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第43卷第5期 施 欣,景蓉蓉,王 洁,等. 环状RNA hsa_circ_0001479在胃癌中的表达及功能研究[J].
2023年5月 P<0.000 1 南京医科大学学报(自然科学版),2023,43(5):617-625 ·621 ·
0001479 在 4 株胃癌细胞株中的表达增高,其中,在
hsa_circ_0001479相对表达量 40 (P < 0.05)。选用 MKN⁃45 细胞株进行核浆分离操
50
MKN⁃45、BGC⁃823 细胞株中表达增高较为显著
30
作,通过 RT⁃qPCR 检测发现 hsa_circ_0001479 主要
20
定位于细胞质中(图5)。选取表达较高的MKN⁃45、
10
0
的SGC⁃7901进行过表达实验。
胃癌组织 癌旁组织 BGC⁃823 进行干扰实验,表达较低且细胞大小适中
图4 hsa_circ_0001479在胃癌及癌旁组织的表达水平
Figure 4 Level of hsa_circ_0001479 in 76 GC and paired A 8
paracancerous tissues **
表2 Hsa_circ_0001479表达水平与临床病理参数的关系 6
Table 2 Relationship between hsa_circ_0001479 expres⁃ hsa_circ_0001479相对表达量 4 *
sion and clinicopathological factors 2
hsa_circ_0001479表达水平
临床病理参数 例数 高水平组 低水平组 P值 0
(n=38) (n=38) GES⁃1 MGC⁃803 SGC⁃7901 MKN⁃45 BGC⁃823
性别 0.427 B
1.2 细胞核 细胞浆
男 57 27 30
1.0
女 19 11 08
相对丰度 0.6
年龄 0.442 0.8
<60 21 12 09
≥60 55 26 29 0.4
肿瘤大小(cm) 0.039 0.2
<4 39 15 24 0
hsa_circ_0001479 U6 GADPH
≥4 37 23 14 * **
分化程度 0.238 图5 与GES⁃1比较,P<0.05,P<0.01。
高/中分化 29 12 17 胃癌细胞株hsa_circ_0001479表达水平(A)及核浆分
布情况(B)
低分化 47 26 21
浸润深度 0.044 Figure 5 Level of hsa_circ_0001479 in GC cell lines(A)
and distribution of hsa_circ_0001479 in GC
T1+T2 15 04 11
cells(B)
T3+T4 61 34 27
淋巴结转移 0.011
Yes 54 32 22 在 转 染 干 扰 片 段 si1 和 si2 后 检 测 hsa_circ_
No 22 06 16 0001479表达水平发现,si2片段干扰效率达60%以
TNM分期 0.021
上,而si1片段几乎无干扰效果,选si2片段进行后续
Ⅰ~ⅡA 21 06 15
实验(图6A,B)。转染pcDNA hsa_circ_0001479后,
ⅡB~ⅢC 55 32 23
胃癌细胞株中 hsa_circ_0001479 表达量显著增高
CEA(ng/mL) 0.387
(图6C)。
≤5.0 61 29 32
>5.0 15 09 06 2.5 Hsa_circ_0001479 对胃癌细胞生物学行为的
CA19⁃9(U/mL) 0.042 影响
≤37.0 66 30 36 CCK⁃8 实验结果显示,与对照组相比,转染
>37.0 10 08 02
hsa_circ_0001479 干扰片段的胃癌细胞增殖能力减
hsa_circ_0001479可能参与胃癌的恶性进展。 弱(图 7A,B),转染 hsa_circ_0001479 过表达载体的
2.4 Hsa_circ_0001479 在胃癌细胞株中的表达、定 胃癌细胞增殖能力显著增加(图7C);克隆形成实验
位及转染效率检测 结果显示,与对照组相比,转染hsa_circ_0001479干
RT⁃qPCR 结果显示,与 GES⁃1 相比,hsa_circ_ 扰片段的胃癌细胞克隆斑数量明显减少(BGC⁃823: