Page 28 - 南京医科大学自然版

第45卷第2期
·168 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2025年2月

间两两比较。使用 SPSSAU 软件进行数据加权分 种物质单独作用，也高于 MC∶EC（1∶14）组和 MC∶
析；其余所得实验数据使用 Origin2022 软件处理。 EC（1∶19）组。
P < 0.05 为差异有统计学意义。 2.3 屏障修复活性实验结果
在屏障修复活性实验部分，本研究选择 FLG 、
2 结 果
AQP⁃3的分泌量为评价指标。如图 3 所示，增加给
2.1 细胞毒性实验 药浓度后，两项指标均有增加。其中 FLG 分泌量
不同浓度 MC 和 EC 对 RAW 264.7 细胞活性实 在低剂量 20 μg/mL 下各组间差异无统计学意义。
验结果如图 1，各组间差异无统计学意义，可认为 当增加浓度到 100、200 μg/mL 剂量时，给药组中
MC 和 EC 在 0~500 μg/mL 浓度范围内无细胞毒作 MC∶EC（1∶9）组 FLG 分泌量显著性高于空白组、
用，为后续细胞实验选择浓度梯度提供了依据。 MC、EC 组和其他质量比组（P均< 0.05）。在低剂量

2.2 抗炎活性实验 时，MC∶EC（1∶9）组AQP⁃3分泌量显著高于空白组、
如图 2 所示，使用脂多糖刺激 RAW 264.7 细胞 MC和EC组（P均< 0.001），3个配比组间差异无统计
构建炎症模型后，各组细胞培养液上层中均有NO、 学意义。而在中、高剂量组中 MC∶EC（1∶9）组分泌
TNF⁃α分泌。同时，随着给药浓度的增加，炎症因子 量不仅显著高于空白组、MC 和 EC 组，也高于其他
的分泌量也随之减少，证明无论是单独用药，还是 质量比组（P 均< 0.05）。表明 MC 和 EC 两种物质组
联合用药 MC 和 EC 都具有一定的抗炎活性。但同 合配比后屏障修复活性高于两种物质单独作用，
样的给药浓度下，MC∶EC（1∶9）组NO、TNF⁃α浓度显 其质量比为 1∶9 时屏障修复活性最佳。
著低于其他组别（P均< 0.05）。表明MC 和 EC 两种 2.4 高效液相色谱法测定溶液中MC、EC含量的方
物质质量比为 1∶9 时，其抗炎活最佳，不仅高于两 法学确认
在 1.2.4 的色谱条件下，分别测定 MC、EC 标准
EC
120
MC 溶液，获得以 MC、EC 浓度为横坐标（X），峰面积为
100
（%） 80 纵坐标（Y），获得 X 对 Y 回归方程，MC 为 y=2.276
56x+0.799 58（r=0.999 9）；EC为y=34.722x+114.9（r=
Cell viability 60 0.999 9），证明 MC、EC 在 5~500 μg/mL 范围内线性

40
左右而EC 标准溶液在3 min 左右出现色谱峰，空白
20 关系良好。图4色谱图显示，MC标准溶液在13 min
0 脂质体在此时间内无干扰，专属性好；精密度及准
0 2.5 5 10 50 100 300 500
Concentration（μg/mL） 确度考察结果见表 2、3，可知该方法测定溶液中
图1 MC和EC对RAW 264.7细胞活性影响（n=9） MC、EC含量精密度好，准确度高。
Figure 1 Effect of MC and EC on the toxicity of RAW 2.5 脂质体制备试验
264.7 cells（n=9） 参考细胞实验结果，MC 与 EC 在质量比为 1∶9

*** Positive control Positive control
60 *** *** *** *** MC 200 ** ** ** ** MC
（μmol/mL） 50 * 一一一一一一 *** *** 丐丐丐丐丐丐 *** *** 丐丐丐丐丐丐 MC∶EC（1∶9） （pg/mL） 160 ** * 一一一一一一 ** * ** 丐丐丐丐丐丐 ** ** 一一一一一一
**
丐丐丐丐丐丐
***
180
***
EC
EC
MC∶EC（1∶9）
***
***
一一一一一一
丐丐丐丐丐丐
140
丐丐丐丐丐丐
MC∶EC（1∶14）
**
MC∶EC（1∶14）
40
一一一一一一
***
一一一一一一
一一一一一一
120
MC∶EC（1∶19）
MC∶EC（1∶19）
丐丐丐丐丐丐
丐丐丐丐丐丐
丐丐丐丐丐丐
**
丐丐丐丐丐丐
丐丐丐丐丐丐
丐丐丐丐丐丐
NO secretion 30 一一一一一一 一一一一一一 一一一一一一 丐丐丐丐丐丐 secretion TNF⁃α 100 一一一一一一 一一一一一一 丐丐丐丐丐丐 * 一一一一一一 丐丐丐丐丐丐
丐丐丐丐丐丐
丐丐丐丐丐丐
80
丐丐丐丐丐丐
20
丐丐丐丐丐丐
丐丐丐丐丐丐
60
丐丐丐丐丐丐
40
10
0 丐丐丐丐丐丐 丐丐丐丐丐丐 丐丐丐丐丐丐 20 0 丐丐丐丐丐丐 丐丐丐丐丐丐
一一一一一一
丐丐丐丐丐丐
一一一一一一 丐丐丐丐丐丐 200
20 一一一一一一 100 丐丐丐丐丐丐 200 一一一一一一 丐丐丐丐丐丐 20 Concentration（μg/mL） 一一一一一一 丐丐丐丐丐丐
100
一一一一一一
丐丐丐丐丐丐
Concentration（μg/mL）
一一一一一一
一一一一一一
一一一一一一
*
**
The secretion levels of NO（A）and TNF⁃α（B）in RAW 264.7 cells under LPS stimulation. P < 0.05，P < 0.01，and *** P < 0.001（n=9）.
图2 MC、EC、MC∶EC质量比1∶9、1∶14、1∶19对LPS刺激下RAW 264.7细胞产生的炎症因子分泌水平的影响
Figure 2 Effects of MC，EC，as well as combined MC and EC（mass ratio 1∶9，1∶14 and 1∶19）on the secretion levels of in⁃
flammatory factors induced by LPS stimulation in RNW 264.7 cells