Page 23 - 南京医科大学学报自然科学版

第44卷第3期 南京医科大学学报（自然科学版）
2024年3月 Journal of Nanjing Medical University（Natural Sciences） ·313 ·

·基础研究·

神经肽Y/Y1受体激活β⁃catenin信号通路介导心肌细胞损伤

胡 君，戴 丽，陈 霞，任志欣，钱炳俊 *
江苏医药职业学院公共卫生与管理学院，江苏 盐城 224005

［摘 要］ 目的：研究神经肽Y（neuropeptide Y，NPY）/Y1受体信号转导在心肌细胞损伤中的作用及机制。方法：C57BL/6J小
鼠皮下注射异丙肾上腺素（isoprenaline，ISO）构建心肌损伤模型，腹腔注射Y1受体特异性拮抗剂BIBO3304干预。小鼠随机分
为对照组（生理盐水）、ISO组［20 mg/（kg·d）ISO］、BIBO3304+ISO组［0.1 mg/（kg·d）BIBO3304+20 mg/（kg·d）ISO］、BIBO3304组
［0.1 mg/（kg·d）BIBO3304］，每组10只，连续给药14 d。实时定量PCR和Western blot检测小鼠心肌组织中NPY表达。HE染色
和Masson染色观察各组小鼠心肌纤维结构变化和纤维化程度；定量PCR检测小鼠心肌肥大基因心房钠尿肽（atrial natriuretic
peptide，ANP）、β⁃肌球蛋白重链（β⁃myosin heavy chain，β⁃MHC）mRNA表达。采用Y1受体特异性激活剂［Leu31，Pro34］⁃NPY刺激
H9C2 细胞，检测 ANP、β⁃MHC mRNA 表达；CCK⁃8 检测心肌细胞活力。Western blot 检测各组小鼠心肌组织和 H9C2 细胞中
active β⁃catenin、磷酸化糖原合成酶激酶⁃3β（phospho⁃glycogen synthesis kinase 3β，p⁃GSK3β）、总糖原合成酶激酶⁃3β（total glyco⁃
gen synthesis kinase 3β，t⁃GSK3β）蛋白表达。免疫荧光染色检测心肌细胞β⁃catenin 入核情况。利用β⁃catenin 特异性抑制剂
ICG001处理细胞，检测［Leu31，Pro34］⁃NPY诱导的心肌细胞肥大和细胞活力变化。结果：与对照组比较，ISO组小鼠心肌组织
NPY mRNA 和蛋白表达均显著增加（P < 0.05），心肌纤维排列紊乱，心肌纤维化程度高，心肌肥大基因表达增加。与 ISO
组比较，BIBO3304+ISO组小鼠心肌损伤和纤维化得到有效缓解，心肌肥大基因表达下降（P < 0.01）。与对照组比较，［Leu31，
Pro34］⁃NPY 增加 H9C2 细胞 ANP、β⁃MHC mRNA 表达，降低心肌细胞活力（P < 0.01）。与对照组比较，ISO 组小鼠心肌组织
active β⁃catenin、p⁃GSK3β表达明显上调，p⁃GSK3β/t⁃GSK3β增加；与 ISO 组比较，BIBO3304+ISO 组心肌组织 active β⁃catenin、
p⁃GSK3β表达降低（P < 0.05）。与对照组比较，［Leu31，Pro34］⁃NPY 显著增加心肌细胞 active β⁃catenin、p⁃GSK3β表达（P <
0.05），促进细胞核β⁃catenin 积累。与［Leu31，Pro34］⁃NPY 组比较，BIBO3304 抑制细胞核β⁃catenin 表达，ICG001 显著缓解
［Leu31，Pro34］⁃NPY诱导的心肌细胞肥大和细胞活力下降（P < 0.01）。结论：NPY通过Y1受体转导激活β⁃catenin信号通路介
导心肌细胞损伤和心肌纤维化。
［关键词］ NPY/Y1受体；β⁃catenin信号通路；心肌损伤；心肌纤维化
［中图分类号］ R541.78 ［文献标志码］ A ［文章编号］ 1007⁃4368（2024）03⁃313⁃09
doi：10.7655/NYDXBNSN230692

Neuropeptide Y/Y1 receptor activiation mediates cardiomyocyte injury through β⁃catenin

signaling pathway
*
HU Jun，DAI Li，CHEN Xia，REN Zhixin，QIAN Bingjun
School of Public Health and Management，Jiangsu Vocational College of Medicine，Yancheng 224005，China

［Abstract］ Objective：To explore the effect and mechanism of neuropeptide Y（NPY）/Y1 receptor signaling in myocardial injury.
Methods：The C57BL/6J mice model of cardiac injury was established by subcutaneous injection with isoproterenol（ISO），which was
subsequently treated with the specific NPY/Y1 receptor antagonist BIBO3304 by intraperitoneal injection. C57BL/6J mice were
randomly divided into 4 groups：control group（Saline），ISO group［20 mg/（kg · d）ISO］，BIBO3304 + ISO group［0.1 mg/（kg · d）
BIBO3304+20 mg/（kg·d）ISO］，and BIBO3304 group［0.1 mg/（kg·d）BIBO3304］. All the drug was administered continuously for 14
days. The expression of NPY mRNA and protein in the heart of mice were detected by qPCR and Western blot，respectively. The
change of myocardial fiber structure and myocardial fibrosis were observed by HE and Masson staining. Levels of cardiac hypertrophy

［基金项目］ 江苏省高等学校自然科学研究项目（20KJB310029，21KJB310012）；盐城市科技计划项目（YCBK2023030）；江苏
医药职业学院高层次人才科研启动项目（20200026）
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通信作者（Corresponding author），E⁃mail：bjqianfd@jsmc.edu.cn