Page 40 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第3期
·330 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2023年3月

A CH0组 CH1组 CH5组 CH10组 CH20组

B CH0组 CH1组 CH5组 CH10组 CH20组

A：活死细胞荧光染色结果（×100）；B：海绵支架上的细胞扩散的3D图像（×500）。
图3 激光共聚焦显微镜下rBMSC第5天的生长情况
Figure 3 Growth of rBMSC on the 5th day under laser confocal microscope

4 CH0组
CH1组 3 讨 论
CH5组 # #
3 CH10组 * * # 骨组织工程使用支架、生长因子和干细胞进行骨
CH20组
nm ） 一一一一 # # * 再生 。支架为细胞附着、增殖和分化提供位点。目
一一一一
［20］
* *
（ 450 D 2 # # # * # * 一一一一 一一一一 前，骨组织工程中用作支架的生物材料可分为以下几
一一一一
一一一一
1 * * 一一一一 一一一一 类：陶瓷、天然或合成聚合物和去细胞外基质。生物
# # # 一一一一 一一一一
* * * * 一一一一 一一一一 一一一一 活性陶瓷的不可降解性和较差的机械性能限制了其
一一一一 一一一一 一一一一
［21］
0 一一一一 一一一一 一一一一 临床应用 ；高分子聚合物材料便于塑形，然而其降
一一一一 一一一一 一一一一
1 3 5 7
一一一一
时间（d） 解产物在临床上会引起强烈的炎症反应，如聚乙醇酸
与CH0组相比，P < 0.05；与CH1组相比，P < 0.05。 （polyglycolic acid，PGA）降解后产生的乙醇酸和其他
*
#
图4 CCK8检测rBMSC增殖结果 酸性产物 ［22］ ；在去细胞化细胞外基质（decellularized
Figure 4 CCK8 detection results of rBMSC proliferation
extracellular matrix，dECM）中接种成骨细胞的细胞外
达高于其他实验组；第 14 天，CH10 组 Bmp2 表达高 基质构建体虽然表现出了较强的骨再生能力 ［23-24］ ，然
于其他实验组。第7和14天，CH5、CH10和CH20组 而去细胞化技术、组织处理方法、组织来源和储存条
［25］
Col1 表达均高于其他实验组，第 14 天 CH5 和 CH10 件等方面需要更多的研究改进 。
组 Col1 表达高于 CH20 组。第 7 天，CH5 和 CH10 组 本研究选择天然聚合物壳聚糖制备多孔海绵
Runx2表达均高于 CH0 和 CH1 组，第 14 天 CH10 组 支架，与上述材料相比，天然聚合物通常具有良好
Runx2 表达高于其他实验组。差异均有统计学意 的生物相容性和降解性，而且取材方便，来源广
义（P < 0.05，图 6）。 泛。与其他天然聚合物相比，壳聚糖本身便具有良
2.6 细胞外基质矿化物形成量 好的骨诱导性。壳聚糖无论游离还是合成支架，都
茜素红可检测 rBMSC 成骨晚期细胞外基质的 可以影响成骨相关信号通路的激活，通过上调
钙结节情况。成骨诱导第 21 和 28 天，定量检测结 Runx2、ALP 和成骨细胞特异性转录因子表达来刺
果显示：第 21 天，CH1、CH5 和 CH10 组矿化物形成 激小梁骨的产生，增加骨桥蛋白（osteopontin，Opn）
量高于CH0组；第28天，CH5和CH10组矿化物形成 和 Col1 的表达，并减少破骨细胞生成，促进间充质
量高于 CH0 组与 CH1 组，差异有统计学意义（P < 干细胞中的成骨细胞增殖和成骨 ［26-28］ 。
0.05，图7）。 本研究添加γ⁃Fe2O3纳米粒子改进用于骨组织