Page 104 - 南京医科大学自然版
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第44卷第4期
·542 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2024年4月
准。 Wang 等 ［74］ 认为 ITC 能够提供传统生化测定难 测模型综述［J］. 广州大学学报（自然科学版），2023，22
以获得的酶活性信息，并使用 ITC 来测量酶抑制剂 （1）：25-32
的强度、结合模式、缔合和解离动力学。 ［3］ HAN R C，LIANG L，QIN T，et al. Encephalomyocarditis
2.5 微量热泳动（microscale thermophoresis，MST） virus 2A protein inhibited apoptosis by interaction with
annexin A2 through JNK/c ⁃ Jun pathway［J］. Viruses，
MST 是一种表征生物分子特性的光学方法，反
2022，14（2）：359
映粒子在微观温度梯度中的定向运动 ［75］ 。MST 检
［4］ SUN N，QIN Y J，XU C，et al. Design of fast⁃onset antide⁃
测设备由 Nano Temper 公司发明，其工作原理是生
pressant by dissociating SERT from nNOS in the DRN［J］.
物分子在毛细管中发生热泳动现象，发生相互作用
Science，2022，378（6618）：390-398
的生物分子的水化层、分子大小、电荷等性质发生
［5］ ELZEFZAFY W M，HUSSIEN M，MOHMMED Z A Z，et
改变，进而引起反应体系中荧光分布的变化，以检测
al. The diagnostic value of Golgi protien ⁃ 73 and DICK⁃
相互作用的生物分子间的亲和性 。MST允许使用 KOPF⁃1 in hepatocellular carcinoma［J］. J Immunoassay
［76］
［77］
非常小的样本量（微升范围）进行高通量筛选 。热 Immunochem，2021，42（2）：174-187
泳动对分子属性的微小变化十分敏感，适合于蛋白 ［6］ SOJKA S，AMIN N M，GIBBS D，et al. Congenital heart
质、核酸、小分子和离子等多种物质的相互作用研 disease protein 5 associates with CASZ1 to maintain myo⁃
究 ［78］ 。Asmari 等 ［79］ 通过 MST 技术测定铁螯合药物 cardial tissue integrity［J］. Development，2014，141（15）：
与乳铁蛋白的结合亲和力，预测母乳中铁螯合药物 3040-3049
的分泌。 ［7］ FIELDS S，SONG O. A novel genetic system to detect pro⁃
tein⁃protein interactions［J］. Nature，1989，340（6230）：
3 基于生物信息学的研究方法 245-246
［8］ CHEN Q，WEI T Y. Membrane and nuclear yeast two⁃hy⁃
蛋白质相互作用错综复杂，形成巨大的 PPI 网
brid systems［J］. Methods Mol Biol，2022，2400：93-104
络，将生物信息学技术运用在 PPI 检测中非常重 ［9］ 沈 竹，曹勤红. 酵母双杂交及其衍生技术应用研究进
要。Chen 等 ［80］ 提出了一种基于序列的新型计算方 展［J］. 农业生物技术学报，2022，30（12）：2425-2433
法，称为 DCSE（Double Channel⁃Siamese⁃Ensemble） ［10］JIA Y，KOWALSKI P，LOPEZ I. Using yeast two⁃hybrid
来预测潜在的PPI。胡嘉伦等 ［81］ 采用计算机模拟的 system and molecular dynamics simulation to detect ven⁃
方法，对 2 类皂苷（达玛烷型皂苷和齐墩果型皂苷） om protein ⁃ protein interactions［J］. Curr Res Toxicol，
和α⁃乳白蛋白的相互作用进行研究，并获得其相互 2021，2：93-98
作用模式的相关图像。 ［11］SUN Z J，SUN Y H，LI Y M，et al. Identification of HeLa
cell proteins that interact with Chlamydia trachomatis gly⁃
4 总结与展望 cogen synthase using yeast two ⁃ hybrid assays［J］. Mol
Med Rep，2020，21（3）：1572-1580
PPI 研究方法根据原理大致可分为以下 3 种：
［12］SHI K Y，YANG L L，ZHUANG X Q，et al. Yeast two⁃hy⁃
①通过抗体或添加表位标签亲和纯化，得到诱饵蛋
brid screen identifies PKA⁃riα interacting proteins during
白与猎物蛋白的蛋白复合物，再经过免疫蛋白印迹
mouse spermiogenesis［J］. Genes，2021，12（12）：1941
或质谱分析得到猎物蛋白的信息；②通过基因工程
［13］OMAGARI R，YAGISHITA M，SHIRAISHI F，et al. Eva⁃
等手段加入报告基因或荧光信号，表征PPI的发生；
luation of human thyroid hormone receptor⁃antagonist ac⁃
③通过检测发生相互作用的蛋白质分子的光学信 tivity in 691 chemical compounds using a yeast two⁃hy⁃
号、热力学变化、电荷改变等的函数变化来表征 brid assay with Saccharomyces cerevisiae Y190［J］. Data
PPI。本文介绍的几种方法各有优势与不足，不同的 Brief，2022，42：108303
方法可互为验证，互为补充。相信随着现代技术的 ［14］HEINTZ V J，WANG L，LACOUNT D J. NanoLuc lucifer⁃
不断发展，会产生更先进、准确的 PPI 研究方法，为 ase as a quantitative yeast two⁃hybrid reporter［J］. FEMS
人类探索生命奥秘提供更先进的工具。 Yeast Res，2022，21（8）：foab069
［15］SHIVHARE D，MUSIALAK⁃LANGE M，JULCA I，et al.
［参考文献］
Removing auto⁃activators from yeast⁃two⁃hybrid assays by
［1］ 孙 宇，贾凌云，任 军. 蛋白质相互作用的研究方 conditional negative selection［J］. Sci Rep，2021，11（1）：
法［J］. 分析化学，2007，35（5）：760-766 5477
［2］ 钱 冰，马宝山，刘 玉. 蛋白质与蛋白质相互作用预 ［16］LIU Q，ZHENG J，SUN W P，et al. A proximity⁃tagging
