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第45卷第2期
               ·166 ·                            南 京    医 科 大 学 学         报                        2025年2月


             [Key words] madecassoside;ectoin;liposome;soothing effect
                                                                         [J Nanjing Med Univ,2025,45(02):165⁃172,184]







                  根据国际瘙痒研究论坛(International Forum for            药物渗透量,或加入表面活性剂作为边缘活化剂,
              the Study of Itch,IFSI) 及《中国敏感性皮肤诊治专              提高囊泡可变形性等           [20] 。这些技术有助于脂质体
                                 [1]
              家共识》(2017版) ,将敏感性皮肤定义为在受到外                        更好地穿过皮肤屏障,渗透入更深层的皮肤,达到
                              [2]
              界刺激后,皮肤产生阵发性或周期性红肿、热痛、                            促渗效果。
              瘙痒及紧绷感。根据流行病学调查可知,敏感性                                  本研究首次选择MC、EC为主要活性成分,深入
              皮肤在全球广泛分布,女性群体中发生率普遍高                             探讨这两种物质的抗炎活性及屏障修复活性;再对
                    [3]
              于男性 。敏感性皮肤的发生机制尚未完全明了,                            这两种物质进行包载,制备 MC⁃EC 脂质体;对其理
              大部分认为是皮肤屏障受损导致皮肤血管神经反                             化性质、透皮吸收性能等进行评价,为后续这两种
              应性增加所致       [4-5] 。在《化妆品分类规则和分类目                 物质制剂的开发使用提供实验依据。
              录》中有一类化妆品可以有助于改善皮肤刺激等状
                                                                1  材料和方法
              态,被认为具有舒缓功效如羟基积雪草苷(mdecas⁃
              soside,MC)和依克多因(ectoin,EC)。                       1.1 材料
                  MC 是一种提取自伞形科多年生草本植物积雪                              实验中用到的小鼠单核巨噬细胞(RAW 264.7)
              草中的活性物质,是积雪草中含量最高的三萜类物                            和人永生化上皮细胞(HaCaT)均购自中国科学院典
                [6]
              质 。积雪草由于其生理活性和药理性被广泛使用                            型培养物保藏委员会细胞库。细胞培养条件为
              于生物医药和日化原料中            [7-8] ,其各种提取物被认为           37 ℃、5%CO2,培养基为含 10%胎牛血清的 DMEM。
                                                         [9]
              具有抗氧化、美白、抗炎等多种功效,安全且高效 。                          MC(上海阿拉丁试剂有限公司);EC、卵磷脂、胆固
              然而,MC 水溶性差,生物利用率低,导致其很难透                          醇(上海麦克林生化科技股份有限公司);脂多糖
              过皮肤的表皮层进入真皮层发挥作用。EC 学名四                          (Sigma⁃Aldrich 公司,美国);MTT(广州硕普生物科
              氢嘧啶羧酸,可由在极端环境下存活的嗜盐菌分                             技有限公司);小鼠肿瘤坏死因子⁃α(tumor necrosis
              泌;其不仅是生物保护剂,同时可以帮助蛋白、核                            factor⁃α,TNF⁃α)、人水通道蛋白 3(aquaporin,AQP⁃
              酸、生物膜乃至整个细胞对抗高温、干燥、冷冻和辐                           3)、人丝聚蛋白(filaggrin,FLG)酶联免疫吸附试验
              射等多种逆境      [10-11] 。此外,EC还具有抑制酪氨酸酶              (enzyme⁃linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒
              活性的作用,减少黑色素产生              [12] ;减少 DNA 甲基化      (江苏酶免生物科技有限公司)、一氧化氮(nitric ox⁃
              所致的皮肤衰老等作用           [13-14] 。研究表明,MC 与 EC        ide,NO)试剂盒(南京碧云天生物技术有限公司)。
              在一定的质量配比下,可以在抗炎活性方面产生协                            1.2  方法
                          [15]
              同增效的作用 。                                          1.2.1 细胞毒性实验
                  脂质体是一种将活性物质包封于磷脂双分子                                将RAW 264.7细胞按照5×10 个/孔的密度接种
                                                                                              5
              层中形成的小球形囊泡,因具有良好的生物相容                             于 96 孔板中,37 ℃、5%CO2 的细胞培养箱内培养
              性、毒性低、无免疫抑制等优点             [16] ,被广泛应用于日          24 h;按照 MC、EC 质量浓度分别为 0、2.5、5、10、50、
              常生活中的各项领域中            [17] 。脂质体在化妆品中可             100、300、500 μg/mL 给药,相同条件下继续培养
              以作为包覆载体来提高活性成分的稳定性,增强闭                            24 h;24 h 后,小心吸去含有药物的上清培养基,每
              合性和水合作用        [18] ,还可以延长活性物质作用皮肤                孔加入100 μL含有5 mg/mL MTT 溶液,培养4 h后,
              的时间实现缓释,到达皮肤的深层                [19] 。因为人体皮        弃去含有 MTT 的培养基,每孔加入 100 μL DMSO,
              肤具有屏障作用,活性物难以渗透到皮肤深层。所                            摇床震荡5 min,在490 nm处测得各孔吸光度值,以
              以为了提高活性物利用效率,脂质体在化妆品中有                            评估细胞活性。
              着广泛的应用。随着技术的发展,有研究通过改变                            1.2.2 抗炎活性检测
              脂质体双层膜的结构制备了各种新型脂质体,例如                                 将RAW 264.7细胞按照5×10 个/孔的密度接种
                                                                                              5
              加入乙醇作为促渗剂,降低角质层脂质熔点,提高                            于 24 孔板中,37 ℃、5%CO2 的细胞培养箱内培养
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