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第46卷第7期 李永琪，蒋正东，张玮欣，等. 流感病毒裂解疫苗佐剂对比：Alum⁃CpG肌肉注射与糖纳米颗粒鼻喷递送
2026年7月 的免疫保护效果评价［J］. 南京医科大学学报（自然科学版），2026，46（7）：1020-1028 ·1021 ·

assay. Mice were then challenged with heterologous virus A/Scotland/P2/2015（H1N1）to evaluate body weight changes，survival rate，
lung viral load，and pulmonary pathological changes. Results：Under equivalent antigen doses，intramuscular administration of the split
vaccine adjuvanted with Alum ⁃ CpG significantly elevated serum HI antibody titers. Following viral challenge，mice in this group
achieved a 100% survival rate，accompanied by marked reductions in lung viral loads and substantial alleviation of influenza ⁃
associated inflammatory lung pathology. Although the SNP group induced detectable serum HI antibodies and secretory IgA（sIgA）
responses，and conferred partial protection against influenza virus challenge，its serum HI titers，survival rates，and viral clearance
capacity were all inferior to those observed in the Alum ⁃ CpG group and the split vaccine group. Moreover，higher levels of viral
replication were still detectable in the lung tissues of some mice in the SNP group. Conclusion：The intramuscular vaccination strategy
employing Alum⁃CpG adjuvant markedly enhanced both the immunogenicity and protective efficacy of the split vaccine，demonstrating
superior immune⁃enhancing effects compared to the intranasal SNP delivery. SNP have potential as an intranasal delivery platform，but
their formulation design requires further optimization to improve protective efficacy.
［Key words］ influenza virus；split vaccine；aluminum adjuvant；CpG oligodeoxynucleotide；sugar⁃based lipid nanoparticle
［J Nanjing Med Univ，2026，46（07）：1020⁃1028］

流感是对人类健康构成重大威胁的传染病之 反应。例如，GLA⁃3M⁃052⁃LS 佐剂体系同时包含
一。据世界卫生组织（World Health Organization， TLR4 激动剂吡喃葡萄糖基脂质 A（glucopyranosyl
WHO）统计，流感每年导致近 10 亿人感染，产生 lipid A，GLA）和TLR7/8激动剂3M⁃052，可通过多通
300 万~500 万重症病例，29 万~65 万死亡病例。疫 路协同激活先天免疫系统，从而诱导更广泛的体液
苗接种是防控流感疫情的最有效途径，但疫苗对季 与细胞免疫应答 ［5-7］ 。已有研究表明，该佐剂在亚单
节性流感的保护效果受到病毒抗原漂移及宿主免 位疫苗、蛋白疫苗及mRNA 疫苗中均具有增强免疫
疫差异等多种因素影响，其平均保护率仅为38% 。 原性的潜力，并在新型冠状病毒感染、流感、结核
［1］
佐剂的合理应用被认为是提升疫苗免疫原性 病、艾滋病等传染病疫苗以及肿瘤免疫治疗疫苗中
的重要策略。目前，已获批的季节性流感佐剂疫苗 展现出应用前景 ［8-9］ 。
主要有两种：FLUAD（含角鲨烯的水包油乳液佐剂 本研究在相同裂解抗原背景下，通过小鼠模型
的流感疫苗）和 Inflexal V（病毒囊泡佐剂流感疫 比较Alum⁃CpG复合佐剂肌肉注射、SNP鼻喷递送及
苗），二者均已在欧洲上市 。这些应用表明，通过 裂解疫苗肌肉注射的免疫保护效果，分析不同“佐
［2］
合理选择和设计佐剂可以显著增强疫苗诱导的免 剂⁃给药途径”组合策略对流感疫苗保护效果的影
疫反应，从而提升疫苗保护效果。 响，为流感裂解疫苗的佐剂优化和免疫方案设计提
铝佐剂（aluminum adjuvant，Alum）与 CpG 寡核 供实验依据。
苷 酸（CpG oligodeoxynucleotide，CpG）的 复 合 佐 剂
（Alum⁃CpG）在新型疫苗开发中应用广泛。Alum可 1 材料和方法
有效增强体液免疫反应，主要诱导Th2型免疫应答； 1.1 材料
而 CpG 作为 Toll 样受体（Toll⁃like receptor，TLR）9 无特定病原体（specific pathogen free，SPF）鸡胚
激动剂，可促进 Th1 型免疫反应。二者联合应用能 （江苏勃林格殷格翰公司）；8周龄雌性SPF级BALB/c
够在一定程度上实现 Th1/Th2 免疫应答的平衡，从 小鼠（浙江维通利华公司）；流感病毒疫苗株A/Victoria/
［3］
而提升疫苗整体免疫效果 。因此，Alum 联合 CpG 4897/2022（H1N1）、A/Wisconsin/1009/2024（H3N2）、
策略已在多种疫苗中得到广泛研究与应用。例如， B/California/0855/2024（B/Victoria）（深圳康泰生物制
2022 年 6 月 获 欧 盟 批 准 的 Valneva 公 司 疫 苗 品股份有限公司）；GLA（Avanti Polar Lipids 公司，美
VLA2001就联合了Alum与CpG 。 国）；3M⁃052（Selleck Chemicals 公司，美国）；二棕榈
［4］
糖纳米颗粒（sugar⁃based lipid nanoparticle，SNP） 酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺⁃甲氧基聚乙
作为一类以多糖或寡糖为基础构建的纳米递送载 二醇2000、胆固醇、α⁃生育酚（上海艾伟拓医药科技
［5］
体，具有良好的生物相容性及免疫调节潜力 。通 有限公司）；氯仿（上海国药集团化学试剂有限公
过糖基修饰或自组装方式，SNP 不仅能够实现抗原 司）；Alum、CpG（InvivoGen公司，美国）；受体破坏酶
的高效递送，还可联合多种免疫刺激分子调控免疫 （receptor⁃destroying enzyme，RDE）（生研株式会社，