Page 22 - 南京医科大学学报自然科学版
P. 22

第43卷第4期
               ·460 ·                            南 京    医 科 大 学 学         报                        2023年4月


                           +
              Tregs and CXCR4 Tregs in PB of RA decreased，and the ratios in the high disease activity group and the middle disease activity group
                                                                       +
              were lower than those in the remission group（P < 0.05）. The ratio of CXCR4 Tregs in PB of RA was negatively correlated with the
              level of erythrocyte sedimentation rate（ESR），C⁃reactive protein（CRP），interleukin⁃6（IL⁃6）levels and DAS28 score. ②The ratios of
                           +
                                                                                                     +
              Tregs and CXCR4 Tregs in SF of RA were significantly higher than those in SF of OA. ③The ratios of Tregs and CXCR4 Tregs in SF
              of RA were higher than those in PB. ④Compared with healthy controls，the mobility of Tregs in PB of RA increased significantly.
                                               +                                                              +
              Conclusion：The ratios of Tregs and CXCR4 Tregs in PB of RA decreased，which are related to disease activity. Tregs and CXCR4
              Tregs in SF of joint inflammation are higher than those in PB and SF of OA. Tregs increased in SF of RA may be migrated from PB
              through CXCR4.
             ［Key words］ rheumatoid arthritis；regulatory T cell；CXCR4；synovial fluid
                                                                            ［J Nanjing Med Univ，2023，43（04）：459⁃467］





                  类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种            其中，男3例，女5例，年龄（57.89±11.41）岁，均符合
              以多关节炎为主要表现的自身免疫性疾病，其特征                            中国骨关节炎诊疗指南（2021年版）中的OA诊断标
              是慢性滑膜炎症，随着疾病的进展，对关节组织造                            准 。健康对照（healthy control，HC）组40例，为同
                                                                  ［9］
              成破坏，导致关节畸形，影响日常活动                 ［1-2］ 。调节性      期本院健康体检者，其中，男 11 例，女 29 例，年龄
              T细胞（regulatory T cell，Treg）是一群高表达CD25分            （56.53±10.86）岁，均无相关免疫性疾病和近期感染
                       +                                    +   史。本研究经江苏大学附属医院伦理委员会审核
              子的 CD4 T 细胞，研究表明 CD127 在大多数 CD4
              CD25 Treg 细胞上以低水平表达，CD4、CD25 和                    批准（伦理审查号KY2022K1009），且所有研究对象
                   +
              CD127可以作为筛选高度纯化的Treg细胞群的表面                        进入研究前签署书面知情同意书。
              标志  ［3-4］ 。既往研究显示，RA 受累关节滑液中存在                         红细胞裂解液、荧光抗体试剂 CD4⁃PerCP、
              大量 Treg 聚集，Treg 通过抑制自身反应性效应 T 细                   CD25⁃APC 和 CD127⁃PE（BD Pharmingen 公司，美
              胞来控制自身免疫的发生和发展，其功能活性受损                            国）；CXCR4⁃FITC（Abcam 公司，英国）；淋巴细胞分
              导致的免疫紊乱可能是RA的发病机制                  ［5-6］ 。CXC趋    离液（天津灏洋生物）；EasySep CD4正选试剂盒及
                                                                                            TM
              化因子受体 4（C⁃X⁃C motif chemokine receptor 4，         磁珠分选器（STEMCELL 公司，加拿大）；CXCL12 蛋
              CXCR4）是趋化因子配体 12（C⁃X⁃C motif chemokine            白（MedChemExpress 公司，美国）；RPMI 1640 培养
              ligand 12，CXCL12）的受体，Treg 表达 CXCR4，并在             基、胎牛血清（Gibco 公司，美国）；Transwell 趋化小
              体外响应其配体迁移。研究表明 CXCR4/CXCL12                       室（北 京 兰 杰 柯）；流 式 细 胞 仪 CANTO10C（BD
              信号在调节 Treg 向组织迁移和维持外周 Treg 的稳                     Pharmingen公司，美国）。
              态中起重要作用         ［7］ 。本研究拟探讨 CD4 CD25          +   1.2  方法
                                                      +
              CD127 Treg 及 CXCR4 Treg 在 RA 患者外周血及关              1.2.1  患者资料收集和分组
                    -
                                  +
              节滑液中的比例变化，分析 Treg 细胞和 CXCR4 的                          收集患者资料，包括临床资料：性别、年龄、病
              水平与疾病活动度和炎性指标的关系，现总结报道                            程、28 关节疾病活动度评分（disease activity score in
              如下。                                               28 joints，DAS28）；实 验 室 资 料 ：血 沉（erythrocyte
                                                                sedimentation rate，ESR）、C 反 应 蛋 白（C ⁃ reactive
              1 对象和方法
                                                                protein，CRP）、白细胞介素⁃6（interleukin⁃6，IL⁃6）、
              1.1  对象                                           类风湿因子（rheumatoid factor，RF）、抗环瓜氨酸肽
                  RA 组51例，为2021年10月—2022年7月在江                   （cyclic citrullinated peptide，CCP）抗体。按照DAS28
              苏大学附属医院风湿免疫科住院的 RA 患者，其                           评分将 RA 患者分为缓解组（DAS28 < 2.6）、低疾
              中，男 13 例、女 38 例，年龄（60.78±10.29）岁，病程               病 活动度组（2.6≤DAS28≤3.2）、中疾病活动度组
              0.5~46 年，中位病程 10（2，17）年，均符合 2010 年美               （3.2 < DAS28≤5.1）和高疾病活动度组（DAS28 > 5.1）；
              国风湿病学会/欧洲抗风湿病联盟（ACR/EULAR）                        按照RF水平将RA患者分为RF阴性组（RF < 20 U/mL）
              的 RA 诊断标准 。骨关节炎（osteoarthritis，OA）组               和 RF 阳性组（RF≥20 U/mL），按照抗 CCP 抗体水
                            ［8］
              8 例，为同期来本院就诊的原发性膝骨关节炎患者，                          平将 RA 患者分为抗 CCP 抗体阴性组（抗 CCP 抗
   17   18   19   20   21   22   23   24   25   26   27