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第41卷第11期 洪高英,陈 晨,谢海峰. 亲水末端硅烷接枝促进氧化锆表面骨结合的初步证据[J].
2021年11月 南京医科大学学报(自然科学版),2021,41(11):1579-1584 ·1583 ·
2.5 NT组 不会破坏氧化锆表面结构的完整性以及晶相的构
HT组 成,说明该处理方式不存在远期影响氧化锆种植体
2.0 HT⁃MPS组 * *
HT⁃MTMS组
nm ) 1.5 一一一一 三三三三 机械性能的风险。此外,以往文献报道具有四方相
HT⁃MPTS组
占比高的光滑氧化锆表面能够促进 MG⁃63 的细胞
HT⁃APTES组
( 450 D 1.0 三三三三 * 一一一一 生物学行为 。
一一一一
[19]
三三三三
*
三三三三
三三三三
一一一一 材料表面的亲疏水性很大程度上影响细胞的黏
三三三三
0.5 一一一一
[20]
一一一一三三三三 一一一一 一一一一 附性为,通常认为亲水性表面有利于细胞黏附 。免
三三三三
一一一一
0 一一一一三三三三 三三三三 疫荧光图像显示,在HT、HT⁃MPTS、HT⁃APTES 表面
1 d 3 d 5 d
一一一一三三三三 三三三三
三三三三
与NT组比较,P < 0.05(n=3)。 的细胞呈良好的扩散和多边形形态,细胞间可见微
*
图5 MC3T3⁃E1细胞增殖情况 一一一一 丝形成的细胞骨架交通互相联络,而 NT 组细胞呈
Figure 5 Proliferation of MC3T3⁃E1 cells 平铺状态黏附于氧化锆表面,HT⁃MPS组、HT⁃MTMS
组细胞则存在折叠、未铺展的情况,并且 HT⁃MPS、
NT组
HT组 HT⁃MTMS氧化锆表面细胞密度明显低于NT组、HT
2.0
HT⁃MPS组
HT⁃MTMS组 组、HT⁃MPTS 组、HT⁃APTES 组,说明不同末端基团
HT⁃MPTS组
1.5 一一一一 硅烷改性的氧化锆表面影响细胞的早期黏附,其中
HT⁃APTES组
一一一一
*
nm ) 1.2 三三三三 * 一一一一 亲水氨基、巯基末端改性的氧化锆表面对 MC3T3⁃
三三三三
*
三三三三
三三三三
( 560 D 0.5 一一一一 * 一一一一 E1 细胞的黏附有一定促进作用。这可能是由于亲
三三三三
水末端硅烷接枝的氧化锆表面亲水性增加,而甲
三三三三
三三三三
一一一一 一一一一
0.4 一一一一 基、乙烯基末端硅烷接枝的氧化锆表面更加疏水。
三三三三
0 三三三三 而 HT 对表面细胞同样呈现有利的黏附作用,因为
三三三三
7 d 14 d 一一一一 碱化处理可使材料表面亲水性增加。细胞增殖实
一一一一
与NT组比较,P < 0.05(n=3)。 三三三三
*
图6 MC3T3⁃E1细胞ALP表达情况 验提示当细胞培养到第 3 天和第 5 天时,HT⁃MPTS
Figure 6 ALP protein expression of MC3T3⁃E1 cells 组、HT⁃APTES组的吸光度值明显提高,说明亲水氨
基、巯基末端硅烷能够促进 MC3T3⁃E1 细胞增殖。
锆之间的化学亲和性 。 结合以往研究酸酐末端改性的钛表面能够促进Sao⁃2
[8]
由于氧化锆呈化学惰性,表面羟基含量较少, 细胞增殖 [12] ,氨基末端硅烷改性的氧化石墨烯表面
以往研究证实通过紫外线、氧等离子体喷涂、碱化处 能够促进人成纤维细胞 HADF、小鼠胚胎成纤维细
理等方式均能够提高氧化锆表面的羟基密度 [17-18] 。 胞NIH⁃3T3、MG⁃63等多种细胞的增殖 [10] ,或许可以
因此本研究预先采取碱化处理以提高氧化锆表面 认为促进细胞增殖是亲水末端硅烷的共性,而非局
的羟基密度,进而接枝硅烷提高硅烷与氧化锆间的 限于特定的末端硅烷。MC3T3⁃E1细胞的早期分化
结合效率。X射线光电子能谱结果显示氧化锆表面 可以通过检测 ALP 的表达来评价。根据对各组细
经碱热处理后,其表面的C元素下降,O元素含量提 胞培养7、14 d后的ALP定量检测情况,HT⁃MPTS和
高,一定程度上说明碱热处理有效提高了氧化锆表 HT⁃APTES 组吸光度值提高,而 HT⁃MPS 组和 HT⁃
面的羟基含量。从图1可见各硅烷改性组在346 eV MTMS组吸光度值下降,说明亲水氨基、巯基末端硅
附近的 Zr3p1 峰、332 eV 附近的 Zr3p2 峰、180 eV 附 烷能够促进MC3T3⁃E1细胞分化,疏水甲基、乙烯基
近的 Zr3d峰分别出现下降,而在102 eV附近出现Si 末端硅烷抑制其分化,亲水末端硅烷促进MC3T3⁃E1
峰,且 HT⁃MPS 组、HT⁃MTMS 组、HT⁃MPTS 组、HT⁃ 细胞分化的具体机制有待进一步研究。
APTES 组氧化锆表面 Si 元素原子百分比分别提高 本研究观察比较了4种不同亲疏水末端硅烷改
至 9.57%、11.48%、9.18%、8.23%,说明硅烷有效接 性的氧化锆表面对 MC3T3⁃E1 细胞黏附、增殖和分
枝到氧化锆表面。在 NT 组及 HT 组氧化锆样本表 化的影响。以上实验结果认为亲水末端硅烷应用
面同样检测出了少量的 Si 元素,这或许是因为在 于氧化锆种植体表面能够促进早期骨结合。此外,
用碳化硅纸进行抛光处理时,C、Si 元素残留在样 硅烷作为偶联剂不仅单独提供活性,其末端的有机
本表面。 官能团能够与有机物结合,提供一个结合其他活性成
此外,X 射线衍射结果证实碱热及硅烷处理均 分的平台,潜在地拓宽了氧化锆表面改性的策略,为