Page 82 - 南京医科大学学报自然科学版

第42卷第6期
·834 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2022年6月

A B C
30 30 0.8 0.8
6⁃TG
25 Blank 25
0.6 0.6
20 20
F450/F560 15 15 信噪比 F450/F560 0.4 F450/F560 0.4
10 10
0.2 0.2
5 5
0 0
0 0
5.0 6.0 6.5 7.0 7.5 8.0 9.0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 0 50 100 150 200 250 300
pH 时间（min） 铜离子浓度（μmol/L）
A：反应pH；B：Cu 与OPD的反应时间；C：Cu 浓度。
2+
2+
图5 实验条件优化图（n=3）
Figure 5 The optimization diagram of experimental conditions（n=3）

时对该体系的干扰。图6显示了这些物质的比率荧 的逐渐增大，反应体系的荧光强度比值（F450/F560 ）也
光值（F450/F560 ），其中谷胱甘肽、半胱氨酸和6⁃TG的浓 增大。6⁃TG浓度在40.00~160.00 μmol/L范围内，体
度为 100 μmol/L，抗坏血酸的浓度为 500 μmol/L， 系荧光强度比值与 6⁃TG 浓度呈现良好的线性关
Na 、K 、Mg 、NO3 、Cl、SO4 、CO3 、胞嘧啶、尿嘧啶的浓 系，线性回归方程为 y=0.066x-2.537，R =0.992，检
⁃
2+
2⁃
⁃
2⁃
+
2
+
度均为50 mmol/L，辅料淀粉、滑石粉和HPMC的浓度 测限（3σ/K）为61.10 nmol/L，其中σ为空白样品的标
分别为304.800 μg/mL、11.370 μg/mL和1.505 μg/mL。 准偏差（n=10），K为标准曲线的斜率。
可以看出，实验的各种物质对体系基本没有干 通过测定制备的模拟药片，对本方法的回收
扰。其中，抗坏血酸由于具有还原性，可以将Cu 还 率、精密度进行了检验。由表1实验数据可以看出，
2+
原，因此对该体系有一定的干扰，但其影响较弱，可 低、中、高3个浓度的日内日间精密度的相对标准偏
以忽略。尽管半胱氨酸、谷胱甘肽中也含有硫原 差（relative standard deviation，RSD）小于 2.0%，回收
子，但是其对该比率探针的荧光强度没有明显影 率均在（101.5 ± 3.5）%，由此证明该方法具有较高的
响，这归因于 Cu 与 6⁃TG 硫醇基团间强的亲和力， 精密度和准确度，可以用于实际样品中6⁃TG的测定。
2+
且6⁃TG的pKa（7.44）低于谷胱甘肽pKa（9.20）、半胱
3 讨 论
［10］
氨酸 pKa（8.00） 。因此 6⁃TG 比半胱氨酸、谷胱甘
2+
肽更倾向于与游离Cu 结合，该比率荧光探针对6⁃TG 6⁃TG是一种与鸟嘌呤结构相似的物质，20世纪
有更高的选择性，可以为6⁃TG提供可信的定量检测 50 年代初被引入临床，并首次在患者身上进行研
结果。 究 ［16］ 。作为一种抗癌药物，6⁃TG通常用于治疗急性
2.5 6⁃TG传感平台的方法学验证结果 淋巴细胞白血病（acute lymphocytic leukemia，ALL）。
本实验根据荧光强度比值与6⁃TG浓度的关系， 6⁃TG由于安全剂量范围狭窄，服用剂量小起不到良
实现 6⁃TG 浓度的定量检测（图 7）。随着 6⁃TG 浓度 好的治疗作用，服用剂量大则存在潜在不良反应，

5

4

F450/F560 3

2

1

0 + + 2+ - - 2 - 2 -
6⁃TG Blank Na K Mg Cl NO 3 SO 4 CO 3 Urea Glu Cys GSH Cy Ur AA Starch Talc HPMC

图6 常见干扰物质的影响（n=3）
Figure 6 The effects of common interfering substances（n=3）