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第42卷第8期 朱海燕,赵晓晶,宋晶晶,等. 紫草素通过抑制氧化应激和神经炎症在脑外伤后发挥神经保护作用[J].
                  2022年8月                    南京医科大学学报(自然科学版),2022,42(08):1055-1064                      ·1059 ·


                A  TBI模型示意图       B      对照组              TBI组      C                   Behavior test/WB/qPCR/
                                                                                         Immunofluorescence/
                                                                            Beamwalk Beamwalk             Beamwalk
                                                                                          Oxidative stress test
                                                                      TBI Surgery
                Hammper
                                                                       CBF test
                                                                            0 d 1 d 2 d 3 d 4 d5 d6 d 7 d  14 d
                                                                       Shikonin
                 4.5 m/s                                                      1 mg/kg or 5 mg/kg or sham
                                   D                         E      对照组                  F  20
                                      对照组                           TBI组                    ( 分 )  15  **
                                                                    TBI+SK 1 mg/kg组
                                                                    TBI+SK 5 mg/kg组
                                      TBI组                     20  **                       10
                                                              ( 次 )  15  **   **    **      mNSS评分  5        ##
                                                              滑足次数  10 5       #    ##       0 对照组  TBI组

                                                                                                    TBI+SK 5 mg/kg组

                                                                0                              TBI+SK 1 mg/kg组
                                                                   1 d   3 d  7 d  14 d
                 G           假手术组                   TBI组               TBI+SK 1 mg/kg组        TBI+SK 5 mg/kg组


                    Neuron/DAPI








                H   400                    I   1.5                    J                 K   40
                   ( 个 )  300        ##        1.0                        对照组              ( μg/g )  30  **  ##
                   Neuron + 细胞数量  200  **      SYP RNA相对含量  0.5  **  ##   TBI组             伊文思蓝染色  20



                                                                                            10
                    100
                     0                         0.0                                           0
                      对照组  TBI组                  对照组    TBI组                                 对照组    TBI组
                        TBI+SK 1 mg/kg组                TBI+SK 5 mg/kg组    TBI+SK组                  TBI+SK 5 mg/kg组
                            TBI+SK 5 mg/kg组

                   A:小鼠TBI模型示意图;B:小鼠TBI造模后即刻检测脑血流变化,皮质打击位置出现血流阻滞(n=3);C:实验设计,所有小鼠在第7天进行
                行为学检测以及取材检测;D~F:高剂量可以显著改善小鼠的运动功能和mNSS评分(n=5);G~H:小鼠脑片代表性荧光染色(×20)及统计结果
               (n=3),对照组神经元数目正常,TBI组神经元丢失严重,SK 5 mg/kg治疗后神经元丢失减轻;I:RT⁃PCR检测SYP的水平(n=3);J~K:伊文思蓝
                染色检测血脑屏障完整性(n=3)。与对照组比较,P < 0.01;与TBI组比较,P < 0.05,P < 0.01。
                                                                  #
                                                                         ##
                                                 **
                                              图1 紫草素对小鼠脑外伤后神经功能的影响
                            Figure 1  The effect of shikonin on neurological function after traumatic brain injury in mice
                示紫草素在体外实验中可以发挥保护神经元的作                             0.05,图 3A)。进一步检测氧化应激标志物 MDA、
                用。综上,紫草素在脑外伤后对于神经凋亡具有保                            LPO 和抗氧化酶活性 SOD、GPx 的水平,如图 3B~C
                护作用。                                              所示,TBI 后 MDA、LPO 的水平显著升高,抗氧化物

                2.3  紫草素改善脑外伤后的氧化应激                               酶水平降低,经过紫草素处理后,这些过氧化物的
                    氧化应激指标中,MDA是氧自由基水平的可靠                         升高得到显著抑制(P < 0.05)。相反,在经过紫草素
                指标,而SOD 及GPx 是机体抵抗氧化应激的能力及                        治疗后,抗氧化酶的活性得到显著的升高(P < 0.05,
                清除活性氧的重要指标。我们发现,TBI 后脑中的                          图 3D~E)。SOD、硫氧还原蛋白 2(Thioredoxin 2,
                ROS 含量增多,紫草素处理可以逆转这一改变(P <                        TRX2)蛋白水平的表达也验证了上述结果(P < 0.05,
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