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第42卷第7期
               ·958 ·                            南 京    医 科 大 学 学         报                        2022年7月


                  水凝胶是一种基于亲水性聚合物的交联网络，                          和大肠杆菌（ATCC25922）来自江苏省口腔疾病研究
              可通过亲水性高分子化学交联或物理交联相互作                             重点实验室样本库。SPF 级 6 周龄 Balb/c 小鼠，雄
              用形成。因具有独特的水溶胀行为（在水中溶胀而                            性，18~20 g，购自南京医科大学繁育中心，生产许可
              不溶解）以及良好的生物相容性 ，水凝胶逐渐成为                           证：SCXK（苏）2021⁃0001。本实验符合3R原则并通
                                          ［1］
              一种新兴的医用创面敷料。同传统敷料相比，水凝                            过了南京医科大学实验动物福利伦理委员会审查，
              胶能够吸收组织渗出物，保持创面湿润，可避免在                            项目伦理审查批准号：IACUC⁃2011056。
              更换敷料时发生黏连 。此外，通过功能整合或结                            1.2  方法
                                 ［2］
              构设计，水凝胶可被赋予各种优异的性能，如通过                            1.2.1  温敏水凝胶的制备
              负载抗菌多肽（antimicrobial peptide，AMP）等抗菌材                  取所需体积的去离子水加热至 80 ℃，加入
              料来实现高效抗菌，搭载生长因子或抗炎药物来缓                            HPMC 粉末，混匀后持续搅拌 30 min，在 4 ℃下静置
                                                         ［3］
              解炎症等，进而在创面愈合过程中发挥关键作用 。                           过夜，得到 7%（W/V）的 HPMC 溶液。在室温下通过
              透明质酸（hyaluronic acid，HA）作为一种聚阴离子                  去离子水溶解 HA 来制备 HA 溶液，并用 0.22 μm 的
              线性黏多糖，因其具有独特的生物相容性、保水性                            滤菌器过滤灭菌。将HA与HPMC 溶液以不同比例
              和流变特性而被用于制造水凝胶               ［4-5］ ，然而，由于HA       混合并搅拌均匀，在4 ℃下平衡24 h，得到HA/HPMC
              良好的亲水性，如果单独作为药物载体，则易快速                            水凝胶前体溶液。再向溶液中逐滴滴加一定量的
              降解和扩散，因此，通常对HA进行交联以获得稳定                           甘油，缓慢搅拌至均匀，得到一系列不同配比的
              性更好的水凝胶       ［6-7］ 。                             HA/HPMC/甘油温敏水凝胶。
                  羟丙基甲基纤维素（hydroxypropyl methylcellu⁃           1.2.2  水凝胶的凝胶化温度（gelation temperature，
              lose，HPMC）是一种纤维素衍生的温敏性亲水聚合                        Tgel ）及凝胶时间的测定
                                                                                      ［12］
              物，由于其具有无毒、低成本、高溶胀性和表面活性                                使用“试管倒置法” 研究样品的 Tgel及凝胶时
              等优越性能，已被作为辅料广泛应用于膜剂、片剂、                           间。取配制好的样品于玻璃试管中，置于恒温水浴
                           ［8］
              软膏等药品中 。更重要的是，HPMC 具备温敏特                          锅中，每隔 10 min 取出试管，将其倒置以观察水凝
              性，基于 HPMC 的水凝胶能够根据环境温度的变化                         胶是否流动，如果流动则以1 ℃的速率继续升温，若
                                  ［9］
              发生溶胶⁃凝胶相转变 ，因此有利于临床上微创给                           不流动则将此温度定义为水凝胶的Tgel                ［13］ 。确定Tgel
              药和填充不规则的皮肤缺损。尽管HPMC自身的相                           后，在 37 ℃下测量各组水凝胶的凝胶时间，凝胶时
              转变温度远高于体温（60 ℃以上），但可通过添加一                         间记为各组样品不流动的时间点。以人体生理温
              些盐类或小分子醇调节其相转变温度                   ［10］ 。甘油作      度为评价指标，筛选出水凝胶的最佳配比。
              为一种多元醇，可以通过从聚合物链的水合鞘中去                            1.2.3  流变性能测试
              除水分来降低HPMC体系的相转变温度 。                                   采用 HAAKE MARS4 流变仪对最佳配比下的
                                                 ［11］
                  本文以HA、HPMC和甘油为水凝胶基材制备温                        HA/HPMC/甘油体系进行流变性能的检测。取适量
              敏水凝胶，将抗菌多肽⁃芬母多肽（Funme peptide，                    溶液放置在直径为40 mm、间隙为0.5 mm 的平行板
              FP）作为核心抗菌成分进行包载，通过研究其理化                           上，温度范围设定为 20~80 ℃。在逐步加热过程中
              性能、生物相容性和抗菌性能，以及对小鼠皮肤创                            测定水凝胶的储能模量（storage modulus，G′）和损耗
              面愈合的作用，为后期将该温敏水凝胶用于医用创                            模量（loss modulus，G″）与温度之间的关系。
              伤敷料奠定研究基础。                                        1.2.4  红外光谱表征

                                                                     傅里叶变换红外光谱（Fourier transform infra⁃
              1 材料和方法
                                                                red spectroscopy，FTIR）通过表征化合物之间可能
              1.1  材料                                           的键类型来评估水凝胶的成分。将最佳配比下的
                  HPMC（甲氧基：28%~30%，羟基：7%~12%，                   HA/HPMC/甘油水凝胶干燥后研磨成细粉，再与溴
              6 mPa·s）上海凛恩科技发展有限公司；HA（分子量                       化钾（KBr）混合制成研磨压片，利用红外光谱仪测
              100 000~200 000），上海麦克林生化科技有限公司；                   试并记录样品的红外光谱，测试波数范围为 500~
              FP（纯度 > 95%），江苏吉锐生物技术有限公司；其                       4 000 cm ，分辨率为4 cm 。
                                                                                       -1
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              他试剂均为分析纯。                                         1.2.5  水凝胶的微观结构表征
                  实验中使用的小鼠上皮样成纤维细胞（L929）                             通过扫描电子显微镜（scanning electron micro⁃
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