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第43卷第12期         杨妞妞，邵海峰，邓嘉林，等. 白鲜皮主要药效成分白鲜碱、黄柏酮、梣酮的抗皮炎作用比较及
                 2023年12月             机制研究［J］. 南京医科大学学报（自然科学版），2023，43（12）：1636-1642，1649               ·1637 ·


                cortex dictamnitoin exerting anti⁃dermatitis effect.
               ［Key words］ cortex dictamni；atopic dermatitis；dictamnine；fraxinellone；obacunone；JAK1⁃STAT3/STAT6
                                                                        ［J Nanjing Med Univ，2023，43（12）：1636⁃1642，1649］





                    特应性皮炎（atopicdermatitis，AD）是一种常见               较医学中心，动物饲养于SPF级动物实验房中，温度
                的以皮肤屏障功能破坏及持续性瘙痒症状为特征                             控制在（22±2）℃，12 h 光照/黑暗循环，自由饮食。
                的慢性复发性的炎症性皮肤疾病，影响全球 10%~                          所有动物的饲养及实验程序均按照扬州大学动物
                30%的儿童和2%~10%的成人，全球流行率接近2.3                       护理与使用委员会制定的指南进行，并获得扬州大
                亿例，严重影响患者的健康和生活质量，并加重其                            学医学院伦理委员会批准（编号：YXYLL⁃2022⁃52）。
                        ［1］
                经济负担 。多项研究表明：Th2细胞介导的免疫、                              白鲜皮饮片（生药，批号：211102，苏州市天灵
                皮肤屏障功能障碍和瘙痒是导致AD“抓—痒—抓”                           中药饮片有限公司），白鲜碱、梣酮、黄柏酮（成都曼
                恶性循环的重要因素，白介素（interleukin，IL）⁃31、                 斯特生物科技有限公司），2，4⁃二硝基氟苯（2，4⁃di⁃

                IL⁃4、IL⁃13、IL⁃5、胸腺基质淋巴细胞生成素（thymic                nitrofluorobenzene，DNFB）（上海麦克林生化科技股
                stromal lymphopoietin，TSLP）等细胞因子在 AD 引起           份有限公司），醋酸地塞米松片（dexamethasone，
                的皮肤炎症和瘙痒的病理进展过程中发挥重要作                             DEX）（0.75 mg/片，批号：2005002，许昌百正药业股
                用 。Janus 激酶（janus kinase，JAK）⁃信号转导和转              份有限公司）；小鼠IL⁃4、IL⁃10 、IL⁃31酶联免疫吸附
                  ［2］
                录激活因子（signal transducer and activator of tran⁃    试验（enzyme⁃linked immunosorbent assay，ELISA）试
                scription，STAT）通路参与了上述多数细胞炎症因子                    剂盒（武汉博士德生物工程有限公司）；兔抗GAPDH
                在 AD 中的免疫应答，此外，JAK⁃STAT 还参与调节                     多克隆抗体（杭州贤至生物科技公司）；兔单克隆抗
                AD表皮屏障功能及瘙痒信号转导               ［3-4］ 。因此JAK信       体JAK1、p⁃JAK1、STAT3、p⁃STAT3、STAT6、p⁃STAT6
                号通路可能是治疗皮炎的重要靶点。                                  和山羊抗兔二抗（Abcam 公司，美国）。真空旋转蒸
                    白鲜皮是芸香科植物白鲜的干燥根皮，具有清                          发仪（上海靳澜制造公司），恒温干燥箱（上海一恒
                热祛湿、祛风解毒的作用，在临床上被广泛用于治                            公司），高清摄像机（型号HF10，佳能公司，日本），冰
                疗哮喘、风湿、黄疸、冠状动脉粥样硬化以及湿疹、                           冻切片机（型号 CM1950，Thermo 公司，美国），正置
                荨麻疹、疥疮等多种疾病 。现代药理学研究表明，                           光学显微镜（型号BX43，Olympus 公司，日本），多功
                                      ［5］
                白鲜皮提取物具有抗炎、抗过敏、抗癌、抗氧化和保                           能酶标仪（型号EnSpire，PerkinElmer公司，美国），垂
                肝等作用    ［6-7］ ，但关于其止痒作用的实验室研究却很                   直电泳仪（型号 164⁃5050）、凝胶成像系统（型号
                少，尤其是白鲜皮主要活性成分中哪些能够在皮炎                            ChemiDoc XRS）（Bio⁃Rad公司，美国）。
                                                                               +
                治疗中发挥抗炎止痒作用的研究鲜有报道。白鲜                             1.2  方法
                皮的主要成分有生物碱类、柠檬苦素类、香豆素类、                           1.2.1 白鲜皮乙醇提取物的制备
                甾体类及多糖等，其中，白鲜碱、黄柏酮、梣酮是衡量                              将 1 kg 白鲜皮药材粉碎，加入 10 L 的 95%乙
                白鲜皮药物质量的3种主要指标性成分                 ［8-9］ 。白鲜碱      醇，在热回流提取系统中煮沸提取 2 次，每次 2 h。
                具有抗炎、抗过敏、抗癌等作用             ［10-11］ ；梣酮具有抗炎、       然后将提取液混合、过滤并使用真空旋转系统蒸发浓
                抗癌、抗氧化应激、抗纤维化等作用              ［12-15］ ；黄柏酮具有      缩，将浓缩液在恒温干燥箱烤箱中干燥烘干，共获得
                抗氧化、抗炎、抗癌、抗高血糖和抗肥胖作用                  ［16-18］ 。本  67.5 g 的白鲜皮乙醇提取物，提取率 6.75%。利用
                研究旨在利用 AD 小鼠模型比较白鲜皮 3 种指标性                        UPLC对白鲜皮醇提物主要成分进行鉴定和测定。
                活性成分的抗炎止痒作用，并观察其对炎症因子及                            1.2.2 建立特应性皮炎小鼠模型
                JAK1⁃STAT3/STAT6 信号通路的影响，为白鲜皮活                        在小鼠颈背部反复应用 DNFB 诱导 AD 小鼠模
                性成分在临床的应用提供理论依据。                                  型，造模方法如图 1A 所示。提前 5 d 在小鼠腹部剃
                                                                  毛（2 cm×2 cm），暴露腹部皮肤。2 d 后给予腹部剃
                1  材料和方法
                                                                  毛部位20 μL 0.5% DNFB 溶液（溶于4∶1的丙酮、橄
                1.1  材料                                           榄油混合液），并对小鼠颈背部进行剃毛处理（2 cm×
                    6~8 周龄雄性 C57BL/6 小鼠购买于扬州大学比                   2 cm）。3 d 后给予小鼠颈背部剃毛的区域 20 μL
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