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第43卷第10期          何继凯,瞿文豪,贾佳琦,等. 丁酰胆碱酯酶在胃癌中的预后价值及其生物学功能分析[J].
                 2023年10月                    南京医科大学学报(自然科学版),2023,43(10):1356-1365                      ·1361 ·


                析结果表明 BCHE 的表达可能与细胞增殖、细胞黏                         明,BCHE 的功能可能与PI3K⁃Akt 信号通路、TGF⁃β
                附和细胞迁移等功能有关(图 3B)。KEGG 分析表                        信号通路和癌症通路等有关(图3C)。


                A                                                 B
                                                                       positive regulation of cell division(BP)
                                                                                response to cAMP(BP)
                  MEyellow  -0.15    -0.10   -0.14    0.13    1.0           blood vessel development(BP)
                           (0.002)  (0.040)  (0.005)  (0.007)
                                                                  positive regulation of MAP kinase activity(BP)
                  MEgreen    0.53    0.65     0.65    -0.65          TGF beta receptor signaling pathway(BP)  Count
                           (2e-31) (6e-51)  (1e-50)  (9e-52)
                                                              0.5             Wnt signaling pathway(BP)      10
                  MEbrown    0.93    0.43     0.75    -0.73           positive regulation of cell migration(BP)  20
                          (3e-183) (4e-20)  (2e-76)  (2e-71)       positive regulation of apoptotic process(BP)  30
                   MEred     0.83    0.48     0.72    -0.71   0    GO          cell⁃matrix adhesion(BP)
                          (5e-105) (1e-24)  (1e-66)  (3e-64)       negative regulation of cell proliferation(BP)  PValue
                                                                              inflammatory response(BP)      0.02
                             0.66    0.24     0.50    -0.50
                   MEblue                                                                                    0.04
                           (2e-53) (6e-07)  (2e-27)  (2e-27)                       cell migration(BP)        0.06
                                                              -0.5  positive regulation of cell proliferation(BP)  0.08
                             0.84    0.39     0.68    -0.68
                MEturquoise                                                         cell adhesion(BP)
                          (1e-109) (8e-17)  (4e-57)  (1e-56)
                                                                               extracellular matrix(CC)
                            -0.21    -0.32   -0.29    0.28
                   MEgrey                                     -1.0  transforming growth factor beta binding(MF)
                           (1e-05) (5e-11)  (2e-09)  (1e-08)                    fibrinogen binding(MF)
                        Stromal Score Immune Score Estimate Score  Tumor Purity                 0 5 10 15 20 25
                                           C
                                              Taurine and hypotaurine metabolism
                                             Complement and coagulation cascades
                                                                Malaria
                                                   Hedgehog signaling pathway
                                                   TGF⁃beta signaling pathway  Count
                                                    Relaxin signaling pathway   4
                                                     Hippo signaling pathway    6
                                                              Phagosome         8 10
                                              KEGG   Diabetic cardiomyopathy   PValue
                                                                                12
                                                             Amoebiasis
                                                 AGE⁃RAGE signaling pathway
                                                     in diabetic complications  0.01
                                                     ECM⁃receptor interaction   0.02
                                                Protein digestion and absorption  0.03
                                                                                0.04
                                                           Focal adhesion
                                                      Proteoglycans in cancer
                                                Human papillomavirus infection
                                                         Pathways in cancer
                                                   PI3K⁃Akt signaling pathway
                                                                     1 2 3 4 5 6 7
                    A:WGCNA热图,ESTIMATE算法分析BCHE mRNA与免疫细胞的相关性;B、C:采用GO(B)和KEGG(C)对BCHE进行富集分析。
                                                   图3   BCHE mRNA的富集分析
                                             Figure 3 Enrichment analysis of BCHE mRNA
                2.4  BCHE 敲减对 GC 细胞增殖、黏附、迁移和侵袭                   (P < 0.001)和侵袭能力(P < 0.001,图5C~F)。这些
                的影响                                               结果表明,BCHE 是 GC 细胞中的一个促癌基因,敲
                    为验证 BCHE 在 GC 细胞中的作用,本研究                      减BCHE可抑制其介导的恶性生物学功能。
                验证了该基因的体外功能。qRT⁃PCR 检测发现,
                                                                  3 讨    论
                GC 细胞株(HGC27 和 MKN1)中 BCHE mRNA 的表
                达显著高于胃组织正常细胞株(GSE⁃1)(P < 0.001,                       BCHE 是一个潜在的肿瘤标志物,其 mRNA 水
                图 4A)。通过 siRNA 敲减 BCHE 表达,敲减效率                    平在卵巢癌、乳腺癌和肺癌中显著升高                    [9,19- 20] ,且
                如图 4B、C 所示,选择敲减效率最高的 1 号片段                        BCHE mRNA的高表达与子宫内膜癌和卵巢癌患者
               (si⁃BCHE⁃1)进行下游的功能实验。结果发现,                         较差的总生存率相关          [19,21] 。本研究通过生信数据分
                BCHE 敲 减 后 明 显 抑 制 了 GC 细 胞 的 增 殖 能 力             析以及实验验证发现,BCHE 在 GC 细胞中高表达,
               (P < 0.05)和克隆形成能力(P < 0.001,图 4D~G)。               且 BCHE mRNA 的高表达与 GC 预后不良呈显著正
                黏附实验结果表明,BCHE敲减后能够促进GC细胞                          相关。以上结果提示,BCHE可能是GC新的预后生
                的黏附能力(P < 0.05,图 5A、B)。迁移和侵袭实验                    物标志物。
                结果表明,BCHE 敲减后明显抑制 GC 细胞的迁移                            鉴于GC 微环境对肿瘤发生发展和转移具有重
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