Page 18 - 南京医科大学学报自然科学版
P. 18

第42卷第8期
               ·1060 ·                           南 京    医 科 大 学 学         报                        2022年8月


              A                                                                      B
                        Tunel            NeuN             DAPI            Merge
                                                                                         2 000       **
                                                                                        TUNEL相对荧光强度  1 000  ##
                 对照组                                                                     1 500



                                                                                          500
                                                                                           0
                                                                                                   TBI组
                 TBI组                                                                       对照组   TBI+SK 5 mg/kg组




                 TBI+SK5 mg/kg组







                 C                                         D                        E
                                对照组    TBI组 TBI+SK 5 mg/kg组   4                        2.0
                                                                                                         #
                                                              Bax蛋白相对表达  2             Bcl2蛋白相对表达  1.0
                            Bax                     21 kDa    3         *              1.5         *
                           Bcl2                     26 kDa
                  Cleaved⁃Caspase3                  19 kDa
                        Caspase3                    32 kDa    1                #       0.5
                         GAPDH                      37 kDa
                                                              0                          0
                                                                                               TBI组
                                                               对照组  TBI+SK 5 mg/kg组      对照组  TBI+SK 5 mg/kg组
                                                                     TBI组
              F  3         **         G  2.0        **         H  1.5                   I  2 相对表达  3  **
                 0 Cleaved⁃Caspase3/Caspase3  2 1  #  Bax mRNA相对表达  1.5  ##  mRNA相对表达  1.0  *  #  mRNA  1   #



                                         1.0
                                                                  0.5
                                         0.5

                                                                                                  TBI组
                  对照组  TBI+SK 5 mg/kg组   0.0 对照组  TBI+SK 5 mg/kg组  Bcl2  0.0 对照组  TBI+SK 5 mg/kg组  0 Caspase3  对照组  TBI+SK 5 mg/kg组
                                                                           TBI组
                        TBI组
                                                  TBI组
              J         对照组               LPS组        4 LPS+SK 3 μmol/L组  4 LPS+SK 10 μmol/L组  K  8
                 10 4              10 4              10                10                          **
                    0.17      1.00    0.28      2.28    0.12      2.10    0.27      2.89               #    #
                 10 3              10 3              10 3              10 3                6
                 10 2              10 2              10 2              10 2                2 Annexin⁃V + /PI -  4
                PI
                 10 1              10 1              10 1              10 1
                  0 94.0      4.87  0 89.0      7.79  0 91.8      5.98  0 83.0      4.82
                 10                10                10                10
                   10 0  10 1  10 2  10 3  10 4  10 0  10 1  10 2  10 3  10 4  10 0  10 1  10 2  10 3  10 4  10 0  10 1  10 2  10 3  10 4  0
                                                                                            对照组  LPS组
                                                                                                   SK 10 μmol/L组
                                                AV⁃FITC                                         SK 3 μmol/L组
                 A~B:TUNEL染色(×20)及统计结果(n=3)显示,TBI后小鼠脑内损伤水肿带凋亡的神经元数量增多,紫草素处理后显著改善;C~F:West⁃
              ern blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl2以及Caspase3的水平变化以及统计结果(n=3);G~I:RT⁃PCR检测Bax、Bcl2以及Caspase3的基因水平变化
             (n=4);J~K:凋亡试验及统计结果(n=3),体外培养N2a细胞系,LPS处理12 h后凋亡的细胞数量大量增加,柴草素浓度梯度处理后细胞凋亡数
              量减少。与对照组比较,P < 0.05,P < 0.01;与TBI/LPS组比较,P < 0.05,P < 0.01。
                               *
                                     **
                                                          #
                                                                ##
                                            图2  紫草素对小鼠脑外伤后神经元凋亡的影响
                           Figure 2 The effect of shikonin on neuronal apoptosis after traumatic brain injury in mice
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