Page 31 - 《南京医科大学学报（自然科学版）》2025年第9期
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第45卷第9期      王韫格，刘云龙，王玲菲，等. 宿主DNA甲基化标志物在宫颈癌筛查中的应用：ZNF671的关键贡献与
                  2025年9月             联合模型评价［J］. 南京医科大学学报（自然科学版），2025，45（9）：1242-1250                   ·1243 ·


                specificity. Among them，ZNF671 exhibited the best performance as a single biomarker，with an area under the curve（AUC）of 0.741.
                The combined model of ZNF671 and SOX1 achieved AUCs of 0.801 and 0.745 in the training and testing sets，respectively，with a
                specificity up to 87%，outperforming any individual gene. Conclusion：The DNA methylation levels of SOX1，JAM3，ZNF671，and
                DLX1 are closely associated with the severity of cervical lesions and exhibit potential value for triage. In particular，ZNF671 shows
                strong predictive performance for CIN2 + in HPV16/18 ⁃ positive women，and may serve as an auxiliary biomarker for identifying
                precancerous lesions. The combined model incorporating SOX1 further improves diagnostic accuracy.
               ［Key words］ cervical cancer；DNA methylation；ZNF671；triage strategy；HPV16/18
                                                                            ［J Nanjing Med Univ，2025，45（09）：1242⁃1250］





                    宫颈癌是全球女性常见的恶性肿瘤之一。据                           及性，最终筛选出 SOX1、JAM3、ZNF671 和 DLX1 这
                统计，2020 年全球新发宫颈癌病例约 60.4 万例，死                     4 个在宫颈癌前病变进展中表现稳定、具有临床验
                亡约34.2万例 ，其中大多数发生在中低收入国家 ，                        证基础的宿主基因。基于此，本研究聚焦HPV16/18
                                                           ［2］
                            ［1］
                发病率和死亡率依然处于较高水平。近年来，我国                            阳性人群，拟采用焦磷酸测序技术检测上述基因在
                宫颈癌发病率与死亡率持续上升，并且城乡发病率                            宫颈脱落细胞中的DNA甲基化水平，系统分析其在
                差距在扩大，成为严重威胁女性健康的公共卫生问                            宫颈癌变各阶段的特异性变化规律，构建高效的风
                题。大多数宫颈癌病例与高危型人乳头瘤病毒                              险分层模型，旨在为优化筛查策略、减少不必要的
               （high⁃risk human papillomavirus，hr⁃HPV），特别是        阴道镜检查提供新思路，并探索其在精准诊断中的
                HPV16 和 HPV18 的持续感染密切相关。HPV16 常                   潜力。
                见于鳞状上皮病变，而 HPV18 更倾向于腺上皮病
                                                                  1 材料和方法
                变，且癌前期检出难度更高             ［3-4］ 。在 HPV 疫苗尚未
                全面覆盖的中短期内，宫颈癌筛查与及时治疗仍是                            1.1  材料
                降低宫颈癌发病率和死亡率最直接、最有效的公共                                QIAamp DNA Mini Kit、EpiTect Fast DNA Bisulfite
                卫生干预措施 。然而，当前筛查手段仍存在局限                            Kit、PyroMark Gold Q96 Reagents、PyroMark Q24
                            ［5］
                                                                               ®
                性。HPV 基因分型因其高敏感性已被广泛用于宫                           MDx 实时定量焦磷酸序列分析仪、PyroMark Q24
                        ［6］
                颈癌初筛 ，但其特异性较低，难以区分一过性感染                           workstation、PyroMark Q24 2.0.6（QIAGEN 公 司 ，德
                与持续性感染，导致过度诊疗的发生 。而细胞学                            国）；GoTaq Hot Start Polymerase、MgCl2 （25 mmol/L）、
                                                 ［7］
                                                                            ®
                检查因其灵敏度不高、主观性较强，容易出现漏诊                            5×Green or Colorless GoTaq Flexi Buffer（Promega 公
                                                                                          ®
                或结果的偏差。我国现行指南建议所有 HPV16/18                        司，美国）；dNTP Mix（南京赛百盛生物有限公司）；
                阳性者直接转诊阴道镜检查 ，但大量低级别病变                            无水乙醇（江苏强盛功能化学股份有限公司）；
                                         ［8］
                患者接受了不必要的侵入性检查，增加了患者的心                            OneDrop 超微量紫外可见分光光度计（南京五义科
                                                                         TM
                理及经济负担。                                           技有限公司）；A200型全触控屏梯度PCR仪、恒温混
                    近年来，DNA 甲基化在宫颈癌筛查中的应用                         匀仪（杭州朗基科学仪器有限公司）；Allegra X⁃30R
                受到了广泛关注，其异常改变早于组织学变化，且                            冷冻离心机（Beckman Coulter公司，美国）；实验用水
                具有组织特异性和可量化的特征                ［9-10］ 。研究证实，       均为灭菌双蒸水（ddH2O），其余试剂均为国产分析纯。
                宿主 DNA甲基化可作为新型生物标志物，与宫颈上                          1.2  方法
                皮内瘤变2/3级（cervical intraepithelial neoplasia 2/3，  1.2.1  样本收集与患者纳排标准
                CIN2/3）和癌症的发生密切相关           ［11-12］ 。                 本研究收集了2023年4月—2024年5月在东部
                    鉴于 HPV16/18 阳性人群的高风险特征及当前                     战区总医院就诊并经 HPV 筛查后的残余宫颈脱落
                筛查策略的不足，迫切需要一种在该人群中具备良                            细胞样本。样本来源患者纳入标准：①HPV16/18
                好特异性并能够辅助分流判断的分子诊断手段。                             阳性，且近 3 个月内行阴道镜检查并活检；②年
                本研究通过系统文献检索            ［13-16］ ，比较当前国内已商          龄 20~75 岁；③子宫颈完整。排除标准：①妊娠期；
                业化的 DNA 甲基化检测试剂盒（如宫安丽 、禾宫                         ②子宫颈癌/癌前病变治疗史；③盆腔放化疗史；
                                                       ®
                康 、凯普）中各候选基因的诊断性能，结合检测可                           ④合并其他恶性肿瘤。研究经医院伦理委员会批
                  ®
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