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第43卷第6期
               ·792 ·                            南 京    医 科 大 学 学         报                        2023年6月


                       150                                      性显著降低(P<0.05);与败酱总黄酮组相比,败酱
                      ( % )  100                                总黄酮+白屈菜红碱组 LDH 活性显著升高(P<
                                                                0.05,表3)。
                      细胞存活率  50                                      表3 各组LDH活性和海马神经元凋亡率比较


                                                                 Table 3  Comparison of LDH activity and apoptosis rate
                        0                                                of hippocampal neurons in each group
                           对照组 5     10  20  40  80                                                (x ± s,n=6)
                                   败酱总黄酮(μmol/L)                                                    海马神经元
              图5 败酱总黄酮对原代海马神经元细胞毒性的影响(n=6)                               组别            LDH活性(U/L)
              Figure 5  The effect of total flavonoids of patriniae radix                            凋亡率(%)
                       on the cytotoxicity of primary hippocampal neu⁃  对照组            051.42 ± 7.66  04.92 ± 0.55
                                                                 OGD/R组                130.85 ± 11.39 *  27.76 ± 3.40 *
                       rons(n=6)
                                                                 败酱总黄酮组                080.65 ± 10.17 *#  10.83 ± 1.45 *#
              显著降低(P<0.05);与 OGD/R 组相比,败酱总黄酮                     败酱总黄酮+白屈菜红碱组 121.53 ± 11.49     *△  25.02 ± 2.61 *△
                                                                    与对照组相比,P<0.05;与OGD/R组相比,P<0.05;与败酱总
                                                                                                 #
                                                                              *
             (10、20、40、80 μmol/L)组细胞活力显著增加(P<
                                                                 黄酮组相比,P<0.05。
                                                                         △
              0.05,图6)。由于20 μmol/L败酱总黄酮的神经保护
              作用最大,因此以该浓度用于随后的体外研究。                             2.9  各组海马神经元凋亡率
                                                                     与对照组相比,OGD/R 组海马神经元凋亡率显
                           150
                                                                著升高(P<0.05);与 OGD/R 组相比,败酱总黄酮组
                          ( % )  100           #                海马神经元凋亡率显著降低(P<0.05);与败酱总黄
                                                                酮组相比,败酱总黄酮+白屈菜红碱组海马神经元
                          细胞存活率  50  *     #       #  #         凋亡率显著升高(P<0.05,表3、图7)。

                                                                2.10 各组海马神经元PKC/ERK通路相关蛋白表达
                                                                     与对照组相比,OGD/R 组海马神经元 p⁃PKC/
                             0
                          OGD/R -   +   +  +   +   +  +         PKC、p⁃ERK1/2/ERK1/2 比值显著降低(P<0.05);与
                 败酱总黄酮(μmol/L) 0    0   5  10  20  40  80       OGD/R组相比,败酱总黄酮组p⁃PKC/PKC、p⁃ERK1/2/
                 与对照组相比,P<0.05;与OGD/R组相比,P<0.05(n=6)。           ERK1/2比值显著升高(P<0.05);与败酱总黄酮组相
                                              #
                           *
              图6   败酱总黄酮对OGD/R诱导的原代海马神经元细胞活
                                                                比,败酱总黄酮+白屈菜红碱组p⁃PKC/PKC、p⁃ERK1/2/
                   力的影响
              Figure 6  The effect of total flavonoids of patriniae radix  ERK1/2比值显著降低(P<0.05,图8)。
                       on the viability of primary hippocampal neu⁃
                                                                3  讨 论
                       rons induced by OGD/R
                                                                     神经元凋亡是HIE后的主要病理过程,新生儿的
              2.8  各组海马神经元LDH活性                                 大脑可能比成人更容易受到这种影响                  [13] 。据报道,
                  与对照组相比,OGD/R 组 LDH 活性显著升高                     在经历HIE后死亡儿童的大脑切片以及经受缺氧缺
             (P<0.05);与OGD/R组相比,败酱总黄酮组LDH活                      血的大鼠大脑中Caspase⁃3活化均增加 。本研究通
                                                                                                 [14]
                          对照组                    OGD/R组                 败酱总黄酮组             败酱总黄酮+白屈菜红碱组
                 10 6                    10 6                    10 6                    10 6

                 10 5                    10 5                    10 5                    10 5
                PI                      PI                      PI                       PI
                 10 4                    10 4                    10 4                    10 4
                 10 3                    10 3                    10 3                    10 3

                     10 3  10 4  10 5  10 6  10 3  10 4  10 5  10 6  10 3  10 4  10 5  10 6  10 3  10 4  10 5  10 6
                       Annexin V⁃FITC          Annexin V⁃FITC          Annexin V⁃FITC          Annexin V⁃FITC
                                             图7   流式细胞术检测各组海马神经元凋亡
                             Figure 7  Apoptosis of hippocampal neurons in each group detected by flow cytometry
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