Page 19 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第6期 江婧月，张红杰. 羟氯喹抑制MEK/ERK/ROS通路减少中性粒细胞胞外诱捕网形成改善葡聚糖硫酸钠
2023年6月 诱导的小鼠结肠炎［J］. 南京医科大学学报（自然科学版），2023，43（6）：756-763 ·761 ·

20 对照组 *** *** 炎症性肠病（inflammatory bowel disease，IBD）的治疗
（ % ） 15 LPS组 *** *** *** *** 有重要意义。
LPS+HCQ组
荧光强度改变率 10 5 * * ** 究热点，NET 是中性粒细胞通过释放染色质及
近年来，NET 在各类疾病中发挥的作用成为研

MPO、NE形成的纤维网状结构
［10］
。NET在系统性红
0 斑狼疮、类风湿性关节炎等免疫疾病中起着重要作
［11］
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 用。Dinallo 等 发现，与克罗恩病患者和健康对照
时间（min） 相比，UC患者结肠组织中NET 相关蛋白高表达，从
荧光酶标仪检测100 min内各组中性粒细胞ROS水平变化百分
UC 患者外周血中分离出的中性粒细胞对 LPS 和
比。3组之间比较，P < 0.01，P < 0.01， P < 0.001（n=3）。
*
**
***
TNF⁃α的反应增强，表现为 NET 形成增加。另有研
图4 HCQ抑制中性粒细胞ROS释放
Figure 4 HCQ reduces ROS release from neutrophils 究提示 NET 可导致肠道炎症 ［20］ 。本研究也表明，
LPS+HCQ+C16⁃PAF组 C
A B 对照组
LPS组
LPS+HCQ+C16⁃PAF组
对照组 LPS组 LPS+HCQ组 对照组 LPS组 LPS+HCQ组 （ % ） 20 LPS+HCQ组 *** *** *** ***

P⁃MEK 45 kDa P⁃MEK 45 kDa 15 *** ***
MEK 45 kDa MEK 45 kDa 10 * **
P⁃ERK 44/42 kDa P⁃ERK 44/42 kDa 荧光强度改变率 5 *
ERK 44/42 kDa ERK 44/42 kDa
0
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
时间（min）
A：通过蛋白质印迹检测各组中性粒细胞p⁃MEK、p⁃ERK表达水平；B：通过蛋白质印迹检测各组中性粒细胞p⁃MEK、p⁃ERK表达水平；C：荧
光酶标仪检测100 min内各组中性粒细胞ROS变化。4组之间比较，P < 0.01，P < 0.01， P < 0.001（n=3）。
**
***
*
图5 C16⁃PAF逆转HCQ 对MEK/ERK信号通路的抑制作用并促进ROS释放
Figure 5 C16⁃PAF reverses the inhibition of HCQ on MEK/ERK signaling pathway and promotes ROS release
A B
对照组 LPS组 LPS+HCQ组 LPS+HCQ+C16⁃PAF组
1.5 *
33342 * *

Hoechst 荧光强度比值 1.0

0.5

Sytox Green 0 对照组 LPS组
LPS+HCQ组
LPS+HCQ+C16⁃PAF组

Merge

A：免疫荧光检测各组中性粒细胞释放NET情况（×200），标尺=100 μm；B：荧光酶标仪定量检测各组中性粒细胞释放NET水平，两组比较，
P < 0.05（n=3）。
*
图6 C16⁃PAF增加HCQ处理后NET形成
Figure 6 C16⁃PAF increases the formation of NET after HCQ treatment