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第43卷第6期      扎西吉,张    赟,马凤美,等. 基于PKC/ERK通路探讨败酱总黄酮对缺氧缺血性脑病新生大鼠神经元
                  2023年6月               凋亡的影响[J]. 南京医科大学学报(自然科学版),2023,43(6):786-794                    ·791 ·


                                                   +
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                    表2 各组大鼠海马组织NeuN TUNEL 细胞数                     2.5 各组大鼠脑组织PKC/ERK通路相关蛋白的表达
                Table 2  The number of NeuN TUNEL cells in hippo⁃     与假手术组相比,模型组大鼠脑组织 p⁃PKC/
                                                 +
                                          +
                        campus of rats in each group  (x ± s,n=12)  PKC、p⁃ERK1/2/ERK1/2的比值显著降低(P<0.05);与
                                                    +
                                                NeuN TUNEL +      模型组相比,败酱总黄酮低、高剂量组大鼠脑组织
                          组别
                                              阳性细胞数/视野
                                                                  p⁃PKC/PKC、p⁃ERK1/2/ERK1/2 的比值显著升高(P<
                  假手术组                         02.35 ± 0.28 *#△▲
                                                                  0.05),而白屈菜红碱组大鼠脑组织 p⁃PKC/PKC、
                  模型组                          09.82 ± 1.04 *#△▲
                                                                  p⁃ERK1/2/ERK1/2的比值显著降低(P<0.05);与白屈
                  白屈菜红碱组                       12.43 ± 1.17 *#△▲
                  败酱总黄酮低剂量组                    07.65 ± 0.81 *#△▲▲  菜红碱组相比,败酱总黄酮+白屈菜红碱组大鼠脑
                  败酱总黄酮高剂量组                    05.23 ± 0.69 *#△△▲  组织 p⁃PKC/PKC、p⁃ERK1/2/ERK1/2 的比值显著升高
                  败酱总黄酮+白屈菜红碱组                 07.41 ± 0.85 *#△▲  (P<0.05);与败酱总黄酮高剂量组相比,败酱总黄
                   与假手术组相比,P<0.05;与模型组相比,P<0.05;与白屈菜              酮低剂量组和败酱总黄酮+白屈菜红碱组大鼠脑组
                               *
                                                #
                红碱组相比,P<0.05;与败酱总黄酮高剂量组相比,P<0.05。
                         △
                                                    ▲
                                                                  织p⁃PKC/PKC、p⁃ERK1/2/ERK1/2的比值显著降低(P<
               (P<0.05);与模型组相比,败酱总黄酮低、高剂量组                        0.05,图4)。
                大鼠脑组织 Bax、Caspase⁃3 的表达显著降低,Bcl⁃2                 2.6 败酱总黄酮对原代海马神经元细胞毒性的影响
                的表达显著升高(P<0.05),而白屈菜红碱组大鼠脑                            海 马 神 经 元 用 不 同 浓 度(0、5、10、20、40、
                组织 Bax、Caspase⁃3 的表达显著升高,Bcl⁃2 的表达                80 μmol/L)的败酱总黄酮处理 24 h。CCK⁃8 结果显
                显著降低(P<0.05);与白屈菜红碱组相比,败酱总黄                       示,与对照组相比,用 5、10、20、40、80 μmol/L 败酱
                酮+白屈菜红碱组大鼠脑组织 Bax、Caspase3 的表达                    总 黄 酮 处 理 对 细 胞 存 活 率 没 有 明 显 影 响(P>
                显著降低,Bcl⁃2的表达显著升高(P<0.05);与败酱                     0.05,图 5)。
                总黄酮高剂量组相比,败酱总黄酮低剂量组和败酱总                           2.7  败酱总黄酮对 OGD/R 诱导的原代海马神经元
                黄酮+白屈菜红碱组大鼠脑组织Bax、Caspase⁃3的表                     细胞活力的影响
                达显著升高,Bcl⁃2的表达显著降低(P<0.05,图3)。                        与对照组相比,OGD/R 组海马神经元细胞活力


                A                           B                      C                      D
                       1  2  3  4  5  6        1.5                                           1.5
                                               Bcl⁃2相对表达量     #                      #      Caspase⁃3相对表达量  #
                   Bcl⁃2               26 kDa                         0.8      #                    *  #
                                                                      0.6
                    Bax                21 kDa  1.0                   Bax相对表达量 1.0  *  #▲  #△▲  1.0      #▲   #△▲
                Caspase⁃3              34 kDa  0.5    *  #  #▲  #△▲   0.4                    0.5
                 GAPDH                 36 kDa                         0.2
                                                 0                      0                     0
                                                   1  2  3  4  5  6       1  2  3  4  5  6       1  2  3  4  5  6
                   A:Western blot检测各组蛋白表达;B:各组Bcl⁃2蛋白表达的半定量分析结果;C:各组Bax蛋白表达的半定量分析结果;D:各组Caspase⁃3
                蛋白表达的半定量分析结果。1:假手术组;2:模型组;3:白屈菜红碱组;4:败酱总黄酮低剂量组;5:败酱总黄酮高剂量组;6:败酱总黄酮+白屈菜红
                碱组。与假手术组相比,P<0.05;与模型组相比,P<0.05;与白屈菜红碱组相比,P<0.05;与败酱总黄酮高剂量组相比,P<0.05(n=12)。
                                                #
                                                                                                ▲
                                                                      △
                                *
                                           图3 各组大鼠脑组织Bcl⁃2、Bax、Caspase⁃3蛋白表达
                           Figure 3 Expression of Bcl⁃2,Bax and Caspase⁃3 proteins in brain tissue of rats in each group
                A                                  B                              C
                         1   2  3  4   5  6            1.0                             1.5
                   p⁃PKC                     75 kDa    0.8
                     PKC                     75 kDa    0.6                #            1.0               #
                                             44 kDa   p⁃PKC/PKC蛋白相对表达量  *  #▲  #△▲  p⁃ERK1/2/ERK1/2  蛋白相对表达量  #△▲
                  p⁃ERK1/2                             0.4                                           #▲
                                             42 kDa                #                   0.5     *
                                             44 kDa    0.2                                         #
                   ERK1/2
                                             42 kDa
                  GAPDH                      36 kDa     0   1  2   3  4   5  6          0  1   2  3   4  5   6
                   A:Western blot检测各组PKC/ERK通路相关蛋白表达;B:各组p⁃PKC/PKC相对表达量;C:各组p⁃ERK1/2/ERK1/2相对表达量。1:假手术组;
                2:模型组;3:白屈菜红碱组;4:败酱总黄酮低剂量组;5:败酱总黄酮高剂量组;6:败酱总黄酮+白屈菜红碱组。与假手术组相比,P<0.05;与模
                                                                                                      *
                型组相比,P<0.05;与白屈菜红碱组相比,P<0.05;与败酱总黄酮高剂量组相比,P<0.05(n=12)。
                                                                        ▲
                       #
                                             △
                                            图4  各组大鼠脑组织PKC/ERK通路相关蛋白表达
                           Figure 4  Expression of PKC/ERK pathway⁃related proteins in brain tissue of rats in each group
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