Page 8 - 南京医科大学学报自然科学版
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第42卷第9期
               ·1202 ·                           南 京    医 科 大 学 学         报                        2022年9月


              measured. Hematoxylin⁃eosin（HE）staining was used to detect the pulmonary artery medial thickness（PAMT）and the morphological
              changes of the right ventricle. And α⁃smooth muscle actin（α⁃SMA）immunohistochemistry was used to investigate the muscularization
              of distal vessels. Masson’s trichrome staining（MTS）was performed to evaluate the fibrosis of arterioles. Results：Right heart catheter
              and right ventricular remodeling indicators showed that inhalation of either CDDO⁃NO or CDDO⁃Me suppressed elevations of RVSP，
              RVHI and RV/BW induced by MCT in PAH rats. CDDO⁃NO（30 μg/kg）showed stronger inhibitory effect in RVHI and RV/BW than
              that of the equal dose of parent compound CDDO⁃Me（21 μg/kg）. Moreover，pathological studies indicated that 30 μg/kg CDDO⁃NO had
              better effects in alleviating right ventricular myocardial hypertrophy and PAMT，and reducing the proportion of fully muscularized
              vessels and the area of collagen deposition than those of CDDO⁃Me（21 μg/kg）. Conclusion：Inhalation of CDDO⁃NO can ameliorate
              MCT⁃induced PAH in rats by inhibiting pulmonary vascular remodeling，and the effect of CDDO⁃NO is superior to parent compound
              CDDO⁃Me. These results suggest that CDDO⁃NO could be a promising drug for the treatment of PAH.
             ［Key words］ pulmonary arterial hypertension；CDDO⁃NO；pulmonary vascular remodeling
                                                                           ［J Nanjing Med Univ，2022，42（09）：1201⁃1208］






                  肺 动 脉 高 压（pulmonary arterial hypertension，    Nrf2）向核内转位，后者结合抗氧化反应元件（anti⁃
              PAH）是一种以肺血管重构和肺血管负荷进行性增                           oxidant response element，ARE），诱导多个抗氧化基
              加为特征的病理生理状态，可致右心室肥厚和重                             因转录，翻译出醌氧化还原酶（NADPH dehydroge⁃
              构，最终导致患者右心衰竭和死亡 。与 PAH 相关                         nase quinone 1，NQO⁃1）、血红素加氧酶 1（heme⁃oxy⁃
                                             ［1］
              的经典信号通路包括内皮素途径，一氧化氮（nitric                        genase⁃1，HO⁃1）等蛋白，发挥抗氧化应激效应；另一
              oxide，NO）途径和前列环素途径 。PAH 病理生理                      方面，CDDO⁃Me减少核因子⁃κB（nuclear factor kappa
                                           ［2］
              机制复杂，目前指南推荐大多数PAH患者初治联合                           ⁃B，NF⁃κB）向核内移位，降低下游炎症因子表达，
                  ［3］
              用药 。然而，这些靶向药物费用较高，存在一定不                           发挥抗炎、抗纤维化作用            ［10-11］ 。因此，CDDO⁃Me 通
              良反应，且随疗程延长疗效逐渐减弱。因此，探索                            过活化 Nrf2 及抑制 NF⁃κB，减轻氧化应激及炎症对
              治疗PAH的新策略，延长患者生存期、改善预后，已                          肺血管的损伤，可能具有抑制肺血管重构的作用。
              成为目前亟待解决的重要问题。                                         本课题组与中国药科大学合作，基于CDDO⁃Me
                  NO是一种重要的血管内皮源性舒张因子。NO                         及 ISMN 化学结构特点合成一种新型 NO 供体型
              进入细胞后通过激活鸟苷酸环化酶⁃环磷酸鸟苷⁃蛋                           CDDO⁃Me 衍 生 物 CDDO⁃NO（a novel hybrid from
              白激酶G途径，使胞内Ca 浓度降低，引起肺动脉平                          CDDO⁃Me and NO donor isosorbide 5⁃mononitrate）。
                                     2+
              滑肌舒张，从而降低肺动脉压力               ［4-5］ 。然而，外源性        在肺内 CDDO⁃NO 可经酯酶水解缓慢释放 NO 分子
              吸入NO在治疗PAH中应用受限，其半衰期短，治疗                          和 CDDO⁃Me，理论上具有同时舒张肺血管、抑制血
                                                     ［6］
              窗窄，可导致高铁血红蛋白血症等不良反应 。NO                           管重构的双重效应。本研究通过建立野百合碱
              供体，包括硝酸甘油、单硝酸异山梨酯（isosorbide                      （monocrotaline，MCT）诱导的大鼠PAH模型，研究吸
              5⁃mononitrate，ISMN）和硝普钠等，由于其对体循环                  入 CDDO⁃NO 对 PAH 大鼠肺血管重构的作用，并比
                                                  ［7］
              降压作用明显，也不适用于 PAH 的治疗 。但研究                         较其与母体化合物 CDDO⁃Me 的效应，为治疗 PAH
              发现，以吸入方式使用NO供体，则可选择性舒张肺                           开发针对多靶点的新型化合物。
              血管，可能具有治疗PAH的潜力 。
                                          ［8］
                                                                1  材料和方法
                  齐墩果酸是一种从油橄榄叶子中提取的具有
              抗炎、镇静、抗肿瘤作用的三萜类化合物，可用于治                           1.1  材料
              疗肝损伤、肝纤维化等疾病 。2⁃氰基⁃3，12⁃二氧齐墩                           清洁级雄性 SD 大鼠 36 只，体重（270±20）g，由
                                     ［9］
              果烷⁃1，9（11）⁃二烯⁃28⁃酸甲酯（bardoxolone methyl，          上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，本实验所
              CDDO⁃Me），即甲基巴多索隆，是一种半合成齐墩果                        有操作经南京医科大学实验动物福利伦理审查委
              酸衍生物。CDDO⁃Me 具有抗氧化应激及抗炎性损                         员会许可（伦理编号：IACUC⁃2106004）。CDDO⁃NO
              伤的作用。一方面，CDDO⁃Me 促进核因子 E2 相关                      和 CDDO⁃Me 由中国药科大学天然药物国家重点实
              因 子 2（nuclear factor erythroid 2 ⁃ related factor 2，  验室提供。MCT（Sigma 公司，美国），苏木素伊红
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