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第43卷第4期 孙思宇，杨宇轩，陈 璐，等. 外源性IL⁃25对日本血吸虫感染引起肠壁损伤的影响［J］.
2023年4月 南京医科大学学报（自然科学版），2023，43（04）：452⁃458，474 ·453 ·

granulomas in the liver in the Inf group was not significantly different from that in the Inf+IL⁃25 group. The results of AB⁃PAS staining
showed that IL⁃25 could significantly promote the number of colonic goblet cells in mice after infection with S.japonicum，the ELISA
and the real⁃time PCR results showed that cytokines in the colon after S.japonicum infection were obviously altered，and IL⁃25 injection
promoted the expression of type 2 cytokines and decreased the expression of type 1 cytokines. Conclusion：IL⁃25 can alleviate the gut
damage induced by S.japonicum infection by promoting the differentiation of goblet cells.
［Key words］ Schistosoma japonicum；colonic damage；IL⁃25
［J Nanjing Med Univ，2023，43（04）：452⁃458，474］

日本血吸虫病是一种重要的人兽共患病，虫卵 本血吸虫阳性钉螺由江苏省血吸虫病防治研究所
堆积造成肝肠局部组织的损伤是导致血吸虫病的 提供。所有动物实验均通过南京医科大学实验动
主要原因。日本血吸虫感染后，成虫寄生在门脉⁃肠 物使用与管理委员会审查和批准，严格按照实验动
系膜静脉系统并产卵。成熟虫卵内毛蚴分泌的溶 物管理规定进行，实验动物伦理编号为：IACUC⁃
细胞物质可透过卵壳破坏血管壁，引起周围组织 2107035。
炎症、坏死。在肠道，虫卵实现了由血管到肠壁的 小鼠源 IL⁃25 重组蛋白（北京 Sino Biological 公
［1］
迁移 ，一部分形成肉芽肿，一部分随粪便排出体 司）；RNA Extraction Kit、PrimeScript RT Master Mix
［2］
外 。日本血吸虫虫卵主要聚积在宿主肝脏及肠 （TaKaRa公司，日本）；RiboSCRIPT Reverse Transcrip⁃
道，形成虫卵肉芽肿，进而引起肝肠纤维化，即“肝 tion Kit（广州锐博公司）；FS Universal SYBR Green
肠血吸虫病” 。然而，先前研究更多关注于血吸 （Roche 公司，瑞士）；IL⁃25多克隆抗体（Novus公司，
［3-4］
虫感染导致的肝脏损伤，对肠道的研究相对较少。 美国）；tublin 多克隆抗体（上海 Abmart 公司）；阿尔
肠道作为人体内最大的免疫器官和最大的微 新蓝⁃过碘酸雪夫（Alcian blue⁃periodic acid⁃Schiff，
生态场所，受到越来越多的关注。肠上皮细胞间紧 AB⁃PAS）染色试剂盒（南京建成公司）；蛋白裂解液
密连接构成了肠道屏障中重要的机械屏障。近年 RIPA、蛋白酶抑制剂 PMSF、BCA 试剂盒（上海碧云
来研究发现，白细胞介素（interleukin，IL）⁃25可参与 天公司）；IL⁃25、IL⁃4、IL⁃10、肿瘤坏死因子⁃α（tumor
肠道屏障的完整性及肠道免疫稳态的维持，并在肠 necrosis factor α，TNF⁃ α）、γ 干 扰 素（interferon γ，
道寄生虫感染介导的 2 型免疫应答中发挥关键作 IFN⁃γ）ELISA试剂盒（浙江联科公司）；4%多聚甲醛
用。IL⁃25也称为IL⁃17E，可以由上皮细胞、T细胞、 （武汉谷歌生物公司）。
树突状细胞以及2型固有淋巴细胞（innate lymphoid 1.2 方法
cell，ILC2）分泌 ［5-7］ 。在肠道蠕虫，例如巴西日圆线 1.2.1 动物模型的建立
虫、旋毛虫、鞭虫等感染过程中，肠 tuft 细胞分泌的 小鼠随机分为 4 组（正常组 5 只、正常+IL⁃25 组
IL⁃25 可激活下游 ILC2⁃IL13 轴，促进杯状细胞分化 5 只、感染组 7 只、感染+IL⁃25 组 7 只）。感染组、感
并分泌黏液，恢复肠道屏障和黏膜保护，最终发挥 染+IL⁃25组中每只小鼠经腹部感染日本血吸虫尾蚴
抗寄生虫感染的作用 ［3，8-11］ 。 40条，时间为20 min。感染+IL⁃25组、正常+IL⁃25组
然而，IL⁃25在日本血吸虫感染引起的肠道损伤 小鼠于感染后或实验开始后的第4周开始腹腔注射
中的作用尚不清楚。本研究通过建立日本血吸虫 IL⁃25，注射量为0.5 μg/只，隔天注射1次，注射3周；
急性感染模型，分析 IL⁃25 腹腔注射对日本血吸虫 正常组和感染组腹腔给予相同体积的生理盐水。
小鼠感染后结肠道损伤及杯状细胞分化的影响，为 感染后6周剖杀全部小鼠。
进一步探究IL⁃25在寄生虫感染导致的肠道疾病的 1.2.2 HE染色
治疗过程中提供理论支撑。 4%多聚甲醛溶液固定小鼠肝脏、结肠组织，固
定 2 d 后进行蜡块包埋，切片进行 HE 染色，显微镜
1 材料和方法
下观察拍照。
1.1 材料 1.2.3 Western blot试验
本实验使用 6~8 周龄雌性 C57BL/6 小鼠，体重 用蛋白裂解液 RIPA 和蛋白酶抑制剂 PMSF 研
约为 20 g，均购自南京医科大学实验动物基地。日 磨小鼠结肠组织，冰上裂解30 min后，4 ℃、12 000 g