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第44卷第5期 王诏鹤，孔秋月，丁正年. 热休克蛋白A12A对内毒素血症肝损伤的作用及机制研究［J］.
2024年5月 南京医科大学学报（自然科学版），2024，44（5）：615-625 ·621 ·

达下降。 中 Apoa1、Apob 和 Apom 的 mRNA 水平。结果如图
为了进一步明确 HSPA12A 表达下调对内毒素 4C~E 所示，与 LPS⁃WT 组小鼠相比，LPS⁃Hspa12a -/-
血症肝损伤的加重作用是否与调控载脂蛋白表达有 组小鼠肝脏的 Apoa1（P < 0.01）、Apob（P < 0.01）和
关，本研究通过RT⁃PCR检测了内毒素血症小鼠肝脏 Apom（P < 0.001）的mRNA表达水平显著下降。

A B
1.5 Group Sham
Group
1.0 CLP 1.5 CLP
Sham
0.5
Apob 0 ** ** ***
Relative mRNA level
-0.5
-1.0 1.0
-1.5
Apom 0.5

Apoa1
0
Apoa1 Apob Apom

C Sham D Sham E Sham
1.5 ** CLP 1.5 ** CLP 1.5 CLP
mRNA level 1.0 mRNA level 1.0 mRNA level 1.0 **

Apoa1 0.5 Apob 0.5 Apom 0.5
Relative Relative Relative

0 -/- 0 -/- 0 -/-
LPS⁃WT LPS⁃Hspa12a LPS⁃WT LPS⁃WT
LPS⁃Hspa12a
LPS⁃Hspa12a

A：Clustering analysis of Apoa1，Apob and Apom in the livers between cecal ligation and puncture（CLP）and sham mice（n=3）. B：Comparison of
Apoa1，Apob and Apom mRNA level between CLP and sham mice（n=3）. C-E：Comparison of hepatic Apoa1（C），Apob（D），and Apom（E）mRNA levels
**
-/-
***
in WT and Hspa12a mice during endotoxemia. P < 0.01， P < 0.001（n=4）.
图4 Hspa12a基因敲除降低内毒素血症小鼠肝脏载脂蛋白mRNA表达水平
Figure 4 Hspa12a knockout reduced apolipoproteins mRNA expression in liver of endotoxemia mice
2.5 Hspa12a基因敲除降低内毒素血症小鼠肝脏载 为了明确 Hspa12a 过表达能否改善内毒素血
脂蛋白表达水平 症所致的肝细胞损伤，提取 WT 小鼠原代肝细胞，
本研究进一步分析了 HSPA12A 对内毒素血症 采用 Hspa12a 腺病毒感染肝细胞过表达 Hspa12a
小鼠肝脏中载脂蛋白表达水平的影响。免疫印迹 （Hspa12a ），而空腺病毒感染的细胞作为阴性对照
o/e
o/e
分析结果如图 5 所示，与 LPS⁃WT 组小鼠相比，LPS⁃ （NC）。免疫印迹分析证实 Hspa12a 组相比 NC 组
-/-
Hspa12a 组小鼠肝脏中 ApoA1（P < 0.05）、ApoB HSPA12A 表达增高（图 7A）。采用 LPS（500 ng/mL）
（P < 0.01）和ApoM（P < 0.01）蛋白水平显著下降。 或等量 NS 作用于原代肝细胞，6 h 后收取细胞培养
2.6 Hspa12a基因敲除降低内毒素血症小鼠血脂水平 上清测定其中肝细胞损伤标志物 ALT 和 AST 的活
胆固醇下降与内毒素血症不良预后相关 ，因 性水平，结果如图 7B、C 所示，与 NS 组比较，LPS 显
［6］
o/e
此本研究检测了血清中胆固醇含量，结果显示，与 著升高了Hspa12a 组和NC组肝细胞培养上清中的
-/-
LPS⁃WT组相比，LPS⁃Hspa12a 组小鼠血清中HDL⁃C ALT（P < 0.001）和AST（P < 0.01，P < 0.001）水平，同
o/e
和LDL⁃C显著下降（P < 0.01，图6）。 时 LPS 处理后，Hspa12a 组较 NC 组的 ALT 和 AST
2.7 Hspa12a过表达减轻LPS所致肝细胞损伤 水平上升幅度降低（P < 0.01）。