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第43卷第5期          施  欣,景蓉蓉,王 洁,等. 环状RNA hsa_circ_0001479在胃癌中的表达及功能研究[J].
                  2023年5月            P<0.000 1  南京医科大学学报(自然科学版),2023,43(5):617-625                      ·621 ·


                                                                  0001479 在 4 株胃癌细胞株中的表达增高,其中,在
                         hsa_circ_0001479相对表达量  40               (P < 0.05)。选用 MKN⁃45 细胞株进行核浆分离操
                         50
                                                                  MKN⁃45、BGC⁃823 细胞株中表达增高较为显著
                         30
                                                                  作,通过 RT⁃qPCR 检测发现 hsa_circ_0001479 主要
                         20
                                                                  定位于细胞质中(图5)。选取表达较高的MKN⁃45、
                         10
                          0
                                                                  的SGC⁃7901进行过表达实验。
                                胃癌组织       癌旁组织                   BGC⁃823 进行干扰实验,表达较低且细胞大小适中
                  图4 hsa_circ_0001479在胃癌及癌旁组织的表达水平
                Figure 4  Level of hsa_circ_0001479 in 76 GC and paired  A   8
                        paracancerous tissues                                                         **

                 表2 Hsa_circ_0001479表达水平与临床病理参数的关系                           6
                Table 2  Relationship between hsa_circ_0001479 expres⁃      hsa_circ_0001479相对表达量  4  *
                        sion and clinicopathological factors                 2
                                   hsa_circ_0001479表达水平
                临床病理参数        例数    高水平组      低水平组       P值                  0
                                     (n=38)    (n=38)                          GES⁃1 MGC⁃803 SGC⁃7901 MKN⁃45 BGC⁃823
                性别                                      0.427           B
                                                                            1.2       细胞核      细胞浆
                  男            57      27        30
                                                                            1.0
                  女            19      11        08
                                                                           相对丰度  0.6
                年龄                                      0.442               0.8
                  <60          21      12        09
                  ≥60          55      26        29                         0.4
                肿瘤大小(cm)                                0.039               0.2

                  <4           39      15        24                          0
                                                                              hsa_circ_0001479 U6  GADPH
                  ≥4           37      23        14                                    *      **
                分化程度                                    0.238     图5         与GES⁃1比较,P<0.05,P<0.01。
                  高/中分化        29      12        17                    胃癌细胞株hsa_circ_0001479表达水平(A)及核浆分
                                                                       布情况(B)
                  低分化          47      26        21
                浸润深度                                    0.044     Figure 5  Level of hsa_circ_0001479 in GC cell lines(A)
                                                                           and distribution of hsa_circ_0001479 in GC
                  T1+T2        15      04        11
                                                                           cells(B)
                  T3+T4        61      34        27
                淋巴结转移                                   0.011
                  Yes          54      32        22                   在 转 染 干 扰 片 段 si1 和 si2 后 检 测 hsa_circ_
                  No           22      06        16               0001479表达水平发现,si2片段干扰效率达60%以
                TNM分期                                   0.021
                                                                  上,而si1片段几乎无干扰效果,选si2片段进行后续
                  Ⅰ~ⅡA         21      06        15
                                                                  实验(图6A,B)。转染pcDNA hsa_circ_0001479后,
                  ⅡB~ⅢC        55      32        23
                                                                  胃癌细胞株中 hsa_circ_0001479 表达量显著增高
                CEA(ng/mL)                              0.387
                                                                 (图6C)。
                  ≤5.0         61      29        32
                  >5.0         15      09        06               2.5  Hsa_circ_0001479 对胃癌细胞生物学行为的
                CA19⁃9(U/mL)                            0.042     影响
                  ≤37.0        66      30        36                   CCK⁃8 实验结果显示,与对照组相比,转染
                  >37.0        10      08        02
                                                                  hsa_circ_0001479 干扰片段的胃癌细胞增殖能力减
                hsa_circ_0001479可能参与胃癌的恶性进展。                      弱(图 7A,B),转染 hsa_circ_0001479 过表达载体的

                2.4  Hsa_circ_0001479 在胃癌细胞株中的表达、定                胃癌细胞增殖能力显著增加(图7C);克隆形成实验
                位及转染效率检测                                          结果显示,与对照组相比,转染hsa_circ_0001479干

                    RT⁃qPCR 结果显示,与 GES⁃1 相比,hsa_circ_             扰片段的胃癌细胞克隆斑数量明显减少(BGC⁃823:
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