Page 81 - 南京医科大学学报自然科学版
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第42卷第6期 梁志钢,任丹丹,程 霞,等. 基于碳点的比率荧光探针用于检测6⁃硫鸟嘌呤[J].
2022年6月 南京医科大学学报(自然科学版),2022,42(06):830-836 ·833 ·
A
NH2 N NH2
6⁃TG CDs q⁃CDs
N Cu 2+ OPD DAP
NH2 NH2
OPD DAP
B
H2N NH2 EX:380 nm
N Cu SH
H
+ hydrothermal N
N
O OH
O O
H2N N N
H
HO OH EM:450 nm 6⁃TG
EX:380 nm EX:380 nm EX:380 nm
IFE
NO IFE
EM:560 nm EM:450 nm EM:450 nm
A:OPD被Cu 氧化生成DAP;B:比率荧光探针原理图。
2+
图2 基于碳点的比率荧光探针用于检测6⁃TG的原理示意图
Figure 2 Schematic illustration of the CD⁃based ratiometric fluorescence probe for the detection of 6⁃TG
2+
2.3 实验条件优化 100 μmol/L,由于 Cu 与 6⁃TG 反应 10 min、CD 加入
为了获得足够高的灵敏度、确保反应比较充 5 min 之后,该体系荧光强度比值保持不变,因此
2+
分,同时尽可能地缩短反应时间,最终选择了pH7.0 Cu 与 6⁃TG 反应时间、CD 加入后反应时间分别为
的 Tris⁃HCl(0.2 mol/L)溶 液 作 为 缓 冲 液 ,Cu 与 10 min和5 min(图5)。
2 +
OPD 反应时间为 60 min,体系中 Cu 终浓度固定为 2.4 选择性实验
2+
为了考察该比率荧光探针对于定量检测6⁃TG的
A
1.00 2 500
选择性,研究了各种可能存在的干扰物质在没有底物
b (a)OPD(abs)
0.75 (b)DAP(abs) 2 000
(c)CD(FL) 1 500 A 1 800
吸光度 0.50 1 000 荧光强度 1 600
0.25 c 1 400
500
a 荧光强度 1 200
0.00 0
350 400 450 500 550 1 000
波长(nm)
B 800
2 500
0 50 100 150 200 250 300
2+
(a)Cu +OPD
2 000 铜离子浓度(μmol/L)
(b)CD
2+
(c)Cu +OPD+CD B
1 500 b (d)TG+Cu +OPD+CD 1 600 Mn 2+
2+
荧光强度 1 000 1 400 Fe 3+
3+
1 200
Al
500 d 1 000 Ba 2+
c 荧光强度 800 Na +
0 Mg 2+
a 600 K +
400 450 500 550 600 650 400 Blank
波长(nm) 200
0
2+
A:OPD和DAP的紫外吸收光谱以及CD的荧光发射谱;B:Cu +
400 450 500 550 600 650
OPD、CD、Cu +OPD+CD、6⁃TG+Cu +OPD+CD的荧光光谱图(6⁃TG、 波长(nm)
2+
2+
Cu 、OPD浓度分别为50 μmol/L、100 μmol/L和2 mmol/L)。 A:CD 在不同浓度 Cu 存在情况下荧光强度的变化(n=3);B:
2+
2+
图3 比率荧光探针机理验证 CD对不同金属离子的响应。
Figure 3 Mechanism verification of the ratiometric fluo⁃ 图4 CD对金属离子的响应
rescence probe Figure 4 The responses of CD to kinds of metal ions