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第42卷第7期 吴 迪,王 萍,雷 晨,等. 负载抗菌多肽温敏水凝胶的制备及性能研究[J].
2022年7月 南京医科大学学报(自然科学版),2022,42(7):957-964 ·961 ·
—OH 的伸缩振动峰,其余波段处与 HA2/HPMC7/甘 菌在 48 h 内几乎没有生长,这也说明由于 FP 的加
油 0基本一致。 入,HA2/HPMC7/甘油 20⁃FP水凝胶产生了良好的抗菌
2.4 水凝胶的形貌结构 效果。
HA2/HPMC7/甘油 20 的内部形貌结构如图 4 所
● 对照组
示,水凝胶显示出均匀的三维网络支架结构,孔壁 2.0 ■ HA2/HPMC7/甘油 20组
▲ HA2/HPMC7/甘油 20⁃FP组
光滑,孔径分布均匀,主要分布在5~10 μm之间。 1.5
mn )
( 450 1.0
D
0.5
▲ ▲ ▲ ▲
▲ ▲
0
0 8 16 24 32 40 48
时间(h)
图6 水凝胶对E. coli生长的影响
Figure 6 The effects of hydrogels on the bacterial growth
of E. coli
图4 HA2/HPMC7/甘油 20的微观形貌结构(× 6 000) E. coli与不同样品共培养24 h后进行活/死细菌
Figure 4 The micromorphology of HA 2/HPMC7/Glycerol20 染色,结果如图 7 所示,活细菌呈现绿色荧光,而死
(× 6 000)
细菌呈现红色荧光。同空白组一样,不含FP的HA2/
2.5 细胞毒性分析 HPMC7/甘油 20水凝胶组观察到较多绿色荧光的点状
CCK⁃8 定量分析结果显示,随着培养时间的延 分布,几乎没有红色荧光,说明水凝胶本身不具备
长,各组细胞的增殖均呈上升趋势。在第 3 天和第 显著的抑菌作用。相反,在搭载 FP 的 HA2/HPMC7/
5 天时,相较于使用DEME完全培养基的对照组,经 甘油 20水凝胶组观察到强烈的红色荧光(P < 0.001),
过 HA2/HPMC7/甘油 20和 HA2/HPMC7/甘油 20⁃FP 处理 表明FP的加入对E. coli具有明显的抑菌效果,也进
的细胞增殖率稍增高,但与使用正常培养基的对照 一步证实了上述结果。
组比较,差异无统计学意义(P > 0.05,n = 6)。 2.7 创伤修复
如图8所示,在伤口形成的第5天,各组小鼠伤
对照组
HA2/HPMC7/甘油 20组 口表面已干燥结痂;第 10 天时,各组创面进一步收
2.5
HA2/HPMC7/甘油 20⁃FP组 缩,痂皮出现不同程度的脱落,HA2/HPMC7/甘油 20⁃
nm ) 2.0 FP组的脱痂速度快于其他组;第15天时,各组创面
( 450 1.5 已全部脱痂,出现不同程度的新生上皮。在整个愈
吸光度 1.0 合 过 程 中 ,对 照 组 、HA2/HPMC7/甘 油 20 组 和 HA2/
0.5
HPMC7/甘油 20⁃FP组的剩余创面面积依次减小,其中
0
1 3 5 HA2/HPMC7/甘油 20⁃FP组创面面积明显小于其他组,
时间(d)
创伤愈合速度更快。通过比较各组间的创面愈合
图5 第1、3、5天CCK⁃8实验结果 率可见,在整个愈合过程中,对照组的愈合率显著
Figure 5 The results of CCK⁃8 at day 1,3,5
低 于 HA2/HPMC7/甘 油 20 组(P < 0.05,P < 0.01)和
2.6 抗菌性能分析 HA2/HPMC7/甘油20⁃FP 组(P < 0.01,P < 0.001),HA2/
采用E. coli对水凝胶抗菌性能进行研究。通过 HPMC7/甘油 20⁃FP 组的愈合率虽然高于 HA2/HPMC7/
检测细菌生长曲线初步评价 HA2/HPMC7/甘油 20⁃FP 甘油 20 组,但差异无统计学意义(P > 0.05),因此,
的抗菌效果,如图 6 所示,不含 FP 的水凝胶组和空 HA2/HPMC7/甘油 20⁃FP 水凝胶具有良好的促进伤口
白对照组的 E.coli 在 0~8 h 内生长曲线平坦,8 h 后 愈合的效果。
进入对数生长期,24 h 后进入稳定生长期,这说明
3 讨 论
HA2/HPMC7/甘油 20 水凝胶本身基本不具备抑菌作
用。而含有FP的水凝胶组曲线始终较平坦,表明细 临床上,由于皮肤伤口的轮廓和形状往往不规