Page 38 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第5期
·620 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2023年5月

A B
hsa_circ_0001479 18 s rRNA
2 000 bp
1 000 bp
750 bp
500 bp
151 bp 250 bp
71 bp 100 bp
hsa_circ_0001479
18 s rRNA

C
测序结果：

反向互补序列：
5′⁃ATCTTCGAAAACATACA︳GA︳GCAGCCCGACGGCCATGGAGGCTGAAGAGACGATGGAATGCCTTCAGGAGTT⁃3′
成环点
A：荧光定量PCR熔解曲线；B：荧光定量PCR产物琼脂糖凝胶电泳图；C：hsa_circ_0001479 PCR产物测序图，测序结果的反向互补序列与
Circbase数据库提供的hsa_circ_0001479分子序列一致。
图1 RT⁃qPCR检测hsa_circ_0001479和18 s rRNA的正确度评价
Figure 1 Accuracy evaluation for detection of hsa_circ_0001479 and 18 s rRNA via RT⁃qPCR

40 30
Y=-2.831X+23.65 Y=-2.918X+6.958
2
2
35 r =0.999 4 r =0.999 2
20
CT值 30 CT值
10
25
20 0
-5 -4 -3 -2 -1 0 -8 -6 -4 -2 0
稀释系数（log） 稀释系数（log）
图2 RT⁃qPCR检测hsa_circ_0001479（A）和18 s rRNA（B）的线性范围评价
Figure 2 Linear range evaluation for detection of hsa_circ_0001479（A）and 18 s rRNA（B）via RT⁃qPCR

A B C
4 11 1.5 Rnase R-
ZNF131 Rnase R+ P＜0.001
MRE（microRNA 相对表达量 1.0
response elemeot） 4 11
RBP（RNA binding Spliced site 0.5
pcotein）
ORF（open rending
frenc）
0
hsa_circ_0001479 ZNF131
D
cDNA gDNA cDNA gDNA Rnase R- Rnase R+
250 bp 250 bp
100 bp 100 bp

：Divergent primer ：Convergent primer
hsa_circ_0001479 ZFN131
A：CSCD 数据库下载的 hsa_circ_0001479 结构图；B：hsa_circ_0001479 环化位点及其所对应的测序结果；C：Rnase R 实验验证 hsa_circ_
0001479稳定性；D：琼脂糖凝胶电泳显示hsa_circ_0001479仅可在cDNA中被扩增。
图3 Hsa_circ_0001479的成环性和稳定性验证
Figure 3 Ring structure and stability of hsa_circ_0001479