Page 17 - 南京医科大学学报自然科学版
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第42卷第8期 朱海燕,赵晓晶,宋晶晶,等. 紫草素通过抑制氧化应激和神经炎症在脑外伤后发挥神经保护作用[J].
2022年8月 南京医科大学学报(自然科学版),2022,42(08):1055-1064 ·1059 ·
A TBI模型示意图 B 对照组 TBI组 C Behavior test/WB/qPCR/
Immunofluorescence/
Beamwalk Beamwalk Beamwalk
Oxidative stress test
TBI Surgery
Hammper
CBF test
0 d 1 d 2 d 3 d 4 d5 d6 d 7 d 14 d
Shikonin
4.5 m/s 1 mg/kg or 5 mg/kg or sham
D E 对照组 F 20
对照组 TBI组 ( 分 ) 15 **
TBI+SK 1 mg/kg组
TBI+SK 5 mg/kg组
TBI组 20 ** 10
( 次 ) 15 ** ** ** mNSS评分 5 ##
滑足次数 10 5 # ## 0 对照组 TBI组
TBI+SK 5 mg/kg组
0 TBI+SK 1 mg/kg组
1 d 3 d 7 d 14 d
G 假手术组 TBI组 TBI+SK 1 mg/kg组 TBI+SK 5 mg/kg组
Neuron/DAPI
H 400 I 1.5 J K 40
( 个 ) 300 ## 1.0 对照组 ( μg/g ) 30 ** ##
Neuron + 细胞数量 200 ** SYP RNA相对含量 0.5 ** ## TBI组 伊文思蓝染色 20
10
100
0 0.0 0
对照组 TBI组 对照组 TBI组 对照组 TBI组
TBI+SK 1 mg/kg组 TBI+SK 5 mg/kg组 TBI+SK组 TBI+SK 5 mg/kg组
TBI+SK 5 mg/kg组
A:小鼠TBI模型示意图;B:小鼠TBI造模后即刻检测脑血流变化,皮质打击位置出现血流阻滞(n=3);C:实验设计,所有小鼠在第7天进行
行为学检测以及取材检测;D~F:高剂量可以显著改善小鼠的运动功能和mNSS评分(n=5);G~H:小鼠脑片代表性荧光染色(×20)及统计结果
(n=3),对照组神经元数目正常,TBI组神经元丢失严重,SK 5 mg/kg治疗后神经元丢失减轻;I:RT⁃PCR检测SYP的水平(n=3);J~K:伊文思蓝
染色检测血脑屏障完整性(n=3)。与对照组比较,P < 0.01;与TBI组比较,P < 0.05,P < 0.01。
#
##
**
图1 紫草素对小鼠脑外伤后神经功能的影响
Figure 1 The effect of shikonin on neurological function after traumatic brain injury in mice
示紫草素在体外实验中可以发挥保护神经元的作 0.05,图 3A)。进一步检测氧化应激标志物 MDA、
用。综上,紫草素在脑外伤后对于神经凋亡具有保 LPO 和抗氧化酶活性 SOD、GPx 的水平,如图 3B~C
护作用。 所示,TBI 后 MDA、LPO 的水平显著升高,抗氧化物
2.3 紫草素改善脑外伤后的氧化应激 酶水平降低,经过紫草素处理后,这些过氧化物的
氧化应激指标中,MDA是氧自由基水平的可靠 升高得到显著抑制(P < 0.05)。相反,在经过紫草素
指标,而SOD 及GPx 是机体抵抗氧化应激的能力及 治疗后,抗氧化酶的活性得到显著的升高(P < 0.05,
清除活性氧的重要指标。我们发现,TBI 后脑中的 图 3D~E)。SOD、硫氧还原蛋白 2(Thioredoxin 2,
ROS 含量增多,紫草素处理可以逆转这一改变(P < TRX2)蛋白水平的表达也验证了上述结果(P < 0.05,