Page 69 - 《南京医科大学学报（自然科学版）》2026年第3期
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第46卷第3期 杨 燕，胡琴琴，刘 裔，等. 利福平和利福布汀对rpoB基因突变而表型敏感的结核菌耐药性研究［J］.
2026年3月 南京医科大学学报（自然科学版），2026，46（3）：375-383 ·377 ·
及低度耐药的 rpoB 突变株（共 25 株）。对于高度耐 2⁃羧酸酰肼培养基（thiophere⁃2⁃carboxylic acid hy⁃
药株，为在有限样本量内实现不同突变类型间的有 drazide medium，TCH）培养基对培养阳性的标本进
效比较，依据突变类型进行了代表性选取：对除 行菌种鉴定：PNB 能抑制牛分枝杆菌和人型结核分
S531L外的其他突变类型，因为数量相对有限而全部 枝杆菌，而TCH仅抑制牛分枝杆菌。通过分析菌株
纳入；对菌株数最多的S531L突变类型（共42株），则 在两种培养基上的生长情况，鉴定出MTB。采用琼
从中随机选取 3 株作为该类型的代表。最终，共 脂固体比例法检测 RIF 表型药敏，取 0.1 mL 菌液接
40 株菌株进行RIF和RFB的MIC检测（图1）。本研 种至高浓度（250 μg/mL）、低浓度（50 μg/mL）含药培
究已获医院伦理委员会批准（伦理批号：2023⁃LY⁃ 养基和对照培养基。当两个浓度培养基上无菌落
kt093），所有患者知情同意。 生长、对照管有菌生长，判定为敏感；当两个浓度培
1.2 方法 养基均有菌落生长，判定为高度耐药；只在低浓度
1.2.1 MTB培养及药敏鉴定 培养基有菌落生长，判定为低度耐药。
罗氏固体法进行 MTB 培养。使用对硝基苯甲 1.2.2 Xpert核酸扩增检测
酸培养基（p⁃nitrobenzoic acid medium，PNB）和噻吩⁃ 将待检测的痰液或灌洗液以 1 500 r/min 离心，
2 236 sputum/alveolar lavage
fluid samples from tuberculosis patients
MTB
culture and GeneXpert testing
MTB culture group GeneXpert group
Excluded：negative results， Excluded：negative
non⁃MTB and duplicates results and duplicates
778 positive
980 positive isolates
isolates：phenotypic DST
298 strains：phenotypic and
genotypic tests were both positive
82 strains：
molecular drug⁃resistant
rpoB gene sequencing and
phenotypic DST analysis
25 strains：rpoB mutation 15 strains：rpoB mutation
（phenotypic sensitive/low （phenotypic high level
level resistance） resistance）
40 strains：MIC testing
（RIF+RFB）
MTB：Mycobacterium tuberculosis；DST：drug susceptibility test；MIC：mininum inhibitory concentration；RIF：rifampicin；RFB：rifabutin.
图1 样本筛选流程图
Figure 1 Sample screening flowchart
