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第43卷第5期 张 城，杨 倩，姚 俊，等. OSBPL2介导RhoA/ROCK2信号通路调控听觉细胞肌动蛋白细胞骨架［J］.
2023年5月 南京医科大学学报（自然科学版），2023，43（5）：648-654 ·651 ·

A B
×40 ×100
F⁃actin相对荧光强度 1.5
F⁃actin/DAPI
WT 1.0 **

5 μM 0.5

0
WT KO
KO

B D
0 h 12 h 24 h
1.5 WT
细胞划痕相对面积 *
KO
WT 1.0 **

200 μM 0.5
0
0 h 12 h 24 h

KO

A：Osbpl2⁃WT/KO HEI⁃OC1细胞的免疫荧光检测及免疫荧光强度统计，采用Phalloidin 特异标记F⁃actin细胞骨架（绿），DAPI标记细胞核
**
*
（蓝），标尺：5 μm，虚线框内为放大区域（×10），箭头指示区域为刺突和伪足；B：细胞划痕实验结果及数据统计。两组比较，P＜0.05，P＜0.01
（n≥3）。
图1 Osbpl2⁃WT/KO HEI⁃OC1细胞肌动蛋白骨架形态功能分析
Figure 1 Morphological and functional analysis of actin cytoskeleton in Osbpl2⁃WT/KO HEI⁃OC1 cells

A ** WT ** B P⁃LIMK⁃1 WT KO 73 kDa C 1.5 WT
mRNA相对表达水平 1.5 * LIMK⁃1 73 kDa 细胞各蛋白相对灰度值 （ /GAPDH） 1.0 * *** * **
KO
KO
1.0
161 kDa
ROCK2
0.5
0.5
22 kDa
RhoA
0.0 GAPDH 37 kDa 0.0
RhoA ROCK2 LIMK⁃1 RhoA ROCK2 LIMK⁃1 P⁃LIMK⁃1
A：qRT⁃PCR 检测 HEI⁃OC1 细胞中 RhoA/ROCK2 信号通路关键分子 mRNA 表达情况；B、C：Western blot 实验检测 HEI⁃OC1 细胞中 RhoA/
ROCK2信号通路关键分子蛋白表达情况（B）及蛋白表达相对灰度值分析（C）。两组比较，P＜0.05，P＜0.01， P＜0.001（n≥3）。
***
**
*
图2 OSBPL2缺陷导致HEI⁃OC1细胞中RhoA/ROCK2信号通路被抑制
Figure 2 OSBPL2 deficiency led to the inhibition of RhoA/ROCK2 signaling pathway in HEI⁃OC1 cells

2.3 OSBPL2对HEI⁃OC1细胞中ADF/CFL⁃1定位和 动蛋白微丝的部位，可切断微丝并与肌动蛋白单体
表达的影响 结合，在调控微丝聚合与解聚的动态过程中发挥重
ADF和CFL⁃1是肌动蛋白结合蛋白家族成员中 要作用。对 Osbpl2⁃WT/KO HEI⁃OC1 细胞的免疫荧
作用于解聚微丝的蛋白群，同时也是LIMK1下游磷 光染色显示，ADF/CFL⁃1 定位于 Osbpl2⁃WT HEI⁃
酸化的靶分子。ADF/CFL⁃1一般定位于细胞富含肌 OC1 细胞外周的微刺突，丝状伪足以及应力纤维和