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第41卷第12期
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              1.1.4 性能验证                                        DYF387S1、DYS518、DYS449、DYS576），其中 3 个
                  ①准确性：取男性标准品DNA 2800（Promega公                  基因座（DYS449、DYS518、DYS576）为 RM Y⁃STR，
              司，美国）、DNA 9948（Promega公司，美国）及10份无                 2个基因座（DYS385、DYS389Ⅰ/Ⅱ）为MC Y⁃STR，1个
              亲缘关系的男性样本 DNA，对 74 个 Y⁃SNP 位点进                    基因座（DYF387S1）既是 RM Y⁃STR 也是 MC Y⁃
              行Sanger直接测序（生工生物工程股份有限公司），                        STR。
              用于验证体系分型结果的准确性。②灵敏度：利用                            1.3  统计学方法
              Y⁃SNP 体系分别检测模板量为 10.00、6.00、2.00、                      根据 Y⁃SNP 分型结果判别样本 Y⁃SNP 单倍群
              1.60、1.20、0.80、0.40、0.20、0.16、0.12、0.08、0.06、     类型，统计家系内Y⁃SNP单倍群分布情况。以家系
              0.018 ng 的男性标准品 DNA 2800 重复检测 3 次，                内成员中共享人数最多的单倍型为参考，统计家系
              测试体系的灵敏度。③重复性：以检测最优量对男                            内 Y⁃STR 单倍型分布情况及不同单倍型之间的容
              性标准品DNA 2800重复检测3次，比较3次检测结                        差和累计突变步长。基于 23 个单拷贝 Y⁃STR 基因
              果的分型与出峰位置的一致性。④检材适应性：检                            座分型，根据 Median⁃Joining 方法，使用 Network
              测男性FTA血卡、口腔拭子、指甲、毛发（带毛囊）等                         v10.0和Network Publisher软件分别对4个家系中Y⁃
              常见检材各 8 份，分别取 10 ng 进行检测，统计不同                     STR单倍型变异情况进行网络图可视化分析。
              类型检材的出峰率。⑤抗女性成分干扰：取男性标
                                                                2  结 果
              准品 DNA 2800 和女性标准品 DNA 9947 按 1∶1、
              1∶10、1∶100 的比例进行混合，确保每管内男性                        2.1 体系构建
              DNA 2800 的浓度均为 0.5 ng/μL，分别取 2 μL 进行                   男性标准品 DNA 2800 用本研究构建的 Y⁃SNP
              检测并与仅存在男性成分时的检测结果进行比                              体系检测的分型图谱如图 2 所示。其中核心体系
              对。⑥种属特异性：取恒河猴、黑猩猩、鸡、牛、蛇、                          SNP 位点延伸片段长度在 37~116 bp 之间（图 2A），
              鼠、鱼、猪等非人源样本各 10 ng 进行检测，统计各                       O 体系 SNP 位点延伸片段长度在 31~115 bp 之间
              种属的出峰数目。                                          （图 2B）。在 DNA 模板量为 10 ng 时（浓度 5 ng/μL，
              1.2  方法                                           体积 2 μL），各位点均有分型峰，且峰高均超过 200
              1.2.1 样本及DNA提取与定量                                 RFU。
                  本研究收集来自 4 个社会学家系（分别命名为                        2.2  体系性能验证
              P1~P4 家系）共 20 份男性血卡样本，其中 P1 家系                         ①准确性：12份DNA样本的分型结果与Sanger
              3 例，P2 家系 6 例，P3 家系 6 例，P4 家系 5 例。采用              直接测序结果的基因分型完全一致，构建的复合体
              QIAamp DNA Blood Mini M48 试剂盒（QIAGEN 公            系对 74 个 Y⁃SNP 位点的基因分型结果准确性可达
                     ®
              司，德国）提取DNA，使用NanoDrop 2000c分光光度                   100%，DNA2800核心体系检测结果可扫OSID 码查
              计（Thermo Fisher Scientific 公司，美国）进行定量，            看附图1，O体系检测结果可扫OSID 码查看附图2，
              用去离子灭菌水稀释至5 ng/μL待检。本实验室样                         余11份DNA结果可扫OSID码查看附表2。②灵敏
              本均来源于国家科技资源共享服务平台计划项目                             度：对不同模板量的样本进行Y⁃SNP体系检测，以等
             （编号：YCZYPT［2017］01⁃3），所有样本对象均签署                    位基因峰高低于100 RFU视为位点丢失为标准。结
              知情同意书，本研究已通过公安部物证鉴定中心伦                            果显示，在 DNA 检测量最低为 0.14 ng（核心体系
              理委员会的伦理审查（批准号：2017LLSC⁃005）。                      0.06 ng，O 体系 0.08 ng）时，74 个 Y⁃SNP 位点均可正
              1.2.2 分型检测                                        确判型，检测结果可扫 OSID 码查看附图3。③重复
                  所有样本采用本研究构建的体系按照 1.1.2 方                      性：74个Y⁃SNP位点在3次重复实验中的分型结果一

              法进行 Y⁃SNP 分型检测；采用 DNA Typer           TM  Y29 试   致，相同位点之间的出峰位置差距平均为 0.087 bp
              剂盒（公安部物证鉴定中心，北京）进行 Y⁃STR 检                        （核心体系 0.025 bp，O 体系 0.061 bp），均≤1 bp（可
              测 ，包 括 26 个 Y ⁃ STR 基 因 座（DYS19、DYS385、           扫OSID码查看附表3）。说明Y⁃SNP体系重复检测
              DYS389Ⅰ/Ⅱ、DYS390、DYS391、DYS392、DYS393、            相同的DNA样本时，均能获得相同的分型结果。④
              DYS437、DYS438、DYS439、DYS448、DYS456、               检材适应性：利用 Y⁃SNP 体系检测的 FTA 血卡、口
              DYS458、DYS635、GATA ⁃ H4、DYS444、DYS447、            腔拭子、指甲、毛发（带毛囊）DNA样本，均能获得完
              DYS460、DYS481、DYS508、DYS533、DYS643、               整分型，且同一样本不同类型检材分型结果一致，
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