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第43卷第12期         李杨夏,佟     晴,程 越,等. TLR2/NF⁃κB通路介导MPP 诱导的RSC96细胞凋亡与自噬[J].
                                                                           +
                 2023年12月                    南京医科大学学报(自然科学版),2023,43(12):1623-1629                      ·1627 ·

                A                                                                               B
                         Hoechst             TUNEL            Merge(×10)          Large(×40)
                                                                                                    ( % )  6  **
                                                                                                    TUNEL阳性细胞率  2 0
                  MPP +                                                                             8 4




                                                                                                         +
                  MPP + +CU⁃CPT22                                                                   MPP +CU⁃CPT22
                                                                                                      MPP
                                                                                                       +




                C                     D                                E                      F
                       1.5                                                                                **
                              **                        +  MPP +CU⁃CPT22              **
                    TLR2 mRNA  相对表达量  1.0     caspase⁃3  MPP  35 kDa      cleaved caspase⁃3/  caspase⁃3  蛋白相对表达量 1.5  Bcl⁃2/Bax  蛋白相对表达量 3 2 1
                                                             +
                                                                               1.0
                       0.5
                                                                               0.5
                                        cleaved caspase⁃3/
                                               β⁃actin       16 kDa
                                                             42 kDa
                        0   +                   Bcl⁃2        26 kDa             0   +               0    +
                        MPP +CU⁃CPT22          β⁃actin       20 kDa             MPP +CU⁃CPT22       MPP +CU⁃CPT22
                          MPP
                                                                                                      MPP
                                                                                  MPP
                                                  Bax
                                                                                                      +
                                                                                  +
                          +
                                                             42 kDa
                   A:各组TUNEL染色结果;B:各组TUNEL阳性细胞百分比的定量分析(n=4);C:RT⁃qPCR检测各组细胞TLR2 mRNA相对表达水平(n=8);
                D:Western blot检测各组细胞cleaved caspase⁃3/caspase⁃3和Bcl⁃2/Bax蛋白表达水平代表性图像;E:各组cleaved caspase⁃3/caspase⁃3蛋白表达水
                平的定量比较(n=3);F:各组Bcl⁃2/Bax蛋白表达水平的定量比较(n=3)。两组比较,P<0.01。
                                                                        **
                                            图4 抑制TLR2减轻MPP+诱导的RSC96细胞凋亡
                                 Figure 4 Inhibition of TLR2 attenuates MPP ⁃induced apoptosis in RSC96 cells
                                                                     +
                                A                       B                      C   1.5
                                               +
                                          +  MPP +CU⁃CPT22    3      *             1.0     *
                                        MPP                   蛋白相对表达量 4
                                  LC3Ⅰ         16 kDa       LC3Ⅱ/LC3Ⅰ  2          P62蛋白相对表达量
                                  LC3Ⅱ         14 kDa                              0.5
                                 β⁃actin       42 kDa         1
                                                              0                    0.0
                                   P62         62 kDa              +                     +
                                                              MPP +CU⁃CPT22         MPP +CU⁃CPT22
                                 β⁃actin       42 kDa            MPP                  MPP
                                                                                      +
                                                                 +
                   A:Western blot 检测各组细胞LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和P62蛋白表达水平代表性图像;B:各组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达水平的定量比较(n=3);C:各
                组P62蛋白表达水平的定量比较(n=3)。两组比较,P<0.05。
                                                   *
                                       图5 抑制TLR2缓解MPP 诱导的RSC96细胞自噬水平的降低
                                                            +
                          Figure 5  Inhibition of TLR2 alleviates MPP ⁃induced reduction in autophagy level in RSC96 cells
                                                             +
                    SC作为一种外周神经胶质细胞,从神经嵴发育                         者腓肠神经纤维松散分布,神经传导速度减慢,感
                而来,成熟的 SC 保留其表型可塑性,在周围神经再                         觉神经动作电位幅度降低,伴有轴突变性和脱髓鞘
                生过程中充当重要角色,SC的其他非典型功能包括                           改变。此外,本课题组还发现慢性 MPTP 模型小鼠
                调节免疫反应以及表皮的触觉受体                 [19] 。以往研究        坐骨神经同样出现脱髓鞘改变,SC 肿胀明显,部分
                发现,在多发性硬化中,中枢神经系统存在明显的                            细胞甚至出现破碎,且这种改变与神经功能障碍和
                                                                                   [8]
                脱髓鞘改变和少突胶质细胞死亡,髓鞘功能丧失,                            神经炎症密切相关 。然而,本课题组以往的研究
                神经冲动传导受到抑制,此外,多系统萎缩患者 SC                          均是在体水平,尚未在细胞水平探究其损伤过程及
                中存在p⁃α⁃syn沉积     [20] 。在本课题组前期的研究中,               可能机制。RSC96 细胞系广泛应用于糖尿病、周围
                PD患者存在周围神经损伤,与健康对照相比,PD患                          神经损伤、骨科领域的研究,具有培养周期短,可多
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