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第43卷第5期 张 城，杨 倩，姚 俊，等. OSBPL2介导RhoA/ROCK2信号通路调控听觉细胞肌动蛋白细胞骨架［J］.
2023年5月 南京医科大学学报（自然科学版），2023，43（5）：648-654 ·653 ·

A B
WT KO 1.5 *** WT
内耳各蛋白相对灰度值 （ /GAPDH）
KO
RhoA 22 kDa *** ***
ROCK2 158 kDa 1.0
ADF/CFL⁃1 21 kDa 0.5

GAPDH 37 kDa
0.0
RhoA ROCK2 ADF/CFL⁃1
C D E
WT KO **
000 （ μm ） 5 *** （ μm ） 0.35
毛细胞静纤毛长度 4 2 1 毛细胞静纤毛宽度 0.25
×2 5 μM 3 0.30

×10 000 0 WT KO 0.20 WT KO

2 μM

A、B：Western blot实验检验小鼠耳蜗RhoA/ROCK2信号通路关键分子蛋白表达情况（A）及蛋白表达相对灰度值分析（B），两组比较， P＜
***
0.001（n≥3）；C~E：扫描电镜观察小鼠耳蜗毛细胞形态（C），及静纤毛长度（D）、宽度（E）数据分析（标尺 5 μm，虚线框内为放大区域，标尺 2
μm），两组比较，P＜0.01， P＜0.001（n=200~250根纤毛）。
***
**
图4 OSBPL2介导RhoA/ROCK2信号通路影响小鼠耳蜗内毛细胞静纤毛形态
Figure 4 OSBPL2 affected stereociliary morphology on mouse cochlear inner hair cells via the mediation of RhoA/ROCK2
signaling pathway

结构域（OSBP⁃related ligand⁃binding domain），在固 白细胞骨架的调节中可能发挥着重要作用，并且可能
醇结合中发挥重要作用；OSBP/ORP 和囊泡相关膜 是通过Rho GTPase信号通路来实现的。
蛋白（vesicle associated membrane protein，VAP）相互 Rho GTPase 家族成员参与了多种以肌动蛋白
作用介导胞内的膜接触位点进行物质交换和信息 为基础的生物学过程 ［16］ ，包括细胞骨架重排，细胞
交流，从而维持细胞脂质的动态平衡 ［12］ ；OSBP/ORP 生长、分化、黏附、迁移等。RhoA 是 Rho GTPase 家
家族成员还参与了细胞骨架的调控过程，如 ORP3 族重要成员之一，在细胞微环境以及各种生长因子
可以调节 R⁃Ras 活性，进而调控 F⁃actin 的组装 ［13］ ， 的作用下，以GTP结合的活性形式与GDP结合的非
ORP4 可以调控波形蛋白（vimentin）介导微丝组装 活性形式发挥其分子开关的调控作用。RhoA 的下
过程 ［14］ 。OSBPL2（即ORP2）是OSBP/ORP 家族中唯 游主要效应物Rho激酶是一种丝氨酸/苏氨酸激酶，
一被发现与遗传性耳聋相关的基因，对其功能的研 有ROCK1和ROCK2两种亚型，在细胞骨架重组、细
究最初集中在脂质代谢和固醇转运方面。近年来 胞迁移和应力纤维形成等发面具有重要的调控作
有研究发现OSBPL2可作为特定信号通路的效应因 用 ［17］ 。当RhoA 的活性形式与ROCK 结合后，ROCK
子行使其特有的生物学功能 ［15］ 。在 HuH7 细胞中， 进入激活状态，调控 LIM 基序的 LIMK 的磷酸化 。
［18］
OSBPL2 是 AKT 信号通路的关键调控因子，同时也 LIMK 又能磷酸化 F⁃actin 并使其解聚活性失活，从
与多个 Rho GTPase 信号通路效应因子如 DIAPH1、 而导致肌动蛋白丝的稳定 ［19］ 。RhoA/ROCK 信号通
MLC12、SEPT9 等存在相互作用，从而影响细胞肌动 路及其效应因子在听力的发育和形成中也发挥着
蛋白骨架重塑、伪足和细胞极性形成、细胞迁移、细胞 重要作用 ［20］ 。有研究表明 ROCK2 是小鼠耳蜗内表
黏附和细胞周期 。在 Osbpl2⁃KO HEI⁃OC1 细胞中 达的主要亚型，噪音暴露可引起耳蜗中ROCK2的表
［7］
还发现了细胞黏附异常现象，且 FAK 信号通路受 达下调，引起耳蜗毛细胞肌动蛋白解聚，从而导致
到了抑制，而 FAK 正位于 Rho GTPase 信号通路的 听力下降 ［21］ 。此外，ADF/CFL⁃1 作为 LIMK1 下游磷
［9］
上游 。以上研究表明OSBPL2在听觉细胞肌动蛋 酸化的靶分子，定位于耳蜗毛细胞静纤毛的顶端，