生成的DAP减少，CD荧光恢复，因此所
2+
2+
DAP 的生成。并且随着 6⁃TG 浓度的增加，生成的 合成的CD与OPD符合构建比率荧光探针的条件。
DAP越少，其黄色荧光越弱，则对CD的荧光淬灭越 文献表明，某些 CD 的荧光可以被 Cu 猝灭 ［10］ ，
2+
少，CD 荧光逐渐恢复。因此，可以通过蓝光和黄 也有一些CD不受Cu 影响 ［15］ ，可能是不同碳源合成
2+
光的荧光强度比值（F450/F560）作为信号输出，实现 的CD表面性质差异所致。为了确定该比率荧光探
对 6⁃TG的定量检测。 针中Cu 是否会对所合成的CD产生影响，考察了不
2+
为了进一步探明 CD 荧光淬灭的原因，测定了 同浓度的Cu 对CD的荧光强度的影响（图4A）。在
2+
OPD 和 DAP 的紫外可见吸收光谱图，以及 CD 的荧 Cu 浓度为0~300 μmol/L 范围内，CD 的荧光强度保
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光光谱。如图 3A 所示，OPD 无吸收，DAP 有较强吸 持相对稳定，表明 Cu 不会影响该 CD 的荧光强度，
2+
收，且吸收光谱与CD的发射光谱有明显的重叠，因 所合成的 CD 适用于与 Cu 和 OPD 构建的比率荧
2+
此，DAP 和 CD 之间可能存在荧光内滤效应或者荧 光探针体系。同时，考察了其他常见金属离子
光共振能量转移。而Xu等 ［15］ 研究表明，当体系中生 （100 μmol/L）对 CD 荧光强度的影响（图 4B）。在
成 DAP 时，CD 的荧光寿命未发生改变，并且 CD 和 Mn 、Fe 、Al 、Ba 、Na 、Mg 、K 存在的情况下，CD荧
2+
+
2+
3+
2+
+
3+
DAP 均带正电荷，因此 DAP 与 CD 之间因静电排斥 光强度几乎没有发生变化。表明所合成的CD在各
而无法靠近，故CD的猝灭是由于内滤效应。 种金属离子的存在下能够保持稳定。