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南京医科大学学报（自然科学版） 第43卷第6期
·786 · Journal of Nanjing Medical University（Natural Sciences） 2023年6月

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·基础研究·基础研究·
基于PKC/ERK 通路探讨败酱总黄酮对缺氧缺血性脑病新生大

鼠神经元凋亡的影响

扎西吉，张 赟，马凤美，王正岭

青海省妇女儿童医院新生儿科，青海 西宁 810000

［摘 要］ 目的：探究败酱总黄酮对缺氧缺血性脑病（hypoxic⁃ischemic encephalopathy，HIE）新生大鼠海马神经元凋亡的影响
及其作用机制。方法：72只新生大鼠分为假手术组、模型组、白屈菜红碱组（5 mg/kg）、败酱总黄酮低剂量组（50 mg/kg）、败酱总
黄酮高剂量组（100 mg/kg）、败酱总黄酮+白屈菜红碱组（100 mg/kg败酱总黄酮+5 mg/kg白屈菜红碱），每组12只。采用结扎右
颈总动脉和低氧处理2.5 h的方法构建HIE模型。白屈菜红碱组大鼠腹腔注射白屈菜红碱，败酱总黄酮各剂量组灌胃相应剂
量的败酱总黄酮，败酱总黄酮+白屈菜红碱组大鼠在灌胃败酱总黄酮的同时腹腔注射白屈菜红碱，1次/d，连续给药7 d。通过
神经功能缺损评分检测大鼠神经功能；苏木精⁃伊红（hematoxylin⁃eosin staining，HE）染色观察脑组织海马区病理学变化；原位
末端转移酶标记（TdT⁃mediated dUTP nick end labeling，TUNEL）/神经特异核蛋白（neuronal nuclei antigen，NeuN）荧光双染观察
海马神经元凋亡；Western blot检测脑组织蛋白激酶C（protein kinase C，PKC）/细胞外信号调节激酶（extracellular signal⁃regulated
kinase，ERK）通路及凋亡相关蛋白的表达。采用氧⁃葡萄糖剥夺/再灌注（oxygen⁃glucose deprivation/reperfusion，OGD/R）构建细
胞模型，进行CCK⁃8实验和乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）测定，以分析败酱总黄酮对原代海马神经元的神经保护作
用，并采用流式细胞仪分析细胞凋亡，Western blot检测凋亡相关蛋白的表达。结果：与假手术组相比，模型组大鼠出现不同程
+
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度的神经功能缺损现象，神经功能缺损评分和NeuN TUNEL 细胞数、脑组织Bax及Caspase⁃3表达显著增加，Bcl⁃2表达、p⁃PKC/
PKC、p⁃ERK1/2/ERK1/2的比值显著降低（P＜0.05），海马CA1区神经元肿胀、数量减少；与模型组相比，败酱总黄酮低、高剂量组
+ +
神经功能改善，神经功能缺损评分和 NeuN TUNEL 细胞数、脑组织 Bax 及 Caspase⁃3 表达显著降低，Bcl⁃2 表达、p⁃PKC/
PKC、p⁃ERK1/2/ERK1/2的比值显著增加（P＜0.05），海马CA1区神经元密度增加；且在败酱总黄酮干预的基础上联用白屈菜红碱
可显著削弱败酱总黄酮对HIE后海马神经元凋亡的抑制作用。体外细胞实验中，败酱总黄酮显著增加OGD/R损伤后的细胞
活力，逆转神经元损伤并减少海马神经元细胞凋亡，同时增加了海马神经元p⁃PKC/PKC、p⁃ERK1/2/ERK1/2的比值（P＜0.05），在
OGD/R诱导的原代海马神经元中验证了败酱总黄酮对PKC/ERK通路的激活。结论：败酱总黄酮可抑制HIE新生大鼠海马神
经元凋亡，其作用机制可能与激活PKC/ERK通路有关。
［关键词］ 败酱总黄酮；缺氧缺血性脑病；神经元凋亡；蛋白激酶C；细胞外信号调节激酶

［中图分类号］ R722.12 ［文献标志码］ A ［文章编号］ 1007⁃4368（2023）06⁃786⁃09
doi：10.7655/NYDXBNS20230606

Exploring the effect of total flavonoids of patriniae radix on neuronal apoptosis in neonatal
rats with hypoxic⁃ischemic encephalopathy based on PKC/ERK pathway

ZHA Xiji，ZHANG Yun，MA Fengmei，WANG Zhengling
Department of Neonatology，Qinghai Women’s and Children’s Hospital，Xining 810000，China

［Abstract］ Objective：This study aims to explore the effect and mechanism of total flavonoids of patriniae radix on hippocampal
neuron apoptosis in neonatal rats with hypoxic⁃ischemic encephalopathy（HIE）. Methods：Seventy⁃two neonatal rats were divided into
sham operation group，model group，chelerythrine group（5 mg/kg），and total flavonoids of patriniae radix low⁃（50 mg/kg）and high⁃
（100 mg/kg）dose groups，total flavonoids of patriniae radix + chelerythrine group（100 mg/kg total flavonoids of patriniae radix+5 mg/kg
chelerythrine），with 12 rats in each group. The HIE model was constructed by ligating the right common carotid artery and hypoxic
treatment for 2.5 h. Rats in the chelerythrine group were intraperitoneally injected with chelerythrine，and the total flavonoids of
patriniae radix groups were given the corresponding doses of total flavonoids of patriniae radix by gavage. Rats in the total flavonoids of
patriniae radix + chelerythrine group were injected intraperitoneally with chelerythrine while giving total flavonoids of patriniae radix