Page 18 - 南京医科大学学报自然科学版
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第43卷第12期
·1634 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2023年12月
A
Control H⁃CLP CLP+BRC
( AB )
WT
B 200 C ( μm ) 250 ** D 2.0 * 3 *
( /min ) ## # level 1.5 mRNA level 2
Heart rate 150 * SV⁃BA distance 220 Bax/Bcl2 1.0 # Caspase3 1 #
0.5
100 190 0 0
Control H⁃CLP CLP+BRC Control H⁃CLP CLP+BRC Control H⁃CLP CLP+BRC Control H⁃CLP CLP+BRC
E
1.5 5
* 4 *
Bip mRNA level 1.0 ## Chop mRNA level 3 2 #
0.5
0 1 0
Control H⁃CLP CLP+BRC Control H⁃CLP CLP+BRC
A:斑马鱼心包水肿形态(×10);B:斑马鱼胚胎心率检测;C:胚胎心脏SV⁃BA距离;D:凋亡相关基因表达水平;E:内质网应激相关基因表
达水平。与对照组相比,P < 0.05,P < 0.01;与H⁃CLP组相比,P < 0.05,P < 0.01。
*
**
##
#
图3 溴隐亭缓解内质网应激
Figure 3 BRC treatment relieves endoplasmic reticulum stress
浓度(LC50 )值为 50 μmol/L,为了保证一定的存活率 中,其与 IRE1α、ATF6 和 PERK 的解离导致其活
进行后续实验,本文选择12.5 μmol/L及25.0 μmol/L 化。在 Bip 解离后,ATF6 诱导 Bip、CREB、Chop 和
CLP处理斑马鱼 。形态学检测显示,氯氮平导致 XBP1 基因的转录。PERK 同样激活 Chop 的转录,
[12]
斑马鱼出现心包水肿、心动过缓,与既往文献报道 Chop 是一种转录因子,主要控制促凋亡因子的表
一致 [12] ,本文还发现氯氮平会导致斑马鱼心房与心 达 [21-22] 。内质网应激引起的细胞死亡是通过细胞凋
室部分重叠减少,心脏结构线性化,并抑制斑马鱼 亡的线粒体途径发生的,由Bcl⁃2蛋白质家族高度调
NKX2.5、Hand2、Cmlc2 表 达 。 NKX2.5、Hand2、 节。其中 Bcl2 是抗凋亡蛋白,Bax 是促凋亡蛋白,
Cmlc2 在心脏发育及功能成熟中发挥重要作用,其 Bcl2 通过抑制 Bax 亚家族蛋白,阻止线粒体释放
中转录因子NKX2.5 在心脏形成、环化以及成熟中起 Caspase激活因子,从而抑制细胞凋亡 [23] 。本研究发
作用,该基因缺失会导致心脏房间隔缺损和房室传导 现氯氮平可诱导内质网应激相关基因Chop及Bip表
缺损;Hand2是转录因子Hand家族成员,其家族在发 达,细胞凋亡相关基因 Bax/Bcl2、Caspase3 表达;而
育中的心室中不对称表达,在心脏形态发生中起着至 使用 4⁃苯基丁酸抑制内质网应激至 72 hpf 时,斑马
关重要的作用,且调节血管发育和生成,是先天性心 鱼心包水肿、心率过缓、心脏线性化等均得到缓解,
脏病的介质;Cmlc2调控心肌细胞增殖、心脏收缩和 Chop、Bip、Bax/Bcl2 及 Caspase3 表达均降低。这些
肌纤维组装 [18-20] 。 结果说明氯氮平能诱导内质网应激,进一步诱导
长期内质网应激可诱导细胞凋亡并与多种心 Caspase3 及 Bax/Bcl2 的表达,提示氯氮平能诱导细
血管疾病相关,如心力衰竭、心肌病和缺血性心脏 胞凋亡。
病 [14] 。内质网应激由位于内质网膜上的3个传感器 研究报道,氯氮平抗精神病药物的作用基础是
[6]
介导:IRE1α、ATF6和PERK,这些途径通过Bip的解 暂时占据人纹状体中的多巴胺 D2 受体 。本文使
离激活。未折叠蛋白的积累将Bip募集到内质网腔 用溴隐亭处理斑马鱼胚胎,寻找氯氮平引起内质网应