Page 48 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第3期
·338 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2023年3月

胞的红色荧光，表明所选的实验浓度对细胞无毒性 A 3.0
（图3）。 2.5
*
2.4 BP对hDPSC的ALP活性的影响 nm ） 2.0
ALP 染色评价 BP 对 hDPSC 成骨分化早期 ALP （ 450 1.5 *
表达的影响。结果表明，在7 d成骨诱导后，BP组与 D 1.0
*
对照组均有 ALP 的深蓝色着色团块且 BP 组染色较 0.5
深（图 4 A）。ALP 活性定量结果显示，BP 组 ALP 活 0
240.0 μmol/L BP组
对照组
15.0 μmol/L BP组
120.0 μmol/L BP组
30.0 μmol/L BP组
性高于对照组（图4 B，P < 0.01）。15.0 μmol/L BP组 7.5μmol/L BP组 60.0 μmol/L BP组
ALP 活力较7.5 μmol/L BP 组与30.0 μmol/L BP 组稍
B
高，差异有统计学意义（图4B，P < 0.01）。 3 对照组
2.5 BP对hDPSC细胞外基质矿化的影响 7.5 μmol/L BP组
15.0 μmol/L BP组
ARS 染色检测细胞外基质钙结节来评价 BP 对 2 30.0 μmol/L BP组
hDPSC 成骨分化晚期外基质矿化的影响。结果表 （ 450 nm ）
明，在 21 d 连续成骨诱导后，BP 组与对照组均显示 D 1
矿化物沉积，BP 组结节数目多于对照组，且染色较
0
深，其中 15.0 μmol/L BP 组染色较 7.5 μmol/L BP 组 0 1 2 3 4 5 6 7 8
时间（d）
与 30.0 μmol/L BP 组更深（图 5 A）。ARS 半定量结
*
A：细胞毒性检测；B：生物安全性检测。与对照组相比，P <
果与染色结果相符（图5B，P < 0.01）。
0.01（n=3）。
2.6 BP对hDPSC成骨相关基因表达的影响 图2 细胞毒性及生物安全性检测
qRT⁃PCR 分析探究 BP 对 hDPSC 成骨基因表达 Figure 2 Cytotoxicity and biosafety detection
对照组 7.5 μmol/L BP组 15.0 μmol/L BP组 30.0 μmol/L BP组

图3 活死细胞荧光染色（×100）
Figure 3 Cell live/dead fluorescence staining（×100）
A 对照组 7.5 μmol/L BP组 B 40
（ U/g蛋白 ） 30 * *△# *

20
ALP活性 10

0
15.0 μmol/L BP组
7.5 μmol/L BP组 30.0 μmol/L BP组
15.0 μmol/L BP组 30.0 μmol/L BP组 对照组

*
A：成骨诱导 7 d 后各组 hDPSC 的 ALP 染色图（×100）；B：成骨诱导 7 d 后各组 hDPSC 的 ALP 活性定量检测。与对照组相比，P < 0.01（n=
3）；与7.5 μmol/L BP组相比，P < 0.01（n=3）；与30.0 μmol/L BP组相比，P < 0.01（n=3）。
△
#
图4 BP对hDPSC ALP 活性的影响
Figure 4 Effects of BP on the ALP activity of hDPSC