Page 68 - 《南京医科大学学报（自然科学版）》2026年第3期

第46卷第3期
·376 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2026年3月

high⁃level resistance to RIF；S512G，S522L，and L533P conferred low⁃level resistance；while H526L，D516Y，L511P，and P483L
mutations were phenotypically sensitive to RIF. MIC testing revealed that only H526L and L511P mutations were sensitive to both
drugs. In contrast，strains with mutations including S531L，L511P combined with H526Q，H526D，D516Y，S512G，S522L，L533P，and
P483L were resistant to RIF but remained sensitive to RFB. Overall，the log⁃transformed RIF MIC（log2 RIF⁃MIC）value［3.50（1.00，
4.00）］for rpoB mutant strains was significantly higher than the log⁃transformed RFB MIC（log2 RFB⁃MIC）value［2.00（-3.00，3.75）］
（Z=-4.481，P < 0.001）. Conclusion：This study demonstrates that different rpoB mutation sites lead to varying levels of resistance to
RIF and RFB in MTB. Compared to RIF，RFB exhibits lower MIC values and potential clinical effectiveness against various rpoB
mutant strains（e.g.,L511P，H526L，D516Y，S522L，etc.）. Precise analysis of rpoB mutation sites and evaluation of their susceptibility
to RFB may offer a new strategy to address the clinical dilemma of“molecular resistance⁃phenotypic sensitivity”and provide a basis for
formulating individualized，stratified treatment plans using rifamycin drugs.
［Key words］ Mycobacterium tuberculosis；phenotypic drug susceptibility；genetic mutation；stratified treatment；rifampicin；rifabutin
［J Nanjing Med Univ，2026，46（03）：375⁃383］

结核病是由结核分枝杆菌（Mycobacterium tuber⁃ 由于选择压力和遗传背景等因素，不同地区MTB
culosis，MTB）感染引起的慢性传染病，严重威胁全 的耐药突变谱存在差异 ，且表型药敏结果可能因
［9］
［10］
球公共卫生。长期以来对人类健康造成威胁。耐 检测方法的不同而受到影响 。南京中医药大学附
药结核的出现进一步加剧其防控难度。据世界卫生 属南京医院采用琼脂固体比例法将RIF耐药分为高
［11］
组织（World Health Organization，WHO）估计，2022年 度耐药（≥250 μg/mL）和低度耐药（≥50 μg/mL） 。
全球有41万耐药结核患者，占新发病例的3.3%，治 而WHO推荐的临界耐药浓度为40 μg/mL ，这一差
［1］
［1］
疗成功率仅为 63% 。我国作为结核负担全球第 3 异提示有必要对本地区菌株的耐药水平进行更精
的国家，2022年报告的耐药结核病患者约3.3万例， 确地评估。
平均治疗成功率为53% 。 利福布汀（rifabutin，RFB）与 RIF 同属于利福霉
［2］
［3］
利福平（rifampicin，RIF）属于强效杀菌剂 ，是 素类药物，作用机制相似 ［12］ 。但RFB的体外抗菌活
结核病治疗方案中的核心杀菌药物，但其耐药问题 性是RIF的2~4 倍，曾被WHO推荐为治疗耐药结核
日益严重。为此，WHO建议，一旦检测到RIF耐药， 的合理替代方案 ［13］ 。尽管两者之间存在交叉耐药，
［1］
应立即启动二线药物治疗 ，然而这类治疗方案疗 但研究表明某些 rpoB 突变对 RFB 最小抑菌浓度
程长（通常需 18 个月或更长）、药物不良反应多、费 （mininum inhibitory concentration，MIC）的升高幅度
用高昂，但疗效常不理想。因此，实现早期、准确的 小于 RIF ［14］ ，提示 RFB 对部分分子耐药菌株可能仍
耐药诊断对改善治疗结局至关重要。 具有活性。然而，目前针对“分子耐药⁃表型敏感”菌
传统表型药敏试验虽被WHO 认定为诊断耐药 株中不同 rpoB 突变对 RIF 和 RFB 耐药性差异的系
结核的“金标准”，但耗时长达2~3个月，难以满足临 统研究仍较缺乏，值得研究。
床早期决策的需求。RIF 的杀菌机制是作用于编 因此，本研究旨在分析南京地区MTB的rpoB基
码 RNA 聚合酶β亚基的 rpoB 基因，约 95%的耐药 因的突变特征，并比较不同突变菌株对RIF和RFB的
［4］
与 rpoB 基因突变相关 ，且突变主要集中在 81 bp 耐药水平，以期为临床精准治疗提供实验室依据。
长的 507~533 密码子对应的 RIF 耐药决定区（RIF
1 材料和方法
［5］
resistance determinant region，RRDR） 。目前，WHO
在全球范围推荐的GeneXpert MTB/RIF（简称“Xpert”） 1.1 材料
技术，正是基于该区域，通过设计5个探针全面覆盖 收集南京中医药大学附属南京医院 2022 年

rpoB 基因的 RRDR 区域，可在 2 h 内快速检测 MTB 1 月—2024 年 12 月肺结核患者痰液或肺泡灌洗液
［6］
和RIF耐药性 ，极大地提升了诊断效率。然而，临 样本共 2 236 份，经 MTB 培养和基因 Xpert 检测，去
床中常出现 Xpert 提示 RIF 耐药而后续表型却显示 除结果阴性和重复样本后，将分子和表型药敏同时
敏感的矛盾结果，给治疗决策带来困惑 ［7-8］ 。如何评 阳性的 298 株菌株纳入研究，它们对应 298 例患
价这种“分子耐药⁃表型敏感”现象，已成为当前耐药 者。其中 82 株分子耐药菌株进行 rpoB 基因测序和
结核领域一个争论的焦点，值得研究。 固体表型药敏结果分析，纳入了所有 RIF 表型敏感