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第43卷第12期
               ·1628 ·                         南   京 医 科       大 学      学 报                        2023年12月


              次传代的优势，因此，本研究使用RSC96细胞系，通                         α⁃syn 的积累和神经元轴突的缩短             ［28］ 。在多发性硬
              过 MPP 刺激诱导 PDSC 模型，探究细胞损伤及其可                      化小鼠体内诱导 TLR2 耐受可降低 TLR2 信号转导
                    +
              能机制。                                              从而增强髓磷脂的修复，提示降低先天免疫信号转
                  细胞通过凋亡和自噬清除受损老化的细胞，二                          导可能作为一种治疗多发性硬化炎症和髓鞘修复
              者相互制约，关系复杂。自噬功能障碍可表现为功                            的方法 。
                                                                      ［29］
              能失调的线粒体或错误折叠的蛋白质聚集，是多种                                 前期研究发现 SC 敲除 TLR2 可改善病理性
              神经退行性疾病的标志            ［21］ 。自噬过程表现为不同             α⁃syn诱导的迷走神经损伤，部分缓解PD大鼠前驱
              类型应激做出的适应性反应，然而当这种应激超过                            期自主神经功能障碍             ［13］ 。MPTP 小鼠坐骨神经

              一定阈值时，将会导致细胞凋亡。研究显示，MPTP                          TLR2水平上调且伴有神经传导速度减慢等电生理
              诱导神经元凋亡与PD 病理改变和行为障碍密切相                           改变，提示 TLR2 的激活与 PD 周围神经损伤密切
              关 ［22］ 。然而，既往的研究大多针对中枢多巴胺能神                       相关   ［8］ 。本研究从转录和蛋白水平分别评估了
              经元、小胶质细胞和星形胶质细胞，针对外周胶质细                           MPP 刺激下RSC96细胞TLR2/NF⁃κB信号通路激活
                                                                    +
                                                                                  +
                                                            +   情况，结果显示MPP 诱导细胞凋亡和自噬水平失衡
              胞的研究相对较少。本研究聚焦 SC，检测了 MPP
              处理后RSC96细胞增殖能力与凋亡水平，与既往研                          的同时，TLR2表达上调，p⁃NF⁃κB/NF⁃κB水平升高，
                                    +
              究结果一致，细胞经MPP 刺激后，cleaved caspase⁃3/               提示TLR2/NF⁃κB信号通路的激活。为了进一步探
              caspase⁃3水平升高，Bcl⁃2/Bax 水平下调，TUNEL 染              究TLR2/NF⁃κB信号通路在MPP 诱导的RSC96细胞
                                                                                             +
              色阳性细胞数目增多，提示细胞凋亡水平增高。                             凋亡和自噬失调中发挥的作用，本研究使用TLR1/2
                  在自噬过程中，LC3Ⅰ被泛素样体系加工修饰，                        抑制剂CU⁃CPT22处理RSC96细胞，结果显示，抑制
              产生 LC3Ⅱ，LC3Ⅱ的表达量与自噬水平正相关。                         TLR2 降低了 MPP 诱导的细胞凋亡水平，同时细胞
                                                                                +
              P62 作为一种自噬衔接蛋白，在自噬的过程中不断                          自噬水平升高，以上结果进一步证实了 MPP 诱导
                                                                                                         +
              降解，当自噬受损时，P62 水平升高。研究发现，                          RSC96 细胞凋亡与自噬失衡与 TLR2/NF⁃κB 信号通
              MPP 通过多巴胺转运体特异性转运到多巴胺能神                           路的激活有关。
                  +
              经元中，引发神经元过度自噬和丢失                  ［23］ 。然而，在           综上所述，本研究使用 MPP 发现 PD 中 SC 存
                                                                                              +
              本研究中，MPP 刺激 RSC96 细胞后 LC3Ⅱ/LC3Ⅰ显                  在出现凋亡与自噬失衡，并证实了与 TLR2/NF⁃κB
                            +
                                                 +              通路的相关性。抑制 TLR2 缓解 SC 损伤可能成为
              著下降，同时 P62 水平升高，提示 MPP 诱导 RSC96
              细胞自噬抑制，这可能是 SC 作为神经胶质细胞在                          PD 自主神经功能障碍的外周治疗靶点。本研究
              PD外周脱髓鞘改变中发挥的一种保护机制，还需要                           为 PD 中 SC 凋亡与自噬功能障碍以及可能机制提
              在体实验进一步研究不同时期PD外周神经SC结构                           供新的见解，为 PD 自主神经功能障碍的治疗提
              与功能的改变，以及是否存在SC增生。有研究报道                           供方向。
              在小鼠十二指肠注射α⁃syn 预制原纤维引发了肠道                         ［参考文献］
              胶质细胞增生，小鼠出现便秘等胃肠道功能改变，
                                                                ［1］ POEWE W，SEPPI K，TANNER C M，et al. Parkinson dis⁃
              然而中枢并未出现明显的病理表现                 ［24］ ，因此有必要
                                                                     ease［J］. Nat Rev Dis Primers，2017，3：17013
              聚焦外周神经胶质细胞做更深入的研究。                                ［2］ CHEN Z，LI G，LIU J. Autonomic dysfunction in Parkin⁃
                  TLR 作为跨膜模式识别受体，广泛分布于免疫                             son’s disease：implications for pathophysiology，diagno⁃
              和非免疫细胞中，并且能够识别细胞损伤相关分子                                 sis，and treatment［J］. Neurobiol Dis，2020，134：104700
              从而启动免疫应答反应           ［25］ 。以往研究报道TLR2激            ［3］ DOBKIN R D，MANN S L，GARA M A，et al. Telephone⁃
              活可促进晚期动脉粥样硬化中巨噬细胞的凋亡                       ［26］ ，      based cognitive behavioral therapy for depression in Par⁃
              此外，抑制 TLR2 可导致转基因小鼠和细胞模型中                              kinson disease：a randomized controlled trial［J］. Neurolo⁃
                                                                     gy，2020，94（16）：e1764-e1773
              自噬的激活，促进α⁃syn的清除，提示TLR2可能作为
                                                                ［4］ ATIK A，STEWART T，ZHANG J. Alpha⁃synuclein as a
              PD等神经退行性疾病自噬激活策略的靶标。TLR2
                                                                     biomarker for Parkinson’s disease［J］. Brain Pathol，
              在神经胶质细胞中高表达，其多态性与 PD 发病风
                                                                     2016，26（3）：410-418
              险有关，通过 TLR2 途径激活小胶质细胞能够诱导
                                                                ［5］ BEKKER M，ABRAHAMS S，LOOS B，et al. Can the in⁃
              神经毒性    ［27］ 。活化的小胶质细胞诱导神经元TLR2/                       terplay between autophagy and apoptosis be targeted as a
              JNK 通路的激活导致神经元自噬紊乱，进而促进了                               novel therapy for Parkinson’s disease?［J］. Neurobiol Ag⁃
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