Page 39 - 南京医科大学学报自然科学版
P. 39

第43卷第3期         孙上雯,陈汉帮,胡姝颖,等. 负载γ⁃Fe2O3的壳聚糖多孔海绵对大鼠骨髓间质干细胞增殖和
                  2023年3月             成骨分化的影响[J]. 南京医科大学学报(自然科学版),2023,43(3):326-333                    ·329 ·


                染色后,活细胞散在分布在海绵表面,未见死亡细                            第 7 和 14 天均有增加。第 7 天,CH1、CH5、CH10、
                胞(图3A)。CLSM示各组细胞均能很好地生长于海                         CH20 组 ALP 活性均高于 CH0 组,CH10 组高于 CH1
                绵上,生长形态未见明显差异(图3B)。                               组;第14天,CH5、CH10和CH20组ALP活性均高于
                2.3  细胞增殖                                         CH0 组和 CH1 组(P < 0.05)。第 7 天 ALP 染色结果
                    CCK⁃8 结果显示,细胞数量在 7 d 内均逐渐增                    与ALP活性检测结果一致(图5)。镜下染色结果示
                加,呈稳定增殖状态(图 4)。第 1 天,各实验组的吸                       CH0组与CH1组蓝紫色反应物散在分布,CH5组蓝
                光度值均高于 CH0 组,CH5、CH10 和 CH20 组的吸                  紫色反应物出现聚集,CH10与CH20组蓝紫色反应
                光度值高于 CH1 组;第 3、5、7 天,CH5、CH10 和                  物连接成片状。

                CH20 组 的 吸 光 度 值 均 高 于 CH0 和 CH1 组(P <            2.5  成骨相关基因的表达
                0.05)。这表明负载γ⁃Fe2O3浓度为 5%、10%和 20%                     PCR结果显示,第7天,CH10和CH20组ALP表
                的壳聚糖海绵对rBMSC的增殖有促进作用。                             达高于CH0组;第14天,CH5、CH10和CH20组ALP

                2.4  ALP活性                                        表达高于CH0组,CH10和CH20组ALP表达高于其
                    ALP 活性检测结果显示,各组细胞 ALP 活性在                     他实验组。第 7 天,CH5、CH10 和 CH20 组 Bmp2 表










                                      A                      B                                                 C

                                  D   0.04                       E  2.0                   100
                                                                           CH0组
                                      0.03                          ( MPa )  1.5  CH1组    80
                                                                           CH5组
                                     ( g )                                 CH10组          60  力
                                                                           CH20组
                                     质量  0.02  CH0组                 压缩应力  1.0             40  ( N )
                                            CH1组
                                            CH5组
                                      0.01                          0.5
                                            CH10组                                         20
                                            CH20组
                                        0                             0                   0
                                         0  2   4  6   8  10           0     2    4     6
                                               时间(周)                       压缩位移(mm)
                     A:壳聚糖海绵的SEM图(×900);B、C:CH10组表面的元素分布图;D:第8周时壳聚糖海绵降解曲线;E:壳聚糖海绵的力学性能。
                                                     图1   材料表征及力学性能
                                        Figure 1 Material characterization and mechanical properties









                                                   A                      B                       C









                                                   D                      E

                                             A:CH0组;B:CH1组;C:CH5组;D:CH10组;E:CH20组。
                                      图2   扫描电镜下rBMSC第1天在各组海绵上的黏附情况(×5 000)
                  Figure 2  Adhesion of rBMSC on the sponges of each group on the 1st day under scanning electron microscope(×5 000)
   34   35   36   37   38   39   40   41   42   43   44