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第44卷第10期           杨雨欣,刘晨阳,金琳羚,等. 利拉鲁肽对二氧化硅诱导巨噬细胞极化的影响及机制[J].
                 2024年10月                    南京医科大学学报(自然科学版),2024,44(10):1353-1361                      ·1357 ·


                             -  +   +  +   +                       ###                   2.5
                         SiO2                              2.5
                    Li(nmol/L)  -  -  10 100 1 000         2.0         *                 2.0    ###
                                                           NLRP3/β⁃actin  *
                       NLRP3                 118 kDa       1.5                          p20/β⁃actin  1.5  *
                       β⁃actin               42 kDa        1.0                *          1.0            *  *
                  Caspase⁃1 p20              20 kDa        0.5                          Caspase⁃1  0.5
                       β⁃actin               42 kDa          0                            0
                                                            SiO2  -  +  +  +  +          SiO2  -  +  +  +  +
                                                       Li(nmol/L)  -  -  10 100 1 000  Li(nmol/L) -  -  10 100 1 000
                   A:The expression levels of NLRP3 and Caspase⁃1 p20 were debermined by Weatern blotting. B,C:Quantitative analysis of the expression levels of
                                                                                        *
                                                            ###
                NLRP3(B)and Caspase⁃1 p20(C). Compared with the control group, P < 0.001;compared with the SiO 2 group,P < 0.05(n=3).
                                            图3 Li对SiO2诱导巨噬细胞中NLRP3活化的影响
                          Figure 3 Effects of Li on the activation of NLRP3 inflammasome in macrophages induced by SiO 2

                    SiO2组TGF⁃β1水平为(854.60±98.00)pg/mL,较           308.00±89.20 pg/mL,较 SiO2组明显降低,差异有统
                Control组(268.40±19.29)pg/mL明显增加,差异具有              计学意义(P < 0.01,P < 0.001,P < 0.001,图4C)。
                统计学意义(P < 0.001);SiO2+Li(10 nmol/L)组、                 以上结果提示 Li(10、100、1000 nmol/L)可浓度
                SiO2+Li(100 nmol/L)组及 SiO2+Li(1 000 nmol/L)组      依赖性抑制 SiO2诱导的细胞上清中 IL⁃1β、IL⁃10 及
                TGF⁃β1 水平(分别为 511.20±66.53、386.70±32.30、          TGF⁃β1分泌。


                   A            ###               B      250                      C             ###
                         150                             200    ###                    1 000
                        (pg/mL)  100  *  *              (pg/mL)  150  ***  ***  ***   (pg/mL)  500  **  *** ***


                        IL1⁃β  50         ***           IL⁃10  100                    TGF⁃β1
                                                         50
                                                          0
                          0                                                               0
                                                             -   +  +   +  +
                         SiO2  -  +  +  +  +             SiO2                            SiO2  -  +  +  +  +
                     Li(nmol/L)  -  -  10 100 1 000  Li(nmol/L)  -  -  10 100 1 000  Li(nmol/L) -  -  10 100 1 000
                                                                                                             ###
                   The levels of IL⁃1β(A),IL⁃10(B)and TGF⁃β1(C)in the cell supernatant were quantified by using ELISA. Compared with the control group, P <
                                        *
                                              **
                0.001;compared with the SiO 2 group,P < 0.05,P < 0.01,and  *** P < 0.001(n=4).
                                      图4 Li对SiO2诱导巨噬细胞中IL⁃1β、IL⁃10及TGF⁃β1分泌的影响
                      Figure 4 Effects of liraglutide on the secretion of IL⁃1β,IL⁃10 and TGF⁃β1 in macrophages induced by SiO 2

                2.5  Li对巨噬细胞Arg⁃1表达的影响                                         SiO2 -  +  +  +   +
                                                                          Li(nmol/L) -  -  10 100 1 000
                    与Control组相比,SiO2组细胞中Arg⁃1蛋白表达                             Arg⁃1                36 kDa
                水平显著升高(P < 0.001)。与 SiO2组相比,SiO2+Li                          β⁃actin               42 kDa
               (10 nmol/L)组、SiO2+Li(100 nmol/L)组及 SiO2+Li                          3
                                                                                        ###
               (1 000 nmol/L)组 Arg⁃1 表达水平降低,差异有统计                                            *
                学意义(P均 < 0.05,图5)。以上结果提示Li(10、100、                                Arg⁃1/β⁃actin  2  *  *

                1 000 nmol/L)可浓度依赖性抑制 SiO2诱导的 Arg⁃1                                1
                蛋白表达。

                2.6  Li对巨噬细胞线粒体膜电位的影响                                              0
                                                                                 SiO2  -  +  +  +  +
                    与 Control 组相比,在 SiO2处理的巨噬细胞中,                            Li(nmol/L) -  -  10 100 1 000
                JC⁃1 红色荧光强度明显减弱,绿色荧光强度增                              Western blot was used to detect the expression of Arg⁃1. Compared
                                                                  with the control group, P < 0.001;compared with the SiO 2 group,
                                                                                  ###
                强 ,提 示 线 粒 体 膜 电 位 下 降 。 与 SiO2 组 相 比 ,
                                                                  *
                                                                   P < 0.05(n=4).
                SiO2+Li(10 nmol/L)组、SiO2+Li(100 nmol/L)组及                图5 Li对SiO2诱导巨噬细胞极化的影响
                SiO2+Li(1 000 nmol/L)线粒体内红色荧光逐渐增强、                Figure 5  Effects of liraglutide on the polarization in macro⁃
                绿色荧光逐渐降低,提示 Li(10、100、1 000 nmol/L)                       phages induced by SiO 2
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