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第42卷第7期              吴 迪,王 萍,雷       晨,等. 负载抗菌多肽温敏水凝胶的制备及性能研究[J].
                  2022年7月                     南京医科大学学报(自然科学版),2022,42(7):957-964                        ·961 ·


                —OH 的伸缩振动峰,其余波段处与 HA2/HPMC7/甘                     菌在 48 h 内几乎没有生长,这也说明由于 FP 的加
                油 0基本一致。                                          入,HA2/HPMC7/甘油 20⁃FP水凝胶产生了良好的抗菌
                2.4  水凝胶的形貌结构                                     效果。
                    HA2/HPMC7/甘油 20 的内部形貌结构如图 4 所
                                                                                           ● 对照组
                示,水凝胶显示出均匀的三维网络支架结构,孔壁                                   2.0               ■ HA2/HPMC7/甘油 20组
                                                                                           ▲ HA2/HPMC7/甘油 20⁃FP组
                光滑,孔径分布均匀,主要分布在5~10 μm之间。                                1.5
                                                                        mn )
                                                                        ( 450  1.0
                                                                        D
                                                                         0.5
                                                                           ▲    ▲  ▲                  ▲
                                                                              ▲         ▲
                                                                          0
                                                                           0    8   16  24   32  40  48
                                                                                      时间(h)
                                                                            图6   水凝胶对E. coli生长的影响
                                                                  Figure 6  The effects of hydrogels on the bacterial growth
                                                                           of E. coli

                   图4 HA2/HPMC7/甘油 20的微观形貌结构(× 6 000)                 E. coli与不同样品共培养24 h后进行活/死细菌
                Figure 4  The micromorphology of HA 2/HPMC7/Glycerol20  染色,结果如图 7 所示,活细菌呈现绿色荧光,而死

                        (× 6 000)
                                                                  细菌呈现红色荧光。同空白组一样,不含FP的HA2/
                2.5  细胞毒性分析                                       HPMC7/甘油 20水凝胶组观察到较多绿色荧光的点状
                    CCK⁃8 定量分析结果显示,随着培养时间的延                       分布,几乎没有红色荧光,说明水凝胶本身不具备
                长,各组细胞的增殖均呈上升趋势。在第 3 天和第                          显著的抑菌作用。相反,在搭载 FP 的 HA2/HPMC7/
                5 天时,相较于使用DEME完全培养基的对照组,经                         甘油 20水凝胶组观察到强烈的红色荧光(P < 0.001),
                过 HA2/HPMC7/甘油 20和 HA2/HPMC7/甘油 20⁃FP 处理          表明FP的加入对E. coli具有明显的抑菌效果,也进
                的细胞增殖率稍增高,但与使用正常培养基的对照                            一步证实了上述结果。
                组比较,差异无统计学意义(P > 0.05,n = 6)。                     2.7  创伤修复
                                                                      如图8所示,在伤口形成的第5天,各组小鼠伤
                                             对照组
                                             HA2/HPMC7/甘油 20组     口表面已干燥结痂;第 10 天时,各组创面进一步收
                   2.5
                                             HA2/HPMC7/甘油 20⁃FP组  缩,痂皮出现不同程度的脱落,HA2/HPMC7/甘油 20⁃
                  nm )  2.0                                       FP组的脱痂速度快于其他组;第15天时,各组创面
                  ( 450  1.5                                      已全部脱痂,出现不同程度的新生上皮。在整个愈
                  吸光度  1.0                                        合 过 程 中 ,对 照 组 、HA2/HPMC7/甘 油 20 组 和 HA2/
                   0.5
                                                                  HPMC7/甘油 20⁃FP组的剩余创面面积依次减小,其中
                    0
                          1      3      5                         HA2/HPMC7/甘油 20⁃FP组创面面积明显小于其他组,
                               时间(d)
                                                                  创伤愈合速度更快。通过比较各组间的创面愈合
                          图5  第1、3、5天CCK⁃8实验结果                    率可见,在整个愈合过程中,对照组的愈合率显著
                     Figure 5  The results of CCK⁃8 at day 1,3,5
                                                                  低 于 HA2/HPMC7/甘 油 20 组(P < 0.05,P < 0.01)和
                2.6  抗菌性能分析                                       HA2/HPMC7/甘油20⁃FP 组(P < 0.01,P < 0.001),HA2/
                    采用E. coli对水凝胶抗菌性能进行研究。通过                      HPMC7/甘油 20⁃FP 组的愈合率虽然高于 HA2/HPMC7/

                检测细菌生长曲线初步评价 HA2/HPMC7/甘油 20⁃FP                   甘油 20 组,但差异无统计学意义(P > 0.05),因此,
                的抗菌效果,如图 6 所示,不含 FP 的水凝胶组和空                       HA2/HPMC7/甘油 20⁃FP 水凝胶具有良好的促进伤口
                白对照组的 E.coli 在 0~8 h 内生长曲线平坦,8 h 后                愈合的效果。
                进入对数生长期,24 h 后进入稳定生长期,这说明
                                                                  3 讨    论
                HA2/HPMC7/甘油 20 水凝胶本身基本不具备抑菌作
                用。而含有FP的水凝胶组曲线始终较平坦,表明细                               临床上,由于皮肤伤口的轮廓和形状往往不规
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