Page 52 - 南京医科大学自然版
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第45卷第7期
               ·950 ·                            南 京    医 科 大 学 学         报                        2025年7月


                        A
                           PAPX




                          Epa12
                                                                                                100%


                                                                                                80%
              B                                                  C
                        78  ▲PAPX
                                                                                                        CDS
                     80     MT118291.1:Pseudomonas plhage Epa12                                         Other
                                                                                                        GC content
                            NC050149.1:Pseudomonas plhage vB PaeM USP1
                                                                                                        GC skew+
                            OQ992556.1:Pseudomonas plhage Kurama                                        GC skew-
                      97
                   46   97  OQ992555.1:Pseudomonas plhage Sealy
                                                                                 60 kbp
                            LC102730.1:Pseudomonas plhage S12⁃1 DNA
                      96                                                                10 kbp
                            LC472883.1:Pseudomonas plhage S12⁃3 DNA                 PAPX
                                                                               50 kbp
                 70     84  NC041870.1:Pseudomonas plhage vB PaeM CEB DP1       Length:66,201 bp
                    84                                                                   20 kbp
                            KP340287.1:Pseudomonas plhage phiKT28
                                                                                 40 kbp
                                                                                     30 kbp
                        99  NC041865.1:Pseudomonas plhage phiKTN6
                            NC019451.1:Pseudomonas plhage NH⁃4
                        77  OP314870.1:Pseudomonas plhage Kara⁃mokiny kep⁃wari Wadjak
                            OP310976.1:Pseudomonas plhage Kara⁃mokiny kep⁃wari Wadjak
                        92  OP314872.1:Pseudomonas plhage Kara⁃mokiny kep⁃wari Wadjak
                            OQ992552.1:Pseudomonas plhage GoodVibes
                      48
                            ON529291.1:Pseudomonas plhage Ka2
                     43  43  OP310975.1:Pseudomonas plhage Kara⁃mokiny kep⁃wari Wadjak

                            OP314871.1:Pseudomonas plhage Kara⁃mokiny kep⁃wari Wadjak
                  100   49  OP310977.1:Pseudomonas plhage Kara⁃mokiny kep⁃wari Wadjak
                            OP310972.1:Pseudomonas plhage Kara⁃mokiny kep⁃wari Wadjak

                A:Genome alignment analysis of phage PAPX and phage Epa12. B:Evolutionary tree analysis of phage PAPX. C:Phage PAPX genome circle map.
                                            图5 噬菌体PAPX基因组测序和遗传进化分析
                                        Figure 5 Genome sequencing and analysis of PAPX phage

              噬菌体PAPX侵染细菌时,前80 min为潜伏期,随后                       显著差异(图7C、D)。综上所述,该噬菌体PAPX可
              120~165 min 对数爆发期,而后是维持稳定期,估算                     能是有潜力的临床噬菌体制剂。
              每个受感染细胞裂解约释放45个病毒。
                                                                3  讨 论
              2.7  噬菌体PAPX能有效抑制铜绿假单胞菌扩增并
              且清除细菌生物膜                                               临床难治菌株 ESKAPE 病原体包括粪肠球菌
                  为评估噬菌体PAPX复制对铜绿假单胞菌生长                        (Enterococcus faecium)、金黄色葡萄球菌(Staphylo⁃
              的影响,进行了体外抑菌实验,研究结果表明,与铜绿                          coccus aureus)、肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)、
              假单胞菌标准株混合培养4 h就能检测到抑制作用,                          鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii)、铜绿假单
              随着共培养时间的增加,抑制作用也在增强。而随着                           胞菌(Pseudomonas aeruginosa)和肠杆菌属(Entero⁃
              时间的推移,观察到实验组的D(600 nm)不再降低,                       bacter species)。由于抗生素的广泛和不当使用,具
              表明细菌已完全裂解从而使细菌裂解碎片的吸光度                            有多重耐药性的菌株分离率极大提高,对临床感染
              达到了一个稳定的水平(图7A、B)。铜绿假单胞菌生                         造成了重大威胁,也带来了沉重的公共卫生负担 。
                                                                                                           [21]
              物膜的形成是其感染定植且难以清除的重要原因,进                           作为需氧细菌,铜绿假单胞菌展现出卓越的生存优

              一步地进行了生物膜裂解实验,噬菌体PAPX作用6 h                        势,不仅能够耐受极端环境,还能在营养匮乏的条
              后进行生物膜染色并测量 D(600 nm),两组间呈现                       件下维持生存,与各种严重的院内感染有关,危及
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