Page 18 - 南京医科大学学报自然科学版

第42卷第9期
·1212 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2022年9月

单因素方差分析（one⁃way ANOVA），两两比较采用 A 溶剂对照组
300
SNK⁃q检验，P < 0.05为差异有统计学意义。 GDF⁃15（10 μg/kg）组
（ s ） GDF⁃15（30 μg/kg）组
2 结 果 200 GDF⁃15（100 μg/kg）组 *

2.1 中枢给予GDF⁃15对小鼠福尔马林诱导双相疼 舔足/咬足总时长 100 **
痛反应的影响 ***
在福尔马林双相疼痛实验中，比较 0~5 min（Ⅰ
0
相急性疼痛期）以及20~40 min（Ⅱ相炎性疼痛期）内 Ⅰ相急性疼痛期 Ⅱ相炎性疼痛期
B
舔足和咬足的总时长作为痛阈值，结果如图１所 （ % ） 100 Emax=82.2%
示，在Ⅱ相炎性疼痛期，与溶剂对照组相比，GDF⁃15 80 ED50=14.0 μg/kg
鞘内给药组小鼠舔足和咬足的总时长显著降低 60
（P＜0.05）；而两组小鼠的Ⅰ相急性疼痛期舔足和咬 舔足/咬足总时长抑制率 40
足的总时长差异没有统计学意义。 20

300 溶剂对照组 0 0 3 10 30 100 300
GDF⁃15（μg/kg）
（ s ） 200 GDF⁃15（50 ng）组 A：腹腔注射不同浓度的GDF⁃15溶液对福尔马林诱导双相疼痛
舔足/咬足总时长 100 * 的影响；B：腹腔注射不同浓度的GDF⁃15溶液对福尔马林诱导双相疼
痛的剂量依赖性。与溶剂对照组相比，P＜0.05，P＜0.01， P＜
**
*
***
0.001（n=8）。
图2 腹腔注射GDF⁃15蛋白对福尔马林双相疼痛的影响
0 Figure 2 Effects of intraperitoneal injection of GDF ⁃ 15
Ⅰ相急性疼痛期 Ⅱ相炎性疼痛期 protein on formalin induced pain
两组相比，P＜0.05（n=8）。
*
图1 鞘内注射GDF⁃15对福尔马林诱导双相疼痛的影响
Figure 1 Effects of intrathecal injection of GDF⁃15 pro⁃ 型小鼠的脊髓中IL⁃6和TNF⁃α的表达量相较溶剂对
tein on formalin induced pain 照组显著降低（图4）。GDF⁃15处理组脊髓中IL⁃6的
mRNA 表达降低至对照组的 54%（P < 0.05），TNF⁃α
2.2 系统性给予GDF⁃15对小鼠福尔马林诱导双相 的 mRNA 表达降低至对照组的 28%（P < 0.005），
疼痛反应的影响 GDF ⁃ 15 处 理 组 脊 髓 中 IL ⁃ 1β、PDYN 以 及 PENK
在Ⅰ相急性疼痛期，各剂量的 GDF⁃15 腹腔注 mRNA 与对照组相比均有不同程度的升高，但两组
射组与溶剂对照组相比，福尔马林Ⅰ相急性疼痛期 之间差异无统计学意义。
阈值无显著性差异（图 2A）；而在Ⅱ相炎性疼痛期，
3 讨 论
与溶剂对照组相比，各剂量的 GDF⁃15 腹腔注射组
小鼠的舔足和咬足的总时长均显著性降低，且呈剂 GDF⁃15被发现在多种疾病中明显上调，被认为
量依赖性，最大镇痛效应 Emax可达到 82.2%，半数有 是许多疾病的标志物。本研究创新性地研究了
效量ED50为14.0 μg/kg（图2B）。 GDF⁃15 与疼痛之间的关系。采用了经典的福尔马
2.3 GDF⁃15特异性受体GFRAL的表达部位 林诱导疼痛模型，在实验动物的后足背部皮下注射
GDF⁃15 的特异性受体 GFRAL 在中枢系统的 福尔马林后可以产生双相疼痛反应：Ⅰ相急性疼痛
大脑、小脑以及脊髓中均有蛋白表达（图 3A）。而 和Ⅱ相炎性疼痛。Ⅰ相急性疼痛主要是因为初级
根据组织免疫荧光结果（图3B）显示，在脊髓背角中， 伤害性传入神经的直接活化而引起的急性疼痛，而
GFRAL蛋白与神经元标志物蛋白NeuN存在显著共 Ⅱ相炎性疼痛则涉及炎症引起的脊髓背角中枢敏
染，且不与小胶质细胞标志物蛋白 Iba⁃1 共表达，也 化 ［14］ 。在本实验室，福尔马林模型已被用于多个镇
［15］
不与星形胶质细胞标志物蛋白 GFAP 共表达。 痛靶点的验证：D⁃型氨基酸氧化酶 （D⁃amino acid
［16］
2.4 中枢给予GDF⁃15对IL⁃6、IL⁃1β、TNF⁃α、PDYN oxidase，DAAO）、甘 氨 酸 受 体 （glycine receptor，
［17］
以及PENK的mRNA表达的影响 GlyR）、胰高血糖素样肽⁃1受体 （glucagon⁃like pep⁃
GDF⁃15 鞘内注射组福尔马林诱导双相疼痛模 tide 1 receptor，GLP⁃1R）等，同时针对这些靶点在该