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第43卷第4期          蒋  宇，汤    郁，陈   頔，等. 类风湿关节炎患者CD4 CD25 CD127 调节性T细胞CXCR4的
                                                                              +
                                                                         +
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                  2023年4月                  研究［J］. 南京医科大学学报（自然科学版），2023，43（04）：459⁃467                   ·465 ·
                   A                                 B                HC                         RA
                              CD4 -     CD4 +
                        3.0×10 3  0.45%  99.55%                           5.59%         10 3          3.64%
                       计数  2.0×10 3                     实验前  Comp⁃APC⁃A∷CD25  10 3    Comp⁃APC⁃A∷CD25

                        1.0×10 3                            10 2                        10 0 2
                            0                              -10 0 2                     -10 2
                               3
                            -10 0 10 3  10 4  10 5
                                                                 0    10 3  10 4            0    10 3  10 4
                              Comp⁃PerCP⁃A∷CD4
                                                                Comp⁃PE⁃A∷CD127            Comp⁃PE⁃A∷CD127
                   C      60                                              1.30%          3            1.47%
                         （ % ）  40   ***  ▲ ▲           实验后  Comp⁃APC⁃A∷CD25  10 3    Comp⁃APC⁃A∷CD25  10
                                                                          1 352
                                                                                                      2 557
                         Treg细胞迁移率  20  ▲ ▲ ▲▲ ▲▲ ▲▲       -10 0 2 2                   -10 0 2 2
                                          ▲
                                                                                        10
                                         ▲
                                                            10
                                         ▲
                                          ▲
                                          ▲
                           0                                     0    10 3  10 4            0    10 3  10 4
                                 HC      RA
                                                                Comp⁃PE⁃A∷CD127            Comp⁃PE⁃A∷CD127
                   A：磁珠正选外周血CD4 T淋巴细胞后进行流式细胞术检测其纯度达99.55%；B：外周血CD4 T细胞进行Transwell试验，流式细胞术检测
                                                                                  +
                                   +
                迁移到下室的CD4 T细胞中CD4 CD25 CD127 Treg的比例和细胞数的代表性流式结果图；C：RA组（n=15）和HC组（n=10）外周血Treg细胞迁
                                          +
                            +
                                               -
                                      +
                移率的比较。两组比较， P < 0.001。
                                 ***
                                             图7 RA患者与HC组外周血Treg迁移率的比较
                        Figure 7 The comparison of Treg migration rate in peripheral blood between RA and healthy controls
                和软骨破坏     ［12-13］ 。Treg 细胞又称调节性 T 细胞，大            细胞介素⁃1β（interleukin⁃1β，IL⁃1β）和肿瘤坏死因
                量研究表明，Treg 细胞在控制自身免疫反应及维持                         子α（tumor necrosis factor⁃α，TNF⁃α）等因子的驱动
                免疫耐受方面起着关键作用             ［14-15］ ，在系统性红斑狼         下转化为产生促炎因子的辅助性T细胞17（T helper
                                                                              ［24］
                疮（systemic lupus erythematosus，SLE）及干燥综合征         cell 17，Th17） ，因此，Treg 表达失衡可能参与了
               （Sjogren’s syndrome，SS）患者中均发现有 Treg 细胞             RA的发病机制。
                的数量及功能的异常，导致机体免疫耐受下降，导                                为进一步研究RA患者关节液中Treg表达增高
                致自身免疫反应        ［16-17］ 。既往有研究显示，RA 患者             的机制，还检测了同一个 RA 患者关节液与外周
                外周血中 Treg 减少      ［18-19］ ，受累关节滑液中 Treg 增         血，结果发现关节液中 Treg 的比例明显高于外周
                加 ［20］ ，但也有部分研究发现 RA 患者外周血 Treg 比                 血，因此推测关节液中 Treg 可能由外周血迁移而
                例较健康对照外周血无明显差异                ［21-22］ ，可能与标记      来。CXCL12 是由骨髓基质细胞分泌的趋化因子，
                的Treg细胞表面分子不同有关，也可能与研究所纳                          CXCR4 是其受体，研究表明 CXCL12/CXCR4 轴可
                入的RA患者治疗方案和疾病活动度不同有关。在                            以介导细胞的定向迁移，Treg 细胞在不同自身免疫
                本研究中，RA患者外周血CD4 CD25 CD127 Treg细                  病的炎症组织中的积聚可能与 CXCR4 表达上调有
                                                +
                                                       -
                                           +
                胞比例明显低于健康对照组，且高疾病活动度组低                            关 ［13，25-26］ 。有研究发现RA患者关节液中CXCL12表
                于缓解组，Treg 细胞比例与疾病活动指标 DAS28 评                     达显著高于外周血         ［11，27］ ，但RA患者炎症关节滑液中
                分、CRP、ESR及IL⁃6水平呈负相关，提示RA患者免                      Treg 细胞 CXCR4 表达情况的研究较少。Jiao 等              ［25］
                疫耐受亦存在缺陷，RA 患者外周血 Treg 细胞比例                       发现RA患者和健康对照组间外周血Treg上CXCR4
                降低，导致其免疫抑制缺陷，减少对促炎细胞因子                            的 表达没有明显差异，但关节液中 Treg 细胞上
                的抑制，从而引起关节炎症            ［23］ ，Treg 异常参与了 RA       CXCR4的表达显著增加，与本研究结果相似。本研
                的发病机制。课题组进一步研究发现RA患者关节                            究中，RA 患者关节液中的 Treg 细胞 CXCR4 表达水
                滑液中 CD4 CD25 CD127 Treg 细胞比例明显高于                  平明显高于 RA 患者外周血及 OA 患者关节滑液。
                                +
                                       -
                           +
                OA 患者关节滑液，提示炎症关节大量 Treg 聚集。                       鉴于 CXCR4 可以介导 CD4 T 细胞募集到 RA 的关
                                                                                           +
                研究显示关节炎症环境中的 Treg 细胞可在 IL⁃6、白                     节滑膜中     ［26］ ，本文推测 RA 患者关节液中 CXCR4           +
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