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第41卷第11期            洪高英,陈 晨,谢海峰. 亲水末端硅烷接枝促进氧化锆表面骨结合的初步证据[J].
                 2021年11月                    南京医科大学学报(自然科学版),2021,41(11):1579-1584                      ·1583 ·


                   2.5   NT组                                      不会破坏氧化锆表面结构的完整性以及晶相的构
                         HT组                                      成,说明该处理方式不存在远期影响氧化锆种植体
                   2.0   HT⁃MPS组                        *  *
                         HT⁃MTMS组
                  nm )  1.5  一一一一                        三三三三     机械性能的风险。此外,以往文献报道具有四方相
                         HT⁃MPTS组
                                                                  占比高的光滑氧化锆表面能够促进 MG⁃63 的细胞
                         HT⁃APTES组
                  ( 450  D 1.0  三三三三         *          一一一一      生物学行为 。
                       一一一一
                                                                            [19]
                       三三三三
                                           *
                                            三三三三
                                                         三三三三
                                           一一一一                       材料表面的亲疏水性很大程度上影响细胞的黏
                                            三三三三
                   0.5                     一一一一
                                                                                                         [20]
                              一一一一三三三三     一一一一 一一一一              附性为,通常认为亲水性表面有利于细胞黏附 。免
                                            三三三三
                                           一一一一
                    0         一一一一三三三三      三三三三                  疫荧光图像显示,在HT、HT⁃MPTS、HT⁃APTES 表面
                           1 d          3 d          5 d
                              一一一一三三三三      三三三三
                                                         三三三三
                             与NT组比较,P < 0.05(n=3)。                的细胞呈良好的扩散和多边形形态,细胞间可见微
                                      *
                          图5 MC3T3⁃E1细胞增殖情况             一一一一      丝形成的细胞骨架交通互相联络,而 NT 组细胞呈
                      Figure 5 Proliferation of MC3T3⁃E1 cells    平铺状态黏附于氧化锆表面,HT⁃MPS组、HT⁃MTMS
                                                                  组细胞则存在折叠、未铺展的情况,并且 HT⁃MPS、
                               NT组
                               HT组                                HT⁃MTMS氧化锆表面细胞密度明显低于NT组、HT
                          2.0
                               HT⁃MPS组
                               HT⁃MTMS组                           组、HT⁃MPTS 组、HT⁃APTES 组,说明不同末端基团
                               HT⁃MPTS组
                          1.5  一一一一                               硅烷改性的氧化锆表面影响细胞的早期黏附,其中
                               HT⁃APTES组
                             一一一一
                                                   *
                         nm )  1.2  三三三三  *      一一一一             亲水氨基、巯基末端改性的氧化锆表面对 MC3T3⁃
                                                   三三三三
                                                  *
                             三三三三
                                      三三三三
                         ( 560  D 0.5  一一一一     * 一一一一            E1 细胞的黏附有一定促进作用。这可能是由于亲
                                                   三三三三
                                                                  水末端硅烷接枝的氧化锆表面亲水性增加,而甲
                                                   三三三三
                                      三三三三
                                    一一一一         一一一一
                          0.4                    一一一一             基、乙烯基末端硅烷接枝的氧化锆表面更加疏水。
                                                   三三三三
                           0                       三三三三           而 HT 对表面细胞同样呈现有利的黏附作用,因为
                                      三三三三
                                  7 d         14 d 一一一一           碱化处理可使材料表面亲水性增加。细胞增殖实
                                    一一一一
                             与NT组比较,P < 0.05(n=3)。 三三三三
                                      *
                        图6 MC3T3⁃E1细胞ALP表达情况                      验提示当细胞培养到第 3 天和第 5 天时,HT⁃MPTS
                  Figure 6 ALP protein expression of MC3T3⁃E1 cells  组、HT⁃APTES组的吸光度值明显提高,说明亲水氨
                                                                  基、巯基末端硅烷能够促进 MC3T3⁃E1 细胞增殖。
                锆之间的化学亲和性 。                                       结合以往研究酸酐末端改性的钛表面能够促进Sao⁃2
                                  [8]
                    由于氧化锆呈化学惰性,表面羟基含量较少,                          细胞增殖    [12] ,氨基末端硅烷改性的氧化石墨烯表面
                以往研究证实通过紫外线、氧等离子体喷涂、碱化处                           能够促进人成纤维细胞 HADF、小鼠胚胎成纤维细
                理等方式均能够提高氧化锆表面的羟基密度                      [17-18] 。  胞NIH⁃3T3、MG⁃63等多种细胞的增殖          [10] ,或许可以
                因此本研究预先采取碱化处理以提高氧化锆表面                             认为促进细胞增殖是亲水末端硅烷的共性,而非局
                的羟基密度,进而接枝硅烷提高硅烷与氧化锆间的                            限于特定的末端硅烷。MC3T3⁃E1细胞的早期分化
                结合效率。X射线光电子能谱结果显示氧化锆表面                            可以通过检测 ALP 的表达来评价。根据对各组细
                经碱热处理后,其表面的C元素下降,O元素含量提                           胞培养7、14 d后的ALP定量检测情况,HT⁃MPTS和
                高,一定程度上说明碱热处理有效提高了氧化锆表                            HT⁃APTES 组吸光度值提高,而 HT⁃MPS 组和 HT⁃
                面的羟基含量。从图1可见各硅烷改性组在346 eV                         MTMS组吸光度值下降,说明亲水氨基、巯基末端硅
                附近的 Zr3p1 峰、332 eV 附近的 Zr3p2 峰、180 eV 附           烷能够促进MC3T3⁃E1细胞分化,疏水甲基、乙烯基
                近的 Zr3d峰分别出现下降,而在102 eV附近出现Si                     末端硅烷抑制其分化,亲水末端硅烷促进MC3T3⁃E1
                峰,且 HT⁃MPS 组、HT⁃MTMS 组、HT⁃MPTS 组、HT⁃              细胞分化的具体机制有待进一步研究。
                APTES 组氧化锆表面 Si 元素原子百分比分别提高                           本研究观察比较了4种不同亲疏水末端硅烷改
                至 9.57%、11.48%、9.18%、8.23%,说明硅烷有效接                性的氧化锆表面对 MC3T3⁃E1 细胞黏附、增殖和分
                枝到氧化锆表面。在 NT 组及 HT 组氧化锆样本表                        化的影响。以上实验结果认为亲水末端硅烷应用
                面同样检测出了少量的 Si 元素,这或许是因为在                          于氧化锆种植体表面能够促进早期骨结合。此外,
                用碳化硅纸进行抛光处理时,C、Si 元素残留在样                          硅烷作为偶联剂不仅单独提供活性,其末端的有机
                本表面。                                              官能团能够与有机物结合,提供一个结合其他活性成
                    此外,X 射线衍射结果证实碱热及硅烷处理均                         分的平台,潜在地拓宽了氧化锆表面改性的策略,为
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