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第42卷第10期 王文璐，何 权，周林福. 葛根素抑制支气管哮喘小鼠气道炎症和TSLP介导的Th2免疫
2022年10月 作用的研究［J］. 南京医科大学学报（自然科学版），2022，42（10）：1371-1375，1408 ·1373 ·

酶标仪波长 450 nm 上读取吸光度值，通过标准曲
2 结 果
线换算成相应浓度，结果以 pg/mL 表示。IgE、IL⁃4、
IL⁃13测定的最小限值分别为1、4、7 pg/mL。 2.1 葛根素对哮喘小鼠肺功能的影响
1.2.4 肺组织病理学检查 各组小鼠均分别予 Ach 10、30、90、270 μg/mL
用颈椎脱臼方法处死小鼠后，取小鼠左上肺， 激发，气道反应性检测结果显示，哮喘组、葛根素
予 4%多聚甲醛固定，HE 染色观察气道炎症浸润情 组、布地奈德组平均Re值均高于正常组（P < 0.05），
况。瑞氏染色计数细胞总数和EOS百分比。 并随Ach浓度增加而增高。葛根素组和布地奈德组
PAS 染色方法：取小鼠右上肺，切片常规脱蜡 较哮喘组降低（P < 0.05），葛根素组和布地奈德组之
入水，予 3%醋酸液洗 2 min，加入 1%阿利新兰醋酸 间差异无统计学意义（P > 0.05，表1）。
液（pH2.5）10~20 min，蒸馏水洗，予 0.5%过碘酸水 2.2 葛根素对血清总IgE及BALF IL⁃4、IL⁃13的影响

溶液 5 min，蒸馏水洗，70%酒精洗，Schiff 氏液 15~ 哮喘组血清总 IgE、BALF IL⁃4 和 IL⁃13 水平较
30 min（Schiff氏液从冰箱取出升至室温使用），流水 正常组升高（P < 0.05）。葛根素组和布地奈德组较
冲洗 10 min，苏木素淡染 2~3 min，水洗，常规脱水、 哮喘组降低（P < 0.05），葛根素组和布地奈德组之间
封片。观察杯状细胞增生情况。 差异无统计学意义（P > 0.05，表2）。
1.2.5 肺组织TSLP蛋白表达水平测定 2.3 各组小鼠BALF炎症细胞计数和分类计数比较
从肺组织中提取细胞总蛋白，测蛋白总浓度。 哮喘组BALF细胞总数和EOS较正常组显著增
用 10% SDS⁃PAGE 电泳，分离蛋白质经电转印将蛋 加（P < 0.01）。葛根素组和布地奈德组 BALF 总细
白质转移到PVDF膜上，4 ℃封闭过夜，分别加一抗， 胞数和 EOS 较哮喘组显著减少（P < 0.05）。葛根素
平摇，洗膜，加二抗，化学发光显影。计算TSLP相对 组和布地奈德组相比差异无统计学意义（P > 0.05，
表达量作为肺组织TSLP表达水平。 表3）。
1.3 统计学方法 2.4 葛根素对哮喘小鼠气道炎症的抑制作用
采用 SPSS 13.0 软件进行统计学分析。计量数 HE 染色显示，正常组无炎症细胞浸润，而哮喘
据用均数±标准差（x ± s）表示，组间比较采用单因素 组小鼠气道炎症细胞浸润显著增多，葛根素组、布
方差分析，两两比较采用 SNK 检验。P < 0.05 为差 地奈德组气道炎症和BALF炎症细胞募集均显著低
异有统计学意义。 于哮喘组（P < 0.05，表3、图2）。

表1 各组小鼠在不同浓度乙酰胆碱刺激后的气道阻力比较
Table 1 Comparison of airway resistance of mice treated with different concentrations of acetylcholine in four groups
［cmH2O/（mL·s），x ± s，n = 8］
乙酰胆碱浓度
组别 基础值
10 μg/kg 30 μg/kg 90 μg/kg 270 μg/kg
正常组 1.36 ± 0.17 3.24 ± 0.19 3.92 ± 1.19 04.53 ± 1.34 07.16 ± 1.83
哮喘组 1.42 ± 0.23 3.39 ± 0.16 7.22 ± 1.86 * 11.20 ± 2.40 * 22.78 ± 4.77 *
葛根素组 1.38 ± 0.17 3.37 ± 0.16 5.32 ± 1.18 # 08.27 ± 1.67 # 13.67 ± 2.22 #
布地奈德组 1.45 ± 0.13 3.37 ± 0.22 4.63 ± 1.57 # 07.38 ± 2.00 # 12.35 ± 3.00 #
与哮喘组相比，P < 0.05；与正常组相比，P < 0.01。
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表2 各组小鼠BALF IL⁃4、IL⁃13 和血清总IgE水平比较
Table 2 Comparison of BALF IL⁃4，IL⁃13 and serum total IgE levels in four groups （x ± s，n = 8）
BALF（pg/mL）
组别 血清总IgE（ng/mL）
IL⁃4 IL⁃13
正常组 021.96 ± 4.28 11.02 ± 2.82 120.76 ± 33.14
哮喘组 123.80 ± 28.36 * 45.44 ± 7.04 * 656.83 ± 73.12 *
葛根素组 049.86 ± 8.43 # 23.66 ± 5.02 # 223.64 ± 69.82 #
布地奈德组 047.20 ± 8.20 # 21.16 ± 5.38 # 278.29 ± 64.87 #
与哮喘组相比，P < 0.05；与正常组相比，P < 0.01。
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