Page 41 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第3期 孙上雯，陈汉帮，胡姝颖，等. 负载γ⁃Fe2O3的壳聚糖多孔海绵对大鼠骨髓间质干细胞增殖和
2023年3月 成骨分化的影响［J］. 南京医科大学学报（自然科学版），2023，43（3）：326-333 ·331 ·

A B C

F CH0组
CH1组
50 CH5组 # #
CH10组
（ U/g） 40 一一一一 # * # * 一一一一一一
*
CH20组
一一一一
ALP活性 30 * * * * 一一一一一一
一一一一一一
20
一一一一一一
D E 一一一一一一 一一一一一一
10
一一一一一一 一一一一一一
一一一一一一
0 一一一一一一 一一一一一一
7 d 一一一一一一 14 d
A：CH0 组；B：CH1 组；C：CH5 组；D：CH10 组；E：CH20 组；F：第 7 和 14 天 ALP 活性定量检测结果。与 CH0 组相比，P < 0.05；与 CH1 组相
*
比，P < 0.05。
#
图5 第7天ALP染色及第7、14天ALP活性定量检测结果（×100）
Figure 5 ALP staining results on the 7th day and ALP activity quantitative detection results on the 7th and 14th days（×100）
A B CH0组 C D
CH0组 △ CH1组 CH0组 CH0组
CH1组 △ # CH5组 △ CH1组 CH1组
CH5组 # CH10组 # CH5组 CH5组 △
CH20组
6 * 5 8 15
CH10组 * 一一一一 * CH10组 # ▲ CH10组 #
CH20组
CH20组
CH20组
一一一一 一一一一一一 4 一一一一 # △ 6 一一一一 # * △ 一一一一 *
#
4 一一一一* 一一一一一一 3 # * # * 一一一一 * # 10 一一一一
ALP * * 一一一一一一 Bmp2 * * Col1 4 # # # * * Runx2 #
2 一一一一一一 一一一一一一 2 一一一一一一 一一一一一一 * * 一一一一一一 5 # * * * ▲
一一一一一一
一一一一一一 2
一一一一一一 一一一一一一 1 一一一一一一 一一一一一一 一一一一一一 一一一一一一 一一一一一一
0 一一一一一一 一一一一一一 0 一一一一一一 一一一一一一 0 一一一一一一 一一一一一一 0 一一一一一一 一一一一一一
7 d 一一一一一一 14 d 一一一一一一 7 d 一一一一一一 14 d 一一一一一一 7 d 一一一一一一 14 d 一一一一一一 7 d 一一一一一一 14 d 一一一一一一
与CH0组相比，P < 0.05；与CH1组相比，P < 0.05；与CH5组相比，P < 0.05；与CH10组相比，P < 0.05。
#
△
*
▲
图6 第7和14天成骨相关基因ALP（A）、Bmp2（B）、Col1（C）和Runx2（D）表达结果
Figure 6 Results of osteogenesis related gene expression of ALP（A），Bmp2（B），Col1（C）and Runx2（D）on the 7th and
14th days
CH0组 成骨的空间，培养于其中的rBMSC能够紧密黏附在
4 CH1组
CH5组 海绵表面。CCK⁃8结果显示，细胞数量在7 d内均逐
CH10组 # # 渐增加，γ⁃Fe2O3负载浓度为5%、10%和20% 的壳聚
* *
CH20组
nm ） 3 一一一一 * 一一一一一一 糖海绵对 rBMSC 增殖有促进作用。ALP 是成骨细
一一一一 *
*
（ 550 2 一一一一一一 一一一一一一 胞功能性酶，一种由成骨细胞分泌的非胶原蛋白，
一一一一一一
D
1 一一一一一一 一一一一一一 是干细胞成骨分化的早期标志之一 ［29］ ，对骨矿化至
一一一一一一
一一一一一一 一一一一一一 关重要。Bmp2 是新骨形成的关键因子，是调节典
0 一一一一一一
21 d 一一一一一一 28 d 型成骨细胞分化和骨形成的转录因子 ［30-31］ 。一旦被
一一一一一一
与CH0组相比，P < 0.05；与CH1组相比，P < 0.05。 激活，它就会易位到细胞核中诱导骨基质蛋白（如
*
#
图7 第21和28天茜素红染色定量检测结果 Runx2、ALP 和 Col1）的表达 ［32］ 。Col1 通常在成骨细
Figure 7 Quantitative detection results of Alizarin red 胞分化和矿化阶段表达增加，Runx2 是成骨细胞分
staining on the 21st and 28th days
化的关键转录因子，是骨形成或再生的最早和最关
工程的壳聚糖水凝胶支架，增强其促成骨能力，使 键的生物标志物，其表达随着细胞发育成未成熟的
用冻干法将其制备成多孔海绵，扫描电镜及EDS元 成骨细胞而增加 ［33-34］ 。本研究分别在成骨培养第7、
素分析检测海绵表面疏松多孔，Fe元素均匀弥散分 14 天检测 ALP 活性及这些关键的成骨调节基因的
布，材料孔隙率较高，具有充足的用于新生血管及 表达水平，CH5、CH10和CH20组ALP活性及成骨调