Page 16 - 南京医科大学学报自然科学版
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第43卷第12期
·1632 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2023年12月
表1 RT⁃PCR 引物序列
Table 1 RT⁃PCR primer sequences
Gene Primer sequence(5′→3′)
GAPDH F:GACGCTGGTGCTGGTATTGCT/R:CTACTCCTTGGACGGCCATGTGT
Cmlc2 F:AGGCTGCTAATGACCCAAGC/R:ATTGGAGCCACTGCAAAAGC
Hand2 F:CCTTCAAAAGCGGAATTCAAA/R:CAGATGGCCTCATTTCGTCT
NKX2.5 F:GCATCAGAGCTTGGTGAACA/R:ATGCGCACGCATAAACATTA
Bcl2 F:TCACTCGTTCAGACCCTCAT/R:ACGCTTTCCACGCACAT
Bax F:GGCTATTTCAACCAGGGTTCC/R:TGCGAATCACCAATGCTGT
Caspase3 F:CCGCTGCCCATCACTA/R:ATCCTTTCACGACCATCT
Bip F:AAGAGGCCGAAGAGAAGGAC/R:AGCAGCAGAGCCTCGAAATA
Chop F:GAGGACACGTAGAGAAGGGG/R:TCCGTTGAGCTCCACATTCTT
对照组相比随氯氮平剂量增加,斑马鱼心脏 SV⁃BA 测心脏发育相关基因发现,与对照组相比,低剂量
间距逐渐变长,心率逐渐降低(图1B、C)。 CLP 处理显著降低心脏发育相关基因 NKX2.5 的表
斑马鱼为一心房一心室结构,心脏发育经环化 达,而高剂量CLP处理后Cmlc2、Hand2和NKX2.5都
而呈现为 S 型 [15] 。侧位观察时,心房心室有明显重 出现显著降低(图1E)。
叠区域,而低剂量氯氮平处理组心房及心室重叠面 以上提示,氯氮平导致斑马鱼心脏形态发育异
积减小,高剂量组心房心室几乎不重叠(图1D)。检 常、心功能受损、心脏发育相关基因表达异常,并呈
A Control L⁃CLP H⁃CLP B
( μm ) 300 ** ***
( AB ) 200
WT SV⁃BA distance
100
Control L⁃CLP H⁃CLP
C D
200 Control L⁃CLP H⁃CLP
Heart rate/min 150 ** *** ( AB )
100
50 WT
Control L⁃CLP H⁃CLP
EGFP)
( Cmlc2:
Tg
E 1.2 * 1.2 1.2
NKX2.5 mRNA level 0.8 ** mRNA level Hand2 0.8 ** Cmlc2 mRNA level 0.8 ***
0.4
0.4
0.4
0
Control L⁃CLP H⁃CLP 0 Control L⁃CLP H⁃CLP 0 Control L⁃CLP H⁃CLP
A:斑马鱼整体形态(×4);B:胚胎心脏SV⁃BA距离;C:斑马鱼胚胎心率检测;D:斑马鱼心包水肿(×10)及心脏结构(×40);E:发育相关基因
表达水平。与对照组相比,P < 0.05,P < 0.01, P < 0.001。
*
**
***
图1 氯氮平导致斑马鱼胚胎心脏发育缺陷
Figure 1 Clozapine impairs cardiac development