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第44卷第10期 杨雨欣,刘晨阳,金琳羚,等. 利拉鲁肽对二氧化硅诱导巨噬细胞极化的影响及机制[J].
2024年10月 南京医科大学学报(自然科学版),2024,44(10):1353-1361 ·1357 ·
- + + + + ### 2.5
SiO2 2.5
Li(nmol/L) - - 10 100 1 000 2.0 * 2.0 ###
NLRP3/β⁃actin *
NLRP3 118 kDa 1.5 p20/β⁃actin 1.5 *
β⁃actin 42 kDa 1.0 * 1.0 * *
Caspase⁃1 p20 20 kDa 0.5 Caspase⁃1 0.5
β⁃actin 42 kDa 0 0
SiO2 - + + + + SiO2 - + + + +
Li(nmol/L) - - 10 100 1 000 Li(nmol/L) - - 10 100 1 000
A:The expression levels of NLRP3 and Caspase⁃1 p20 were debermined by Weatern blotting. B,C:Quantitative analysis of the expression levels of
*
###
NLRP3(B)and Caspase⁃1 p20(C). Compared with the control group, P < 0.001;compared with the SiO 2 group,P < 0.05(n=3).
图3 Li对SiO2诱导巨噬细胞中NLRP3活化的影响
Figure 3 Effects of Li on the activation of NLRP3 inflammasome in macrophages induced by SiO 2
SiO2组TGF⁃β1水平为(854.60±98.00)pg/mL,较 308.00±89.20 pg/mL,较 SiO2组明显降低,差异有统
Control组(268.40±19.29)pg/mL明显增加,差异具有 计学意义(P < 0.01,P < 0.001,P < 0.001,图4C)。
统计学意义(P < 0.001);SiO2+Li(10 nmol/L)组、 以上结果提示 Li(10、100、1000 nmol/L)可浓度
SiO2+Li(100 nmol/L)组及 SiO2+Li(1 000 nmol/L)组 依赖性抑制 SiO2诱导的细胞上清中 IL⁃1β、IL⁃10 及
TGF⁃β1 水平(分别为 511.20±66.53、386.70±32.30、 TGF⁃β1分泌。
A ### B 250 C ###
150 200 ### 1 000
(pg/mL) 100 * * (pg/mL) 150 *** *** *** (pg/mL) 500 ** *** ***
IL1⁃β 50 *** IL⁃10 100 TGF⁃β1
50
0
0 0
- + + + +
SiO2 - + + + + SiO2 SiO2 - + + + +
Li(nmol/L) - - 10 100 1 000 Li(nmol/L) - - 10 100 1 000 Li(nmol/L) - - 10 100 1 000
###
The levels of IL⁃1β(A),IL⁃10(B)and TGF⁃β1(C)in the cell supernatant were quantified by using ELISA. Compared with the control group, P <
*
**
0.001;compared with the SiO 2 group,P < 0.05,P < 0.01,and *** P < 0.001(n=4).
图4 Li对SiO2诱导巨噬细胞中IL⁃1β、IL⁃10及TGF⁃β1分泌的影响
Figure 4 Effects of liraglutide on the secretion of IL⁃1β,IL⁃10 and TGF⁃β1 in macrophages induced by SiO 2
2.5 Li对巨噬细胞Arg⁃1表达的影响 SiO2 - + + + +
Li(nmol/L) - - 10 100 1 000
与Control组相比,SiO2组细胞中Arg⁃1蛋白表达 Arg⁃1 36 kDa
水平显著升高(P < 0.001)。与 SiO2组相比,SiO2+Li β⁃actin 42 kDa
(10 nmol/L)组、SiO2+Li(100 nmol/L)组及 SiO2+Li 3
###
(1 000 nmol/L)组 Arg⁃1 表达水平降低,差异有统计 *
学意义(P均 < 0.05,图5)。以上结果提示Li(10、100、 Arg⁃1/β⁃actin 2 * *
1 000 nmol/L)可浓度依赖性抑制 SiO2诱导的 Arg⁃1 1
蛋白表达。
2.6 Li对巨噬细胞线粒体膜电位的影响 0
SiO2 - + + + +
与 Control 组相比,在 SiO2处理的巨噬细胞中, Li(nmol/L) - - 10 100 1 000
JC⁃1 红色荧光强度明显减弱,绿色荧光强度增 Western blot was used to detect the expression of Arg⁃1. Compared
with the control group, P < 0.001;compared with the SiO 2 group,
###
强 ,提 示 线 粒 体 膜 电 位 下 降 。 与 SiO2 组 相 比 ,
*
P < 0.05(n=4).
SiO2+Li(10 nmol/L)组、SiO2+Li(100 nmol/L)组及 图5 Li对SiO2诱导巨噬细胞极化的影响
SiO2+Li(1 000 nmol/L)线粒体内红色荧光逐渐增强、 Figure 5 Effects of liraglutide on the polarization in macro⁃
绿色荧光逐渐降低,提示 Li(10、100、1 000 nmol/L) phages induced by SiO 2